NCI-H1437細(xi)胞(bao)/人非小細(xi)胞(bao)肺(fei)癌細(xi)胞(bao)    培(pei)養步(bu)驟

產品(pin)名稱：NCI-H14373細胞

中文名稱：人非小細胞肺(fei)癌細胞；NCI-H1437

規格：T25

形(xing)態特征：1976年分離得到。 

生長狀態(tai)：上皮樣　

特征特性：貼壁生長

培(pei)養條件(jian)：RPMI1640+10%FBS（推(tui)薦HAKATA優等胎牛(niu)血(xue)清貨(huo)號：HN-FBS-500）

傳代(dai)方法：1：2-1:6傳代(dai) ,每(mei)周換液2次。

凍(dong)存(cun)條(tiao)件(jian)：HAKATA ® 無血清細胞凍(dong)存(cun)液 貨(huo)號：H-W-100 規格：100ML

支原體(ti)(ti)檢測(ce)：陰性

使(shi)用權限：A類

參考(kao)文獻(xian)：

供應商：上海慧穎生物(wu)科(ke)技有(you)限公(gong)司

復蘇周期：10個(ge)工作(zuo)日左右(you)

培養步(bu)驟：

1）復蘇(su)細胞(bao)(bao)：將含有1mL細胞(bao)(bao)懸液(ye)的凍(dong)存管(guan)在37℃水浴中(zhong)迅速(su)搖晃解凍(dong)，加(jia)(jia)入5mL培(pei)(pei)養(yang)基混合均(jun)勻。在1000RPM條件(jian)下離心5分(fen)鐘(zhong)，棄去上清(qing)液(ye)，補加(jia)(jia)4-6mL*培(pei)(pei)養(yang)基后吹勻。然后將所有細胞(bao)(bao)懸液(ye)加(jia)(jia)入培(pei)(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)(pei)養(yang)過夜（或將細胞(bao)(bao)懸液(ye)加(jia)(jia)入6cm皿中(zhong)），培(pei)(pei)養(yang)過夜。第二天換液(ye)并檢查細胞(bao)(bao)密(mi)度。

2）細(xi)胞(bao)傳代：如果細(xi)胞(bao)密度達(da)80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳代培養。

1、對(dui)于(yu)貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄(qi)去培養上(shang)清，用不(bu)含鈣、鎂離(li)子的(de)PBS潤(run)洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶中，置于37℃培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱中消化(hua)1-2min，然后在(zai)顯微鏡下觀察細(xi)胞消化(hua)情況(kuang)，若細(xi)胞大(da)部分(fen)變圓并脫落，迅速拿回(hui)操作臺，輕敲幾下培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶后加5ml以上含10%血清的*培(pei)(pei)養(yang)(yang)基終止(zhi)消化(hua)。

3.輕(qing)輕(qing)吹打細胞，*脫落后吸出，在1000RPM條(tiao)件(jian)下離心(xin)8-10分鐘，棄去上清液(ye)，補加1-2mL培(pei)養(yang)液(ye)后吹勻(yun)。

4. 按5-6ml/瓶補(bu)加(jia)培養液(ye)，將(jiang)細胞(bao)懸液(ye)按1：2到1：5的(de)比例分到新的(de)含(han)5-6 ml培養液(ye)的(de)新皿中或者瓶中。

PS：若(ruo)客戶(hu)收到(dao)2ml小管細(xi)胞，收到(dao)細(xi)胞后，用75%酒精噴灑整個管子消(xiao)毒后放到(dao)超凈(jing)臺或安全柜(ju)內，嚴格無菌操(cao)作(zuo)；將小管細(xi)胞轉移至T25培養(yang)(yang)(yang)瓶或6cm培養(yang)(yang)(yang)皿，加入5ml左(zuo)右*培養(yang)(yang)(yang)基(ji)混勻(yun)，放入培養(yang)(yang)(yang)箱過(guo)夜(ye)培養(yang)(yang)(yang)后查(cha)看(kan)細(xi)胞密度：若(ruo)密度未超過(guo)80%，換液繼續(xu)培養(yang)(yang)(yang)，視情況傳代或者凍存。若(ruo)密度超過(guo)80%，可(ke)直接進行傳代（方法同上）。

