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細胞名稱(cheng):NCI-N87 人胃癌細胞
貨號(hao):H074
種屬:人
細胞來源:從ATCC/中(zhong)科(ke)院/協和醫院等地引進(jin)
生長特性:貼壁 上皮樣
培(pei)養條(tiao)件(jian):培(pei)養基:90%RPMI-1640+10%FBS(推薦使用HAKATA優(you)等胎(tai)牛血清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣相:95%空(kong)氣,5%二(er)氧化(hua)碳
傳代說明:
1.用75%酒精噴(pen)灑整個培(pei)養(yang)瓶消(xiao)毒(du),將(jiang)其(qi)平躺置于培(pei)養(yang)箱中進(jin)行(xing)1-3小時的(de)(de)緩沖,.然(ran)后置于無菌操作臺,打(da)開(kai)瓶口,將(jiang)其(qi)中的(de)(de)培(pei)養(yang)液去掉,再往其(qi)中加入5-6mL新(xin)鮮(xian)培(pei)養(yang)基(以T25培(pei)養(yang)瓶為(wei)例)并置于細胞培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang),根據(ju)細胞生長狀況(kuang)及(ji)培(pei)養(yang)基顏色變化對其(qi)進(jin)行(xing)換液以及(ji)傳代,一(yi)般2到3天換一(yi)次液;
2.待細胞(bao)長滿瓶底(di)面積80%-90%,需要對(dui)其進(jin)行傳(chuan)代,傳(chuan)代比例(li)為1:3到1:8;
3傳代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)液(ye)置(zhi)(zhi)于37°預熱,倒(dao)掉培(pei)養(yang)(yang)瓶中(zhong)的培(pei)養(yang)(yang)基(ji),往培(pei)養(yang)(yang)瓶中(zhong)加入(ru)3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗滌(di)后(hou)棄去(qu)。往瓶中(zhong)加1-2 ml預熱好(hao)的胰酶,置(zhi)(zhi)于37°孵育消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)(次(ci)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)需時(shi)(shi)(shi)常取出置(zhi)(zhi)于顯(xian)(xian)微鏡下(xia)觀察(cha),以顯(xian)(xian)微鏡下(xia)細(xi)胞(bao)觸角回收變圓、輕(qing)拍瓶壁見細(xi)胞(bao)脫落為(wei)*消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)時(shi)(shi)(shi)間(jian),記錄*消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)時(shi)(shi)(shi)間(jian),以便于下(xia)次(ci)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)),消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)好(hao)后(hou)加入(ru)3ml*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)終止消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)。用移液(ye)槍輕(qing)輕(qing)吹打瓶壁上(shang)的細(xi)胞(bao),使之(zhi)*脫落,然后(hou)收集細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye),1200rpm離心(xin)3min,棄上(shang)清,加入(ru)*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)重懸(xuan)細(xi)胞(bao),進行(xing)傳代。
保存(cun)說明:
凍存條(tiao)件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備注:建(jian)議使(shi)用(yong)(yong)本公司的冷凍液(H-W-100),用(yong)(yong)4度保存的冷凍液直(zhi)接重(zhong)懸細(xi)胞,不(bu)能預熱后(hou)使(shi)用(yong)(yong)。)
保(bao)存條件:液(ye)氮存儲
常見問題說明(ming):
1.培養瓶有破裂,培養液有漏液:細(xi)胞極大可能會污染,所(suo)以我們(men)會及時(shi)安排(pai)幫(bang)老師解(jie)決。
2.收到細胞后(hou)盡快更換為含 10%血清(qing)的新鮮培(pei)養(yang)基(ji),如因特殊(shu)情況需(xu)要繼(ji)續使(shi)用(yong)原瓶培(pei)養(yang)基(ji),請在原瓶培(pei)養(yang)基(ji)中額外添(tian)加 10%的血清(qing)(原瓶培(pei)養(yang)基(ji)的繼(ji)續使(shi)用(yong)時間zui長不宜(yi)超過 72 小(xiao)時)
3.細(xi)胞(bao)(bao)漂浮:培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶不(bu)開封(feng),瓶口(kou)酒精(jing)擦拭后平躺放置在培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱。1-2小時后觀(guan)察,如細(xi)胞(bao)(bao)大部分又(you)貼回瓶底(di),表明細(xi)胞(bao)(bao)活力正常,剩余漂浮的細(xi)胞(bao)(bao)可以去掉,留8-10ml培(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)(ye)培(pei)養(yang)(yang)(yang)觀(guan)察,細(xi)胞(bao)(bao)生長至匯合度(du)80%,進行消化傳代;如細(xi)胞(bao)(bao)還是不(bu)貼壁,將細(xi)胞(bao)(bao)離心收(shou)集轉到新培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶,原(yuan)培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶加(jia)部分培(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)(ye)繼續培(pei)養(yang)(yang)(yang),中間(jian)注意觀(guan)察,我們的技術人(ren)員會一直(zhi)跟蹤指導,直(zhi)到問題解決(jue)。
供應商:慧穎細胞(bao)庫 人源均來自于第三方str鑒定,請放心購買
供應限制:僅供科研使用
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SUER1255(XR) HuCCT1細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1257(XR) huH-1細(xi)胞,肝癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1258(XR) HuH28細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1259(XR) HuH-6細胞,肝母(mu)細胞瘤細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細(xi)胞,肝癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1264(XR) HuT 102細胞,霉菌病fungoides-Sezary綜合癥細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細(xi)(xi)胞(bao),正(zheng)常人皮膚(fu)角(jiao)質(zhi)細(xi)(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)胞,神經(jing)母細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞(bao),人甲(jia)狀腺未分化(hua)癌(ai)細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1944(XR) TAM-1細(xi)胞(bao),人(ren)涎腺腺樣囊性(xing)癌(ai)細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1945(XR) NHBE細(xi)胞,人(ren)正常支(zhi)氣管上皮細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元