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細胞名稱:HK-2人腎皮(pi)質近(jin)曲小(xiao)管上皮(pi)細胞
貨號:H077
種屬:人(ren)
細胞來源:從ATCC/中(zhong)科院/協(xie)和醫(yi)院等地引進
生長特性:貼壁 上皮樣(yang)
培養(yang)(yang)條件(jian):培養(yang)(yang)基:90%DMEM/F-12+10%FBS(推薦使用HAKATA優(you)等胎牛血(xue)清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣相:95%空氣,5%二氧化碳(tan)
傳代說明:
1.用75%酒精噴灑整(zheng)個培(pei)養(yang)瓶消毒,將其(qi)平躺置(zhi)(zhi)于培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)1-3小時的緩(huan)沖,.然后置(zhi)(zhi)于無菌操(cao)作臺,打(da)開瓶口,將其(qi)中(zhong)的培(pei)養(yang)液(ye)去掉(diao),再往其(qi)中(zhong)加入5-6mL新鮮培(pei)養(yang)基(以(yi)T25培(pei)養(yang)瓶為例)并置(zhi)(zhi)于細胞(bao)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang),根據細胞(bao)生長狀(zhuang)況及培(pei)養(yang)基顏色(se)變化(hua)對其(qi)進(jin)行(xing)換(huan)液(ye)以(yi)及傳代,一(yi)般2到3天換(huan)一(yi)次液(ye);
2.待細胞(bao)長滿瓶(ping)底面(mian)積80%-90%,需要(yao)對(dui)其(qi)進行傳代(dai),傳代(dai)比(bi)例為1:3到1:8;
3傳代步驟:將0.25%胰(yi)酶-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)化(hua)液置(zhi)于37°預熱(re),倒(dao)掉培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)中的培(pei)(pei)養(yang)基,往培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)中加(jia)(jia)入3-5 ml PBS,輕(qing)晃(huang)洗滌(di)后棄去。往瓶(ping)中加(jia)(jia)1-2 ml預熱(re)好(hao)的胰(yi)酶,置(zhi)于37°孵育(yu)消(xiao)(xiao)化(hua)(次消(xiao)(xiao)化(hua)需時(shi)常取(qu)出(chu)置(zhi)于顯微鏡下觀察(cha),以顯微鏡下細(xi)(xi)胞觸(chu)角回(hui)收變圓、輕(qing)拍(pai)瓶(ping)壁見細(xi)(xi)胞脫落為*消(xiao)(xiao)化(hua)時(shi)間(jian),記錄*消(xiao)(xiao)化(hua)時(shi)間(jian),以便于下次消(xiao)(xiao)化(hua)),消(xiao)(xiao)化(hua)好(hao)后加(jia)(jia)入3ml*培(pei)(pei)養(yang)基終止消(xiao)(xiao)化(hua)。用移液槍輕(qing)輕(qing)吹打瓶(ping)壁上(shang)的細(xi)(xi)胞,使之*脫落,然后收集細(xi)(xi)胞懸(xuan)液,1200rpm離心3min,棄上(shang)清(qing),加(jia)(jia)入*培(pei)(pei)養(yang)基重懸(xuan)細(xi)(xi)胞,進(jin)行傳代。
保存說(shuo)明:
凍存(cun)條件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備(bei)注:建議使用本公司的(de)冷凍液(H-W-100),用4度保存(cun)的(de)冷凍液直接重懸細胞(bao),不能預熱后使用。)
保存(cun)條件:液氮存(cun)儲
常見問題說明:
1.培養瓶有(you)破裂,培養液(ye)有(you)漏(lou)液(ye):細胞極大可能會污(wu)染(ran),所以我們會及時(shi)安(an)排幫老(lao)師解決。
2.收到細胞后盡(jin)快更換為含(han) 10%血清的(de)(de)新鮮培(pei)(pei)養(yang)基,如因特殊情況需要(yao)繼(ji)續使用原瓶(ping)培(pei)(pei)養(yang)基,請在原瓶(ping)培(pei)(pei)養(yang)基中額外添加 10%的(de)(de)血清(原瓶(ping)培(pei)(pei)養(yang)基的(de)(de)繼(ji)續使用時(shi)間(jian)zui長(chang)不(bu)宜(yi)超過 72 小(xiao)時(shi))
3.細胞漂浮(fu):培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)不開封(feng),瓶(ping)(ping)口酒精(jing)擦拭(shi)后平(ping)躺放置在(zai)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)箱。1-2小時后觀察,如(ru)細胞大部分又貼回瓶(ping)(ping)底,表明細胞活力正常,剩余漂浮(fu)的細胞可以去掉,留8-10ml培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)液培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如(ru)細胞還是不貼壁,將細胞離心收集(ji)轉到(dao)新培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping),原培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)加部分培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)液繼續培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang),中間注(zhu)意觀察,我們的技術人員會一直跟(gen)蹤指導,直到(dao)問題解決(jue)。
供(gong)應商(shang):慧(hui)穎(ying)細(xi)胞(bao)庫 人源(yuan)均(jun)來自于(yu)第三(san)方(fang)str鑒定,請放心購(gou)買
供應限制:僅供科(ke)研(yan)使用(yong)
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SUER1252(XR) HT-29細(xi)胞(bao),腺癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1253(XR) HT55細(xi)(xi)胞,腺癌細(xi)(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1254(XR) HTK-細胞,漿細胞骨髓瘤 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1255(XR) HuCCT1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1257(XR) huH-1細胞,肝癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1258(XR) HuH28細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1259(XR) HuH-6細胞(bao),肝(gan)母細胞(bao)瘤細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1260(XR) HuH-7細(xi)胞,肝癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1264(XR) HuT 102細胞(bao),霉菌病fungoides-Sezary綜(zong)合(he)癥細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1940(XR) NHEK細胞,正(zheng)常人皮膚角質(zhi)細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)(xi)胞,神(shen)經母細(xi)(xi)胞瘤細(xi)(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞(bao),人甲狀腺未分化癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1944(XR) TAM-1細胞(bao),人涎(xian)腺腺樣囊性癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細(xi)胞(bao),人正常支氣(qi)管上皮細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元