2、對(dui)于懸浮(fu)細胞，傳代可參考以(yi)下方法(fa)：

方法一(yi)：收集細胞，1000RPM條件下(xia)離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培(pei)養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的(de)比例分到新(xin)的(de)含(han)8ml培(pei)養基的(de)新(xin)皿中(zhong)或者瓶中(zhong)。

方法二：可選擇(ze)半數(shu)換液(ye)方式，棄去半數(shu)培(pei)養(yang)基后，將(jiang)剩(sheng)余細(xi)(xi)胞懸起(qi)，將(jiang)細(xi)(xi)胞懸液(ye)按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培(pei)養(yang)基的新皿中(zhong)或者瓶中(zhong)。

3）細(xi)胞凍(dong)存(cun)(cun)：待細(xi)胞生長狀態(tai)良(liang)好時，可進行(xing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)(cun)。貼(tie)壁細(xi)胞凍(dong)存(cun)(cun)時，棄去培養基(ji)后加入少(shao)量胰酶，細(xi)胞變圓脫落后，進行(xing)離(li)心收集，1000RPM條件下離(li)心8-10分鐘，去除上清(qing)，按凍(dong)存(cun)(cun)數量加入血清(qing)及DMSO，凍(dong)存(cun)(cun)比例(li)為90%FBS+10%DMSO。

PS：若客戶收(shou)到(dao)2ml小管(guan)細(xi)胞(bao)(bao)，收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)(bao)后(hou)，用75%酒精噴灑整個管(guan)子消毒(du)后(hou)放到(dao)超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操(cao)作(zuo)；將小管(guan)細(xi)胞(bao)(bao)轉(zhuan)移至T25培(pei)(pei)養瓶(ping)或6cm培(pei)(pei)養皿，加入5ml左右*培(pei)(pei)養基(ji)混勻，放入培(pei)(pei)養箱(xiang)過夜(ye)培(pei)(pei)養后(hou)查看細(xi)胞(bao)(bao)密(mi)(mi)度：若密(mi)(mi)度未超過80%，換液繼續培(pei)(pei)養，視情況傳代(dai)或者凍存。若密(mi)(mi)度超過80%，可直接(jie)進行傳代(dai)（方法同上）。

慧穎生物是(shi)一家專(zhuan)業從(cong)事細胞(bao)培(pei)養相(xiang)關產品的公(gong)司，擁有獨(du)立細胞(bao)房（可隨時約定參觀），供應胎牛血清，無血清細胞(bao)凍存液，無血清培(pei)養基(ji)，常(chang)規培(pei)養基(ji)，胰酶，雙抗，*培(pei)養基(ji)，STR鑒定細胞(bao)，感受態細胞(bao)等，專(zhuan)業，專(zhuan)注，性價比(bi)高，是(shi)您Shou選之家。

熱賣細胞：

貨號(hao)    簡稱    中文名(ming)稱    培養條件    特性    形態

H001    HeLa    人宮頸(jing)癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞樣

H002    143B    人骨(gu)肉瘤(liu)細胞(bao)   ; DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細胞(bao)樣

H003    293T    人胚腎(shen)細胞 DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細胞樣

H004    A2780   人卵巢癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H005    A549    人非小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H006    A673    人尤(you)因肉瘤細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁    多(duo)邊(bian)形

H007    AGS 人胃(wei)腺(xian)癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H008    BGC823  人胃腺癌細胞(bao)(低分化)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁 ;   上(shang)皮(pi)細胞(bao)樣

H009    C33A    人宮頸癌(ai)細胞    DMEM+10% FBS  ;  貼壁   ; 上皮細胞樣

H010    CACO2   人結(jie)直腸腺癌細(xi)胞   ; DMEM+20% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H011    COLO205 人結腸癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮(fu)  上皮細胞樣

H012    DU145   人前列腺(xian)癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣(yang)

H013    ES-2    人卵巢(chao)透明細胞(bao)癌細胞(bao)    McCoy's 5A+10%FBS   貼(tie)壁    上皮細胞(bao)樣

H014    H1650   人(ren)非(fei)小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H015    H460    人(ren)大細胞肺癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細胞樣

H016    HACAT   人(ren)永生(sheng)化角質形成細胞    DMEM+15% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H017    HCT116  人結腸癌(ai)細胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁(bi)    上皮細胞樣

