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細(xi)胞(bao)名稱:HL60/ADR人早幼粒急(ji)性白血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao)耐(nai)阿霉素(su)株
貨號:A007
種屬:耐(nai)藥株
細胞(bao)來源:從ATCC/中科院/協(xie)和醫院等地引(yin)進
生(sheng)長特性:懸(xuan)浮 成髓細胞(bao)樣(yang)
培養條件:培養基:90% RPMI-1640 +10% FBS +1000ng/ml ADR(推薦使用HAKATA優等(deng)胎牛血(xue)清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣相:95%空氣,5%二氧(yang)化碳
傳(chuan)代說明:
1.用75%酒精噴灑(sa)整個(ge)培(pei)(pei)養(yang)瓶消毒(du),將其平躺置于培(pei)(pei)養(yang)箱中(zhong)進(jin)行(xing)1-3小時的緩沖,.然后置于無菌操(cao)作臺(tai),打開(kai)瓶口(kou),將其中(zhong)的培(pei)(pei)養(yang)液(ye)去(qu)掉,再往(wang)其中(zhong)加入5-6mL新鮮培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(以(yi)T25培(pei)(pei)養(yang)瓶為例(li))并置于細(xi)胞培(pei)(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)(pei)養(yang),根據細(xi)胞生長狀況(kuang)及培(pei)(pei)養(yang)基(ji)顏色變化對其進(jin)行(xing)換液(ye)以(yi)及傳代,一般2到3天換一次液(ye);
2.待細胞長(chang)滿瓶(ping)底面積80%-90%,需(xu)要對其進行傳(chuan)代(dai),傳(chuan)代(dai)比例(li)為1:3到1:8;
3傳(chuan)代步驟(zou):將(jiang)0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)化液置(zhi)于(yu)37°預(yu)熱(re),倒(dao)掉(diao)培養瓶中的(de)培養基,往培養瓶中加(jia)(jia)入3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗滌后(hou)棄去。往瓶中加(jia)(jia)1-2 ml預(yu)熱(re)好的(de)胰酶,置(zhi)于(yu)37°孵育消(xiao)(xiao)化(次消(xiao)(xiao)化需時常(chang)取(qu)出置(zhi)于(yu)顯微(wei)鏡下觀察,以顯微(wei)鏡下細(xi)(xi)胞(bao)觸角回收(shou)變圓(yuan)、輕(qing)拍瓶壁見細(xi)(xi)胞(bao)脫落(luo)為(wei)*消(xiao)(xiao)化時間,記錄*消(xiao)(xiao)化時間,以便于(yu)下次消(xiao)(xiao)化),消(xiao)(xiao)化好后(hou)加(jia)(jia)入3ml*培養基終止(zhi)消(xiao)(xiao)化。用移液槍輕(qing)輕(qing)吹(chui)打瓶壁上的(de)細(xi)(xi)胞(bao),使之*脫落(luo),然后(hou)收(shou)集細(xi)(xi)胞(bao)懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加(jia)(jia)入*培養基重(zhong)懸細(xi)(xi)胞(bao),進行(xing)傳(chuan)代。
保存說(shuo)明:
凍(dong)存(cun)條件(jian):80%*培養(yang)基(ji)+10%FBS+10%DMSO
(備(bei)注:建議使用(yong)(yong)本公(gong)司的(de)冷凍(dong)液(H-W-100),用(yong)(yong)4度保存的(de)冷凍(dong)液直接重懸細(xi)胞,不能預熱后使用(yong)(yong)。)
保(bao)存(cun)條(tiao)件(jian):液氮存(cun)儲
常(chang)見(jian)問題說明:
1.培養(yang)瓶有(you)破裂,培養(yang)液有(you)漏液:細胞極大可能會污染,所(suo)以我們會及時安排幫(bang)老(lao)師解決。
2.收到細(xi)胞后(hou)盡快更(geng)換為含 10%血清(qing)的(de)新(xin)鮮培(pei)(pei)養基,如(ru)因特殊情(qing)況(kuang)需要繼續使用(yong)原(yuan)(yuan)瓶培(pei)(pei)養基,請在原(yuan)(yuan)瓶培(pei)(pei)養基中(zhong)額外添(tian)加 10%的(de)血清(qing)(原(yuan)(yuan)瓶培(pei)(pei)養基的(de)繼續使用(yong)時間zui長不宜(yi)超過 72 小時)
3.細(xi)(xi)(xi)胞漂浮:培(pei)養(yang)瓶(ping)不(bu)開(kai)封(feng),瓶(ping)口酒精擦拭(shi)后(hou)平躺放置在培(pei)養(yang)箱。1-2小時(shi)后(hou)觀察,如細(xi)(xi)(xi)胞大(da)部(bu)分又貼(tie)回瓶(ping)底(di),表明細(xi)(xi)(xi)胞活力正常,剩余漂浮的細(xi)(xi)(xi)胞可以去掉,留(liu)8-10ml培(pei)養(yang)液(ye)培(pei)養(yang)觀察,細(xi)(xi)(xi)胞生(sheng)長至匯合度80%,進(jin)行消化傳代(dai);如細(xi)(xi)(xi)胞還是不(bu)貼(tie)壁,將細(xi)(xi)(xi)胞離(li)心收集轉到新培(pei)養(yang)瓶(ping),原培(pei)養(yang)瓶(ping)加部(bu)分培(pei)養(yang)液(ye)繼續培(pei)養(yang),中(zhong)間注意(yi)觀察,我(wo)們的技術人員會(hui)一直跟蹤指(zhi)導,直到問題(ti)解決。
供(gong)應商:慧穎細胞庫 人(ren)源均來自于(yu)第三(san)方str鑒定,請放心(xin)購買(mai)
供應限(xian)制:僅供科研使用
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SUER0958(XR) BICR 22細(xi)胞(bao)(bao),鱗狀細(xi)胞(bao)(bao)癌,扁(bian)平上(shang)皮癌細(xi)胞(bao)(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
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SUER1254(XR) HTK-細(xi)胞(bao),漿細(xi)胞(bao)骨髓瘤 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1255(XR) HuCCT1細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1257(XR) huH-1細胞(bao)(bao),肝癌細胞(bao)(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1258(XR) HuH28細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1259(XR) HuH-6細(xi)胞,肝母細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞,肝癌(ai)細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1261(XR) HuNS1細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1262(XR) HUP-T3細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1264(XR) HuT 102細(xi)胞,霉菌病fungoides-Sezary綜合癥細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細胞,正常人皮膚角質細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)胞,神經母細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞(bao),人甲狀腺未分(fen)化(hua)癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
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SUER1945(XR) NHBE細胞,人正常支(zhi)氣管(guan)上皮(pi)細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元