NCI-H647細胞/ NCI-H647人非小細胞(bao)肺癌細胞(bao)     ;培(pei)養步驟

產品(pin)名稱：NCI-H647細(xi)胞(bao)

中文名稱：人(ren)非小細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)胞；NCI-H647

規格：T25

形態特征：

生長狀態：　

特征特性：貼壁生(sheng)長

培養條(tiao)件(jian)：RPMI-1640+10%FBS（推(tui)薦HAKATA優等胎牛(niu)血清貨(huo)號：HN-FBS-500）

傳(chuan)代方(fang)法(fa)：1：3-1:6傳(chuan)代；每(mei)周換(huan)液2次(ci)。

凍(dong)存條(tiao)件：HAKATA ® 無血清細胞凍(dong)存液 貨號(hao)：H-W-100 規格：100ML

支原體檢測：陰性(xing)

使用(yong)權限：A類(lei)

參考(kao)文(wen)獻：

供應商：上海慧穎生物科技有限公司

復蘇周期：10個工作日左右

培養(yang)步驟：

1）復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：將含有1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)(xuan)液的凍(dong)存管在37℃水浴中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加入(ru)5mL培養(yang)(yang)(yang)基混合均(jun)勻。在1000RPM條件下離(li)心(xin)5分鐘(zhong)，棄去(qu)上清液，補加4-6mL*培養(yang)(yang)(yang)基后(hou)吹(chui)勻。然后(hou)將所有細(xi)胞(bao)懸(xuan)(xuan)液加入(ru)培養(yang)(yang)(yang)瓶中培養(yang)(yang)(yang)過夜(ye)（或將細(xi)胞(bao)懸(xuan)(xuan)液加入(ru)6cm皿中），培養(yang)(yang)(yang)過夜(ye)。第二天換液并(bing)檢查細(xi)胞(bao)密度。

2）細胞傳(chuan)代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan)代培養。

1、對于貼壁細(xi)胞，傳(chuan)代可參考以下方(fang)法(fa)：

1. 棄(qi)去(qu)培養上(shang)清，用不含鈣、鎂離子(zi)的PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次。

2. 加(jia)1-2ml消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)(pei)(pei)養瓶(ping)(ping)中，置于37℃培(pei)(pei)(pei)養箱中消(xiao)化(hua)1-2min，然后在顯微(wei)鏡下觀察(cha)細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況，若細(xi)胞大部分(fen)變(bian)圓并脫(tuo)落，迅速拿回操作臺，輕敲幾(ji)下培(pei)(pei)(pei)養瓶(ping)(ping)后加(jia)5ml以上含10%血清(qing)的(de)*培(pei)(pei)(pei)養基終止消(xiao)化(hua)。

3.輕輕吹(chui)打細胞，*脫落后(hou)吸出，在1000RPM條件下(xia)離心8-10分鐘，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，補(bu)加1-2mL培養液后(hou)吹(chui)勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培(pei)養液(ye)，將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按1：2到1：5的(de)比(bi)例分到新的(de)含5-6 ml培(pei)養液(ye)的(de)新皿中或者(zhe)瓶中。

PS：若客戶收(shou)到(dao)2ml小管細胞(bao)，收(shou)到(dao)細胞(bao)后，用(yong)75%酒精噴灑整(zheng)個管子消毒后放到(dao)超凈臺或(huo)安(an)全柜內，嚴格(ge)無菌操(cao)作；將(jiang)小管細胞(bao)轉移至T25培養(yang)(yang)(yang)瓶或(huo)6cm培養(yang)(yang)(yang)皿，加入(ru)5ml左右*培養(yang)(yang)(yang)基(ji)混(hun)勻，放入(ru)培養(yang)(yang)(yang)箱過夜培養(yang)(yang)(yang)后查看細胞(bao)密度：若密度未超過80%，換液(ye)繼續(xu)培養(yang)(yang)(yang)，視情況(kuang)傳(chuan)代或(huo)者(zhe)凍存。若密度超過80%，可直(zhi)接進行傳(chuan)代（方(fang)法同上）。

