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細(xi)胞名稱:B-CPAP 人(ren)甲狀腺細(xi)胞
貨號:H075
種屬:人
細(xi)胞(bao)來源:從ATCC/中科院/協和醫院等地引進
生長特性:貼壁(bi) 上皮樣
培養條(tiao)件:培養基(ji):90%RPMI-1640+10%FBS(推薦使用HAKATA優(you)等(deng)胎牛(niu)血(xue)清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣(qi)相:95%空氣(qi),5%二(er)氧化(hua)碳
傳代說明:
1.用75%酒精噴灑(sa)整個培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)消毒,將其(qi)平躺(tang)置(zhi)(zhi)于(yu)(yu)培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱中進行1-3小時的緩沖,.然后(hou)置(zhi)(zhi)于(yu)(yu)無菌操(cao)作臺,打開瓶(ping)口,將其(qi)中的培(pei)養(yang)(yang)(yang)液去掉,再往其(qi)中加入5-6mL新鮮(xian)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(以T25培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)為例)并(bing)置(zhi)(zhi)于(yu)(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱中培(pei)養(yang)(yang)(yang),根(gen)據細(xi)胞(bao)生長狀況及(ji)(ji)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基顏色變化對其(qi)進行換(huan)液以及(ji)(ji)傳代,一般(ban)2到3天(tian)換(huan)一次液;
2.待細(xi)胞(bao)長(chang)滿瓶底面積80%-90%,需要對(dui)其進行傳代(dai),傳代(dai)比例為1:3到(dao)1:8;
3傳(chuan)代步驟:將0.25%胰(yi)酶-0.53 mM EDTA消化(hua)液置于(yu)(yu)(yu)37°預熱,倒掉培(pei)(pei)養(yang)瓶中的培(pei)(pei)養(yang)基(ji),往(wang)培(pei)(pei)養(yang)瓶中加入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后棄(qi)去。往(wang)瓶中加1-2 ml預熱好的胰(yi)酶,置于(yu)(yu)(yu)37°孵育消化(hua)(次消化(hua)需時常(chang)取出置于(yu)(yu)(yu)顯微鏡下(xia)觀察,以(yi)顯微鏡下(xia)細(xi)(xi)胞(bao)觸角(jiao)回收變圓(yuan)、輕拍瓶壁見(jian)細(xi)(xi)胞(bao)脫(tuo)落為*消化(hua)時間,記(ji)錄*消化(hua)時間,以(yi)便(bian)于(yu)(yu)(yu)下(xia)次消化(hua)),消化(hua)好后加入3ml*培(pei)(pei)養(yang)基(ji)終止(zhi)消化(hua)。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xi)(xi)胞(bao),使(shi)之*脫(tuo)落,然后收集細(xi)(xi)胞(bao)懸(xuan)液,1200rpm離(li)心3min,棄(qi)上清,加入*培(pei)(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)細(xi)(xi)胞(bao),進行傳(chuan)代。
保存說明:
凍存條件:80%*培(pei)養基+10%FBS+10%DMSO
(備注:建議使用本公司的(de)(de)冷凍(dong)液(ye)(H-W-100),用4度保(bao)存的(de)(de)冷凍(dong)液(ye)直接重懸細胞,不能預(yu)熱后使用。)
保存(cun)條件:液氮存(cun)儲
常見問題說明:
1.培(pei)養瓶有破(po)裂,培(pei)養液(ye)有漏液(ye):細(xi)胞極大可能會污(wu)染(ran),所(suo)以(yi)我們會及(ji)時安(an)排幫老師解(jie)決。
2.收(shou)到細(xi)胞后(hou)盡快(kuai)更換為(wei)含(han) 10%血清(qing)的(de)新鮮培(pei)養(yang)基(ji),如因特殊情況需要繼續(xu)使用原(yuan)(yuan)瓶培(pei)養(yang)基(ji),請在原(yuan)(yuan)瓶培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)額(e)外添加(jia) 10%的(de)血清(qing)(原(yuan)(yuan)瓶培(pei)養(yang)基(ji)的(de)繼續(xu)使用時間(jian)zui長不宜超過 72 小時)
3.細(xi)(xi)胞(bao)漂浮(fu):培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)(ping)不開封,瓶(ping)(ping)(ping)口酒精擦拭后平躺放置在培(pei)(pei)養(yang)箱。1-2小時后觀(guan)察,如細(xi)(xi)胞(bao)大部(bu)分(fen)又貼(tie)回瓶(ping)(ping)(ping)底,表明(ming)細(xi)(xi)胞(bao)活(huo)力正常,剩余漂浮(fu)的細(xi)(xi)胞(bao)可以去掉,留(liu)8-10ml培(pei)(pei)養(yang)液(ye)培(pei)(pei)養(yang)觀(guan)察,細(xi)(xi)胞(bao)生長至匯合度80%,進行(xing)消(xiao)化傳代;如細(xi)(xi)胞(bao)還是不貼(tie)壁,將(jiang)細(xi)(xi)胞(bao)離心(xin)收集轉到新培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)(ping),原培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)(ping)加部(bu)分(fen)培(pei)(pei)養(yang)液(ye)繼續(xu)培(pei)(pei)養(yang),中間注意(yi)觀(guan)察,我們(men)的技術(shu)人員會一(yi)直跟蹤指導,直到問題解決。
供應商:慧穎細胞庫(ku) 人源均來自于第(di)三(san)方str鑒定,請放心購買
供(gong)應限制:僅供(gong)科研使用
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SUER1255(XR) HuCCT1細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1257(XR) huH-1細(xi)胞,肝癌(ai)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1258(XR) HuH28細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1259(XR) HuH-6細(xi)胞(bao),肝母細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞,肝(gan)癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細(xi)胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1264(XR) HuT 102細(xi)胞,霉菌病fungoides-Sezary綜合癥細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1940(XR) NHEK細(xi)胞(bao),正常人皮膚角(jiao)質細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細胞(bao)(bao)(bao),神經母細胞(bao)(bao)(bao)瘤細胞(bao)(bao)(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細(xi)胞,人(ren)甲狀腺未分化癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1944(XR) TAM-1細(xi)胞,人涎腺(xian)腺(xian)樣囊性(xing)癌(ai)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細胞,人正常支氣管(guan)上皮(pi)細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元