NCI-H1944細胞/人非小細胞肺癌細胞   培(pei)養步驟

產(chan)品名稱：NCI-H1944細胞

中文(wen)名(ming)稱：人非小細胞肺(fei)癌(ai)細胞；NCI-H1944

規格：T25

形態特征：生(sheng)長狀態：上(shang)皮(pi)細胞(bao)樣　

特(te)征特(te)性：貼壁生長

培養條件(jian)：RPMI-1640+10%FBS（推薦HAKATA優等胎牛血清貨(huo)號(hao)：HN-FBS-500）

傳(chuan)代(dai)(dai)方法：1:3～1:6傳(chuan)代(dai)(dai)，每周換液2～3次(ci)

凍存條件(jian)：HAKATA ® 無血清(qing)細胞凍存液(ye) 貨號：H-W-100 規(gui)格：100ML

支原體檢測：陰性

使用權限：A類

參(can)考文獻：

供應商：上海慧穎生(sheng)物科技有(you)限公司

復蘇周期：10個工作日(ri)左右

培養步驟：

1）復蘇細(xi)胞(bao)：將(jiang)含有(you)1mL細(xi)胞(bao)懸液的凍(dong)存管在37℃水浴中(zhong)迅速搖晃解(jie)凍(dong)，加(jia)入5mL培(pei)養基混合均勻。在1000RPM條(tiao)件下離心5分(fen)鐘，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，補加(jia)4-6mL*培(pei)養基后吹勻。然后將(jiang)所有(you)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養過(guo)夜（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入6cm皿中(zhong)），培(pei)養過(guo)夜。第二(er)天換液并檢查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2）細胞傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度達(da)80%-90%，即可進行傳(chuan)代培養。

1、對(dui)于貼壁細胞，傳代可參考以下方法(fa)：

1. 棄去培養上清(qing)，用不含鈣、鎂離子的(de)PBS潤洗(xi)細(xi)胞1-2次。

2. 加(jia)1-2ml消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培(pei)養(yang)瓶中，置于(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中消(xiao)化(hua)1-2min，然后在顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況，若細(xi)胞大部分變圓(yuan)并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶后加(jia)5ml以上含10%血清的*培(pei)養(yang)基終止消(xiao)化(hua)。

3.輕(qing)輕(qing)吹打細(xi)胞(bao)，*脫落后吸出，在(zai)1000RPM條件下(xia)離心8-10分鐘，棄去上清液(ye)，補加1-2mL培養液(ye)后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶(ping)補加(jia)培養(yang)液，將(jiang)細(xi)胞懸液按1：2到(dao)(dao)1：5的比例分到(dao)(dao)新的含5-6 ml培養(yang)液的新皿(min)中(zhong)(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)(zhong)。

PS：若(ruo)客戶(hu)收到2ml小(xiao)(xiao)管細(xi)胞(bao)，收到細(xi)胞(bao)后(hou)，用75%酒精噴灑整(zheng)個管子消毒后(hou)放到超凈(jing)臺或安全柜(ju)內，嚴格無菌(jun)操作；將(jiang)小(xiao)(xiao)管細(xi)胞(bao)轉移至T25培養(yang)(yang)(yang)瓶或6cm培養(yang)(yang)(yang)皿，加入5ml左右*培養(yang)(yang)(yang)基混勻，放入培養(yang)(yang)(yang)箱過(guo)(guo)夜培養(yang)(yang)(yang)后(hou)查看細(xi)胞(bao)密度：若(ruo)密度未超過(guo)(guo)80%，換液(ye)繼(ji)續培養(yang)(yang)(yang)，視情況傳(chuan)代(dai)或者凍存。若(ruo)密度超過(guo)(guo)80%，可直接進行傳(chuan)代(dai)（方法同上(shang)）。

2、對于懸浮細胞，傳(chuan)代可參(can)考以下方法(fa)：

方法(fa)一：收集細(xi)胞，1000RPM條件(jian)下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后(hou)吹勻(yun)，將(jiang)細(xi)胞懸液按1：2到1：5的(de)比例分到新的(de)含8ml培養基的(de)新皿中或者瓶中。