H018    HEK293  人胚腎細(xi)胞 DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H019    HEPG2   人肝癌細胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H020    HGC27   人胃癌細胞(未分(fen)化)  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H021    HT-29  人結腸癌細胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上(shang)皮細胞樣

H022    HUVEC   人臍靜脈內(nei)皮(pi)細胞(bao)    ECM 貼壁(bi)    上皮(pi)細胞(bao)樣

H023    KYSE150 人(ren)食道癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H024   ; L02(HL7702)(QSG-7701)   人正常肝細胞    RPMI-1640+20% FBS   貼(tie)壁    上皮細胞樣

H025    LOVO    人結腸癌細胞    F12K+10% FBS    貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H026    MCF-10A 人(ren)正常(chang)乳(ru)腺上(shang)(shang)皮細胞  DMEM/F12(1:1) 培(pei)養基+胰(yi)島(dao)素(10ug/ml)+表皮生(sheng)長因(yin)子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒(du) +5% 馬(ma)血清   貼壁    上(shang)(shang)皮細胞樣

H027    MCF7   人乳腺癌(ai)細胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰(yi)島素    貼壁    上皮細胞樣

H028    LX-2    人肝星狀細(xi)胞(bao)(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)(bao)樣

H029    MDA-MB-468  人乳腺癌細胞    L-15+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣(yang)

H030    MIA Paca2   人胰腺癌(ai)細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣 少量圓形懸浮

H031    NCI-H1299   人非小細胞(bao)肺癌(ai)細胞(bao) RPMI1640+10%FBS 貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H032    PANC-1  人胰腺癌(ai)細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣(yang)

H033    RBE 人肝膽管癌細(xi)胞 DMEM+10%FBS 貼壁(bi)    上皮細(xi)胞樣

H034    SAOS-2  人成骨(gu)肉瘤細胞(bao) McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H035    SiHa    人子宮頸鱗癌細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H036    NB 4    急性早幼(you)粒細(xi)胞(bao)白(bai)血病細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   懸浮(fu)    圓形

H037    SPC-A-1 人肺腺癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H038    SW480   人(ren)結腸癌(ai)細(xi)(xi)胞    L-15+10% FBS    貼壁    上(shang)皮(pi)細(xi)(xi)胞樣

H039    U-87MG 人(ren)腦星形膠質母細(xi)胞瘤細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮(pi)細(xi)胞樣

H040    ZR-75-1 人乳腺(xian)癌細胞(bao) ;   RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H041    SW1116  人結腸(chang)腺癌細胞(bao)  L-15+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H042    293A    人胚腎細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細(xi)胞樣

H043    SGC-7901    人胃腺癌(ai)細胞    RPMI-1640 +10% FBS  貼壁    上(shang)皮細胞樣

H044    Ishikawa    人子(zi)宮內(nei)膜癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細(xi)胞樣

H045    Eca-109 人食管癌細(xi)(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)(xi)胞(bao)樣

H046    RD-ES   人尤文氏肉(rou)瘤(liu)    RPMI-1640+15% FBS   貼壁    上(shang)皮細胞樣

H047    NCI-H1437   人肺癌(ai)細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H048    HOS     人骨(gu)肉瘤(liu)細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H049    Hela S3 人宮(gong)頸癌細胞    F12K+10% FBS    貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣

H050    ECC1    人宮頸(jing)內(nei)膜腺(xian)癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H051    SUP-B15     人Ph+急淋(lin)白血病(bing)細胞系   IMDM+20% FBS    懸浮    淋(lin)巴母(mu)細胞樣

H052    TF-1    人血液白血病細(xi)胞(bao)    RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人GM-CSF   懸浮    淋巴母(mu)細(xi)胞(bao)樣

H053    NCI-H446    人小(xiao)細(xi)(xi)胞(bao)肺癌細(xi)(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)樣

H054    GES-1   人胃正常(chang)黏膜上皮細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H055    IOSE80 人卵(luan)巢正(zheng)常上(shang)皮(pi)細(xi)胞株    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣

H056    GIST882 人胃腸道(dao)間質瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣(yang)

H057    KGN 人卵巢顆粒(li)細(xi)胞癌    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁(bi)    上皮細(xi)胞樣

H058    U937    人組織細(xi)胞(bao)淋巴瘤細(xi)胞(bao)    RPMI-1640 +10% FBS  懸(xuan)浮    單核(he)細(xi)胞(bao)樣