2、對(dui)于(yu)懸(xuan)浮細胞，傳代(dai)可參考(kao)以下方(fang)法：

方法一：收集細(xi)胞，1000RPM條(tiao)件下離心8-10分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加1-2mL培養液(ye)后吹(chui)勻，將細(xi)胞懸液(ye)按1：2到1：5的(de)比例分(fen)到新(xin)的(de)含8ml培養基的(de)新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)。

方法二：可選擇(ze)半(ban)數換(huan)液方式(shi)，棄去(qu)半(ban)數培(pei)養(yang)基(ji)后，將(jiang)剩(sheng)余細(xi)胞懸(xuan)起，將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液按1：2到1：3的(de)比例分到新的(de)含8ml培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿中或者瓶中。

3）細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀(zhuang)態良好時，可進(jin)行細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。貼壁細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)時，棄去培養基后(hou)(hou)加入少量胰酶，細(xi)胞(bao)變(bian)圓脫(tuo)落(luo)后(hou)(hou)，進(jin)行離心(xin)(xin)收集(ji)，1000RPM條件下(xia)離心(xin)(xin)8-10分鐘，去除上清，按凍(dong)存(cun)數量加入血(xue)清及DMSO，凍(dong)存(cun)比例為(wei)90%FBS+10%DMSO。

PS：若客戶(hu)收到(dao)2ml小管細(xi)胞(bao)，收到(dao)細(xi)胞(bao)后(hou)(hou)，用75%酒精噴(pen)灑整個管子(zi)消毒后(hou)(hou)放到(dao)超凈臺或(huo)安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細(xi)胞(bao)轉移至T25培(pei)養瓶或(huo)6cm培(pei)養皿，加入5ml左右*培(pei)養基混勻，放入培(pei)養箱過夜培(pei)養后(hou)(hou)查看細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)：若密(mi)度(du)未超過80%，換液繼續培(pei)養，視情況傳(chuan)代(dai)或(huo)者凍存(cun)。若密(mi)度(du)超過80%，可直接(jie)進行傳(chuan)代(dai)（方(fang)法同上）。

慧穎生物是一家專業(ye)從事細(xi)(xi)胞(bao)培養(yang)(yang)(yang)相關產品的公司，擁有獨立細(xi)(xi)胞(bao)房(fang)（可隨時約定參觀），供應胎牛血清，無血清細(xi)(xi)胞(bao)凍存液，無血清培養(yang)(yang)(yang)基，常規培養(yang)(yang)(yang)基，胰酶，雙抗，*培養(yang)(yang)(yang)基，STR鑒定細(xi)(xi)胞(bao)，感受態(tai)細(xi)(xi)胞(bao)等，專業(ye)，專注，性價比高(gao)，是您Shou選之家。

熱賣細胞：

貨號    簡稱    中(zhong)文名稱    培養條件    特(te)性    形(xing)態

H001    HeLa    人宮頸癌細胞    DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細胞樣

H002    143B    人(ren)骨肉瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H003    293T    人胚腎細胞 DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H004    A2780   人卵巢癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮(pi)細胞(bao)樣

H005    A549    人(ren)非(fei)小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣(yang)

H006    A673    人尤(you)因肉瘤細胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    多邊(bian)形(xing)

H007    AGS 人胃腺癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H008    BGC823  人(ren)胃(wei)腺癌細胞(bao)(低分(fen)化)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮(pi)細胞(bao)樣

H009    C33A    人(ren)宮頸癌(ai)細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H010    CACO2   人結直腸(chang)腺癌細胞    DMEM+20% FBS    貼壁    上皮細胞樣(yang)

H011    COLO205 人結(jie)腸癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮  上皮細胞(bao)樣

H012    DU145   人前列腺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁(bi)    上皮細胞樣

H013    ES-2    人卵巢(chao)透(tou)明細胞癌細胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H014    H1650   人非小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣

H015    H460    人大細(xi)胞肺癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H016    HACAT   人永生化(hua)角質形成細胞    DMEM+15% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H017    HCT116  人結腸癌細(xi)胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣(yang)

H018    HEK293  人胚(pei)腎細胞 DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H019    HEPG2   人肝癌細胞  DMEM+10% FBS ;   貼壁    上皮(pi)細胞樣

H020    HGC27   人胃癌細胞(未分(fen)化(hua))  DMEM+10% FBS  ;  貼(tie)壁   ; 上皮細胞樣(yang)