方法(fa)二：可(ke)選擇半數換液方式，棄(qi)去半數培養基后(hou)，將(jiang)(jiang)剩余細胞懸起，將(jiang)(jiang)細胞懸液按1：2到1：3的(de)(de)比(bi)例分到新(xin)的(de)(de)含8ml培養基的(de)(de)新(xin)皿中或者瓶(ping)中。

3）細(xi)胞凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞生長狀(zhuang)態良好時，可進行(xing)細(xi)胞凍(dong)存。貼壁細(xi)胞凍(dong)存時，棄(qi)去培養基后(hou)加(jia)入少量(liang)胰酶，細(xi)胞變圓脫落(luo)后(hou)，進行(xing)離(li)心收集(ji)，1000RPM條件下離(li)心8-10分鐘，去除上(shang)清，按凍(dong)存數量(liang)加(jia)入血清及(ji)DMSO，凍(dong)存比例為90%FBS+10%DMSO。

PS：若客戶收到(dao)(dao)2ml小(xiao)管(guan)細(xi)胞，收到(dao)(dao)細(xi)胞后，用75%酒(jiu)精(jing)噴灑整個管(guan)子(zi)消毒后放(fang)到(dao)(dao)超(chao)(chao)(chao)凈臺或安(an)全柜內，嚴格(ge)無菌操作；將(jiang)小(xiao)管(guan)細(xi)胞轉移至T25培(pei)養(yang)瓶或6cm培(pei)養(yang)皿，加(jia)入5ml左右*培(pei)養(yang)基混勻，放(fang)入培(pei)養(yang)箱過夜培(pei)養(yang)后查看細(xi)胞密度(du)：若密度(du)未(wei)超(chao)(chao)(chao)過80%，換(huan)液繼續培(pei)養(yang)，視(shi)情況(kuang)傳代或者凍存。若密度(du)超(chao)(chao)(chao)過80%，可直接(jie)進(jin)行傳代（方(fang)法同上）。

慧(hui)穎生物是一家(jia)專業(ye)從(cong)事細(xi)胞(bao)(bao)培養(yang)相關產品的公司，擁有獨(du)立(li)細(xi)胞(bao)(bao)房（可隨時約(yue)定(ding)參觀），供應(ying)胎(tai)牛血清(qing)，無血清(qing)細(xi)胞(bao)(bao)凍存液，無血清(qing)培養(yang)基(ji)，常規培養(yang)基(ji)，胰酶，雙抗(kang)，*培養(yang)基(ji)，STR鑒定(ding)細(xi)胞(bao)(bao)，感(gan)受態細(xi)胞(bao)(bao)等(deng)，專業(ye)，專注，性價(jia)比高，是您Shou選之家(jia)。

熱賣(mai)細胞：

貨號    簡稱    中文(wen)名稱    培養(yang)條件    特性    形態

H001    HeLa    人宮(gong)頸癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H002    143B    人骨肉瘤細(xi)(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁 ;   上皮細(xi)(xi)胞(bao)樣(yang)

H003    293T    人胚腎細胞 DMEM+10% FBS    貼(tie)壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H004    A2780   人卵(luan)巢癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮細胞樣(yang)

H005    A549    人非小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞樣

H006    A673    人尤因肉瘤(liu)細胞  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    多邊(bian)形

H007    AGS 人胃腺癌細(xi)胞  ;  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H008    BGC823  人胃腺癌細(xi)(xi)胞(bao)(低分化)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)(xi)胞(bao)樣

H009    C33A    人宮頸癌(ai)細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H010    CACO2   人結直腸腺癌(ai)細胞(bao)    DMEM+20% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣(yang)

H011    COLO205 人結腸癌(ai)細胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮(fu)  上皮細胞樣

H012    DU145   人(ren)前列腺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣(yang)

H013    ES-2    人卵巢透明細(xi)胞(bao)癌細(xi)胞(bao)    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H014    H1650   人非小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮細胞樣

H015    H460    人大細胞肺癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H016    HACAT   人永(yong)生(sheng)化(hua)角質形成細(xi)胞    DMEM+15% FBS    貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣(yang)

H017    HCT116  人結(jie)腸癌(ai)細胞(bao)    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H018    HEK293  人胚腎細胞 DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H019    HEPG2   人肝癌細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣

H020    HGC27   人胃癌細胞(未(wei)分化)  DMEM+10% FBS    貼壁   ; 上皮細胞樣

H021    HT-29  人結(jie)腸癌細胞(bao)(bao)    McCoy's 5A+10%FBS   貼(tie)壁(bi)    上皮細胞(bao)(bao)樣