H059    SV-HUC-1    人膀胱上皮永生化細(xi)胞(bao)    F12K+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H060    tpc-1   人乳頭瘤狀甲狀腺癌細(xi)胞  F12K+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H061    hela-luci   Luciferase穩定表達Hela細(xi)胞(bao) DMEM(L)+10% FBS 貼壁  ;  上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H062    colo320 人(ren)結腸(chang)癌(ai)細胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮  圓(yuan)形

H063    bxpc-3  人胰腺腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H064    raji    人Burkitt's淋巴(ba)瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸(xuan)浮(fu)    淋巴(ba)母細胞樣

H065    5637    人膀胱(guang)癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁   ; 上皮細胞樣

H066    chang-liver 人肝細胞(bao)(已被hela污染）    DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H067    a549-gfp    gfp標記的A549細胞(bao)(bao)  F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)(bao)樣

H068    hs578.t 人乳腺癌(ai)細胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素    貼(tie)壁    上皮細胞樣

H069    T24 人膀胱移行細胞(bao)(bao)癌細胞(bao)(bao)    McCoy's 5A+15%FBS   貼(tie)壁(bi)    上皮細胞(bao)(bao)樣

H070    K562    人慢性(xing)髓(sui)系白血病(bing)細(xi)胞(bao)    IMDM+10% FBS    懸浮(fu)    淋巴母細(xi)胞(bao)樣

H071    EH-GB1  人膽(dan)囊癌細胞(bao)（表(biao)達(da)GFP和RED2）  DMEM+15% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣(yang)

H072    skov-3  人(ren)卵巢(chao)腺癌細(xi)(xi)胞(bao)  McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)樣(yang)

H073    ECV304  人膀(bang)胱癌細胞（T24衍生(sheng)物）   M199+20%FBS 貼(tie)壁    上皮細胞樣

H074    nci-n87 人胃癌細胞  RPMI-1640+10% FBS ;  貼壁    上皮細胞樣

H075    B-CPAP  人甲狀腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H076    NCI-H1975   人(ren)非小細胞肺腺癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細胞樣

H077    HK-2    人腎(shen)皮質(zhi)近曲小管上皮細(xi)胞(bao)    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)樣

H078    J82 人膀(bang)胱(guang)癌細(xi)胞(bao)    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H079    A431    人(ren)皮膚鱗(lin)癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H080    MG63    人骨肉瘤細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁(bi)    上皮細胞樣

H081    SW48    人結(jie)腸癌細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H082    ME180   人宮頸表皮樣癌  McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上(shang)皮細胞樣

H083    hepaRG-GFP  Gfp標記的(de)人肝癌細(xi)胞(bao) DMEM(L)+10% FBS 貼壁(bi)    上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H084    BEAS-2B 人正常肺(fei)上(shang)(shang)皮(pi)細胞(bao)(bao)    DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)(shang)皮(pi)細胞(bao)(bao)樣

H085    THP-1  ATCC：TIB-202    人髓系白(bai)血(xue)病單核細胞    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    單核細胞樣

H086    PC9 人(ren)肺(fei)癌細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細(xi)胞樣

H087    Fadu    人咽鱗癌細(xi)胞(bao)    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H088    Huh7    人肝癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞樣

H089    Hcc9810 人肝癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細胞樣

H090    Jurkat cloneE6-1    人急性T淋(lin)巴(ba)細(xi)胞白血病(bing)細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋(lin)巴(ba)母(mu)細(xi)胞樣(yang)

H091    KBM-7   人慢性粒(li)細胞(bao)白血病細胞(bao)  IMDM+10% FBS    懸浮    圓(yuan)形

H092    GBC-SD  人膽囊(nang)癌(ai)細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞樣

H093    JEKO-1  人(ren)套細(xi)胞淋(lin)巴癌細(xi)胞  RPMI-1640+20% FBS   懸(xuan)浮    圓(yuan)形

H094    CAL27   人(ren)口腔鱗癌(ai)  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣(yang)

H095    DB  彌漫大B細(xi)胞淋巴瘤(liu)細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮(fu)    淋巴母細(xi)胞樣

H096    hne1-lmp1   轉入LMP1基因人鼻咽癌細(xi)胞   RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H097    nci-h226    人肺鱗癌(ai)細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮(pi)細胞(bao)樣

H098    hepg2.2.15  人肝癌細胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