H021    HT-29  人結腸癌細胞(bao)    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H022    HUVEC   人臍(qi)靜脈(mo)內皮細(xi)胞(bao)(bao)    ECM 貼壁    上皮細(xi)胞(bao)(bao)樣(yang)

H023    KYSE150 人食道癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H024    L02(HL7702)(QSG-7701) ;  人正常肝(gan)細胞    RPMI-1640+20% FBS   貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H025    LOVO    人結腸(chang)癌(ai)細胞    F12K+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞樣

H026    MCF-10A 人正常(chang)乳腺(xian)上(shang)皮(pi)細胞  DMEM/F12(1:1) 培養基+胰島(dao)素(su)(10ug/ml)+表皮(pi)生長因(yin)子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂(luan)病(bing)毒(du) +5% 馬(ma)血清   貼(tie)壁    上(shang)皮(pi)細胞樣

H027    MCF7   人(ren)乳腺癌細胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素(su)    貼壁    上皮細胞樣

H028    LX-2    人肝星(xing)狀細胞    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣(yang)

H029    MDA-MB-468  人乳腺癌細(xi)胞(bao)    L-15+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)樣

H030    MIA Paca2   人胰腺(xian)癌細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣 少量圓形懸浮(fu)

H031    NCI-H1299   人非小細(xi)(xi)胞(bao)肺癌細(xi)(xi)胞(bao) RPMI1640+10%FBS 貼壁    上皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)樣

H032    PANC-1  人(ren)胰(yi)腺癌(ai)細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣

H033    RBE 人肝膽管(guan)癌(ai)細胞(bao) DMEM+10%FBS 貼壁(bi)    上皮細胞(bao)樣(yang)

H034    SAOS-2  人成骨肉(rou)瘤細(xi)胞(bao) McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H035    SiHa    人子宮頸(jing)鱗癌細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H036    NB 4    急性早幼(you)粒細(xi)胞白血病(bing)細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    圓(yuan)形

H037    SPC-A-1 人(ren)肺腺癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H038    SW480   人結腸癌細(xi)胞(bao)    L-15+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H039    U-87MG 人腦星形(xing)膠(jiao)質母細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼(tie)壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)樣

H040    ZR-75-1 人(ren)乳(ru)腺癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H041    SW1116  人結腸腺癌(ai)細胞  L-15+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細胞樣

H042    293A    人胚腎細胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁 ;   上皮細胞樣

H043    SGC-7901    人胃腺癌細胞    RPMI-1640 +10% FBS  貼壁    上皮細胞樣

H044    Ishikawa    人子(zi)宮內膜癌細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H045    Eca-109 人食管癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H046    RD-ES   人(ren)尤(you)文氏(shi)肉(rou)瘤    RPMI-1640+15% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H047    NCI-H1437   人肺癌細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H048    HOS     人骨肉瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮(pi)細胞樣

H049    Hela S3 人宮(gong)頸癌細胞    F12K+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細胞樣

H050    ECC1    人宮頸內膜(mo)腺(xian)癌細胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H051    SUP-B15     人Ph+急淋白血(xue)病(bing)細(xi)胞系   IMDM+20% FBS    懸浮    淋巴母細(xi)胞樣

H052    TF-1    人血(xue)液白血(xue)病細胞    RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人GM-CSF   懸(xuan)浮    淋巴母細胞樣

H053    NCI-H446    人小細胞(bao)肺癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣(yang)

H054    GES-1   人(ren)胃正常黏膜上皮(pi)(pi)細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)(pi)細胞樣

H055    IOSE80 人卵巢(chao)正常上皮細(xi)胞株    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H056    GIST882 人胃腸道間質瘤細(xi)胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H057    KGN 人卵巢(chao)顆粒(li)細(xi)(xi)胞(bao)癌    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)(xi)胞(bao)樣

H058    U937    人組(zu)織細(xi)胞(bao)淋巴瘤細(xi)胞(bao)    RPMI-1640 +10% FBS  懸浮(fu)    單(dan)核細(xi)胞(bao)樣(yang)