H022    HUVEC   人臍靜脈內皮(pi)細胞  ;  ECM 貼壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H023    KYSE150 人(ren)食(shi)道癌細(xi)(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)(xi)胞(bao)樣

H024    L02(HL7702)(QSG-7701)   人正(zheng)常肝細(xi)胞    RPMI-1640+20% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H025    LOVO    人結腸癌細(xi)胞    F12K+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H026    MCF-10A 人(ren)正常乳腺上(shang)皮細胞  DMEM/F12(1:1) 培養基(ji)+胰島(dao)素(su)(10ug/ml)+表皮生長因(yin)子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒 +5% 馬血(xue)清   貼壁    上(shang)皮細胞樣

H027    MCF7   人乳腺(xian)癌細(xi)胞(bao)(bao)    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島(dao)素    貼壁    上(shang)皮細(xi)胞(bao)(bao)樣

H028    LX-2    人肝星狀細胞    DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H029    MDA-MB-468  人乳腺(xian)癌細胞    L-15+10% FBS    貼壁(bi)    上(shang)皮細胞樣(yang)

H030    MIA Paca2   人胰腺(xian)癌(ai)細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣(yang) 少量圓形懸浮

H031    NCI-H1299   人非小細(xi)(xi)胞(bao)肺癌細(xi)(xi)胞(bao) RPMI1640+10%FBS 貼(tie)壁(bi)    上(shang)皮細(xi)(xi)胞(bao)樣

H032    PANC-1  人胰腺癌細胞(bao)(bao)    DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細胞(bao)(bao)樣

H033    RBE 人肝膽管癌細(xi)胞 DMEM+10%FBS 貼(tie)壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H034    SAOS-2  人成骨肉(rou)瘤細(xi)胞 McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H035    SiHa    人子宮(gong)頸鱗癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H036    NB 4    急性早幼(you)粒細(xi)(xi)胞白血病細(xi)(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    圓(yuan)形(xing)

H037    SPC-A-1 人肺腺(xian)癌(ai)細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H038    SW480   人結(jie)腸癌細(xi)胞(bao)    L-15+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H039    U-87MG 人腦星形膠(jiao)質(zhi)母細胞瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H040    ZR-75-1 人乳腺癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H041    SW1116  人結腸(chang)腺癌(ai)細(xi)(xi)胞(bao)  L-15+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)(xi)胞(bao)樣(yang)

H042    293A    人(ren)胚腎細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H043    SGC-7901    人胃腺癌細(xi)胞    RPMI-1640 +10% FBS  貼壁(bi)    上皮(pi)細(xi)胞樣

H044    Ishikawa    人子宮(gong)內膜癌細胞(bao)  ;  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞(bao)樣

H045    Eca-109 人食管癌(ai)細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H046    RD-ES   人尤文氏肉瘤(liu)    RPMI-1640+15% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H047    NCI-H1437   人肺癌細(xi)胞(bao)(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)(bao)樣

H048    HOS     人骨(gu)肉瘤細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H049    Hela S3 人宮頸癌細胞    F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H050    ECC1    人宮頸內膜(mo)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H051  ;  SUP-B15     人(ren)Ph+急淋白血病(bing)細胞系   IMDM+20% FBS    懸(xuan)浮    淋巴母細胞樣(yang)

H052    TF-1    人血液白血病(bing)細(xi)胞(bao)    RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人GM-CSF   懸浮    淋巴母細(xi)胞(bao)樣(yang)

H053    NCI-H446    人小細(xi)(xi)胞肺癌(ai)細(xi)(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)(xi)胞樣

H054    GES-1   人(ren)胃正(zheng)常黏膜上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁 ;   上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H055    IOSE80 人卵巢正常上皮(pi)(pi)細(xi)胞株    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)(pi)細(xi)胞樣

H056    GIST882 人胃腸(chang)道(dao)間質瘤細胞(bao) ; RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H057    KGN 人卵巢顆(ke)粒細(xi)胞癌    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣(yang)