H059    SV-HUC-1    人膀胱上皮永(yong)生化細胞    F12K+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H060    tpc-1   人乳頭(tou)瘤(liu)狀甲狀腺(xian)癌細胞  F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H061    hela-luci   Luciferase穩(wen)定表達(da)Hela細(xi)(xi)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁(bi)    上皮細(xi)(xi)胞樣(yang)

H062    colo320 人結(jie)腸癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮  圓形

H063    bxpc-3  人胰腺腺癌細(xi)胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)樣

H064    raji    人Burkitt's淋(lin)巴(ba)瘤細(xi)胞(bao)(bao)  RPMI-1640+10% FBS   懸(xuan)浮    淋(lin)巴(ba)母細(xi)胞(bao)(bao)樣

H065    5637    人(ren)膀胱癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣

H066    chang-liver 人(ren)肝(gan)細(xi)胞(已被(bei)hela污染）    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H067   ; a549-gfp    gfp標記的A549細胞(bao)  F12K+10% FBS    貼壁 ;   上皮細胞(bao)樣

H068    hs578.t 人乳腺癌細胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素(su)    貼壁    上皮細胞樣

H069    T24 人膀胱移行細胞(bao)癌細胞(bao)    McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H070    K562    人慢性髓系白血病細(xi)胞    IMDM+10% FBS ;   懸浮    淋(lin)巴母細(xi)胞樣

H071    EH-GB1  人膽囊(nang)癌細(xi)胞(bao)（表達(da)GFP和RED2）  DMEM+15% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H072    skov-3  人(ren)卵巢腺(xian)癌細胞(bao)  McCoy's 5A+15%FBS   貼(tie)壁    上皮細胞(bao)樣

H073    ECV304  人膀胱(guang)癌細胞（T24衍生(sheng)物）   M199+20%FBS 貼壁 ;   上皮細胞樣(yang)

H074    nci-n87 人胃癌細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣(yang)

H075    B-CPAP  人(ren)甲狀腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H076    NCI-H1975   人非小(xiao)細(xi)胞(bao)肺腺癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H077    HK-2    人腎皮質近曲(qu)小(xiao)管上(shang)皮細胞(bao)    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H078    J82 人膀胱(guang)癌細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁(bi)    上皮細胞樣

H079    A431    人皮膚鱗癌(ai)細(xi)胞  DMEM+10% FBS   ; 貼壁    上皮細(xi)胞樣

H080    MG63    人骨肉瘤細胞  ;  DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上(shang)皮細胞樣

H081    SW48    人結腸癌(ai)細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H082    ME180   人宮(gong)頸表皮(pi)樣癌(ai)  McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮(pi)細胞樣

H083    hepaRG-GFP  Gfp標記的人肝癌細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H084    BEAS-2B 人正常(chang)肺上(shang)皮(pi)細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮(pi)細胞(bao)樣

H085    THP-1  ATCC：TIB-202    人髓(sui)系白血病單核細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    單核細(xi)胞(bao)樣(yang)

H086    PC9 人肺(fei)癌細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣(yang)

H087    Fadu    人(ren)咽(yan)鱗癌細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H088    Huh7    人肝癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H089    Hcc9810 人肝(gan)癌(ai)細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H090    Jurkat cloneE6-1    人急(ji)性T淋巴細(xi)胞(bao)白(bai)血病細(xi)胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細(xi)胞(bao)樣

H091    KBM-7   人(ren)慢性粒細胞白血病細胞  IMDM+10% FBS    懸浮    圓形

H092    GBC-SD  人膽囊癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣

H093    JEKO-1  人套細(xi)胞淋巴(ba)癌細(xi)胞  RPMI-1640+20% FBS   懸浮    圓形

H094    CAL27   人口腔鱗癌  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞樣

H095    DB  彌漫大B細(xi)胞(bao)(bao)淋巴瘤細(xi)胞(bao)(bao)  RPMI-1640+10% FBS   懸(xuan)浮    淋巴母(mu)細(xi)胞(bao)(bao)樣(yang)

H096    hne1-lmp1   轉入LMP1基(ji)因(yin)人鼻咽癌細胞   RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H097    nci-h226  ;  人肺(fei)鱗癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣

H098    hepg2.2.15  人(ren)肝癌細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細(xi)胞樣