H058    U937    人組織細胞淋巴(ba)瘤細胞    RPMI-1640 +10% FBS  懸(xuan)浮    單核細胞樣

H059    SV-HUC-1    人膀(bang)胱上(shang)(shang)皮永生化細胞(bao)(bao)    F12K+10% FBS    貼(tie)壁(bi)    上(shang)(shang)皮細胞(bao)(bao)樣

H060    tpc-1   人(ren)乳頭瘤狀甲狀腺癌細胞  F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣(yang)

H061    hela-luci   Luciferase穩定(ding)表達Hela細(xi)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H062    colo320 人(ren)結腸癌(ai)細胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮(fu)  圓(yuan)形

H063    bxpc-3  人(ren)胰腺(xian)腺(xian)癌細胞(bao)(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮細胞(bao)(bao)樣

H064    raji    人(ren)Burkitt's淋(lin)巴(ba)瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸(xuan)浮    淋(lin)巴(ba)母細胞樣(yang)

H065    5637    人膀胱癌細(xi)(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)(xi)胞樣

H066    chang-liver 人肝細胞(bao)(已被hela污(wu)染）    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H067    a549-gfp    gfp標記的A549細胞  F12K+10% FBS    貼壁(bi)    上(shang)皮細胞樣(yang)

H068    hs578.t 人(ren)乳腺癌細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素    貼壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)樣

H069    T24 人膀胱移行細胞癌細胞    McCoy's 5A+15%FBS   貼壁(bi)    上皮細胞樣

H070    K562    人(ren)慢性髓系白血病細(xi)胞    IMDM+10% FBS    懸浮(fu)    淋(lin)巴母(mu)細(xi)胞樣

H071    EH-GB1  人膽囊(nang)癌細胞（表(biao)達GFP和(he)RED2）  DMEM+15% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣(yang)

H072    skov-3  人卵巢腺(xian)癌(ai)細胞  McCoy's 5A+15%FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣

H073    ECV304  人(ren)膀胱(guang)癌細胞（T24衍生(sheng)物）   M199+20%FBS 貼壁    上皮細胞樣

H074    nci-n87 人胃(wei)癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H075    B-CPAP  人甲狀(zhuang)腺癌細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細(xi)胞樣

H076    NCI-H1975   人(ren)非小細(xi)胞(bao)肺腺癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁   ; 上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣

H077    HK-2    人腎(shen)皮(pi)質近曲小管(guan)上皮(pi)細胞(bao)(bao)    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁(bi)    上皮(pi)細胞(bao)(bao)樣

H078    J82 人膀胱癌細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H079    A431    人皮膚鱗癌細胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H080    MG63    人(ren)骨(gu)肉瘤(liu)細(xi)胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細(xi)胞樣

H081    SW48    人結腸癌細胞    DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細胞樣

H082    ME180   人宮頸表皮(pi)樣癌  McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H083    hepaRG-GFP  Gfp標記的人肝(gan)癌細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H084    BEAS-2B 人正常肺(fei)上皮細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣(yang)

H085    THP-1  ATCC：TIB-202    人髓系白血病單(dan)核細(xi)(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   懸(xuan)浮(fu)    單(dan)核細(xi)(xi)胞(bao)樣

H086    PC9 人肺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁(bi)    上(shang)皮細胞樣

H087    Fadu    人(ren)咽鱗癌細(xi)胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H088    Huh7    人肝(gan)癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H089    Hcc9810 人(ren)肝癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮(pi)細胞樣

H090    Jurkat cloneE6-1    人急(ji)性T淋巴(ba)(ba)細胞白血(xue)病細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴(ba)(ba)母細胞樣

H091    KBM-7   人慢(man)性粒(li)細胞(bao)白(bai)血病細胞(bao)  IMDM+10% FBS    懸(xuan)浮    圓形

H092    GBC-SD  人膽囊癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H093    JEKO-1  人套細胞淋巴癌細胞  RPMI-1640+20% FBS   懸浮(fu)    圓形

H094    CAL27   人(ren)口腔鱗癌  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H095    DB  彌漫(man)大(da)B細胞淋(lin)巴瘤(liu)細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮(fu)    淋(lin)巴母(mu)細胞樣(yang)

H096    hne1-lmp1   轉入LMP1基因(yin)人鼻咽癌細(xi)胞   RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮(pi)細(xi)胞樣

H097    nci-h226    人肺鱗(lin)癌(ai)細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H098    hepg2.2.15  人肝(gan)癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