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KATO III細胞(bao)/ KATO III人(ren)胃癌(ai)細胞(bao) 培(pei)養步驟
產品名稱:KATO III細(xi)胞
中文名(ming)稱:人胃癌(ai)細胞;KATO III
規(gui)格:T25
形態特征:
生長狀態:上皮細胞
特(te)征特(te)性(xing):貼壁(bi)生長
培養(yang)條件:IMDM+20%FBS(推薦HAKATA優等胎牛(niu)血清貨(huo)號:HN-FBS-500)
傳代(dai)方法:1:2。3天內可長滿。
凍(dong)存(cun)條件:HAKATA ® 無血清(qing)細胞凍(dong)存(cun)液 貨號:H-W-100 規格:100ML
支原體檢測:陰性
使用權(quan)限:A類
參考文(wen)獻:
供應商(shang):上海慧穎生物科技有(you)限公(gong)司
復蘇周期:10個工作日左右
培養步(bu)驟:
1)復蘇(su)細(xi)胞:將(jiang)含有(you)1mL細(xi)胞懸液(ye)(ye)的(de)凍(dong)存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍(dong),加(jia)(jia)入5mL培養(yang)(yang)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液(ye)(ye),補加(jia)(jia)4-6mL*培養(yang)(yang)基后(hou)吹(chui)勻。然后(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞懸液(ye)(ye)加(jia)(jia)入培養(yang)(yang)瓶中培養(yang)(yang)過夜(ye)(或將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)(ye)加(jia)(jia)入6cm皿中),培養(yang)(yang)過夜(ye)。第二天換液(ye)(ye)并檢查細(xi)胞密(mi)度(du)。
2)細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai):如果細(xi)胞(bao)密度達80%-90%,即可進行傳(chuan)代(dai)培養。
1、對于貼壁細胞,傳代可參(can)考以下方法:
1. 棄去培養上清,用(yong)不含(han)鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消(xiao)(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養(yang)(yang)瓶中,置(zhi)于(yu)37℃培(pei)養(yang)(yang)箱中消(xiao)(xiao)化1-2min,然后(hou)在顯微鏡下(xia)觀察細胞(bao)消(xiao)(xiao)化情況,若細胞(bao)大(da)部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下(xia)培(pei)養(yang)(yang)瓶后(hou)加5ml以上含10%血清(qing)的*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)終止消(xiao)(xiao)化。
3.輕輕吹打細胞,*脫落(luo)后(hou)(hou)吸出,在1000RPM條(tiao)件下離心8-10分鐘,棄(qi)去上清液,補加1-2mL培養液后(hou)(hou)吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培(pei)養(yang)液,將細胞懸(xuan)液按1:2到1:5的(de)比(bi)例分到新(xin)的(de)含5-6 ml培(pei)養(yang)液的(de)新(xin)皿中或者瓶中。
PS:若客(ke)戶(hu)收到(dao)2ml小管細(xi)(xi)胞(bao),收到(dao)細(xi)(xi)胞(bao)后(hou),用75%酒精(jing)噴(pen)灑(sa)整個管子消毒(du)后(hou)放到(dao)超(chao)凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細(xi)(xi)胞(bao)轉(zhuan)移(yi)至T25培(pei)養(yang)(yang)瓶或6cm培(pei)養(yang)(yang)皿,加入(ru)(ru)5ml左右*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)混勻,放入(ru)(ru)培(pei)養(yang)(yang)箱過(guo)夜培(pei)養(yang)(yang)后(hou)查看(kan)細(xi)(xi)胞(bao)密(mi)度(du):若密(mi)度(du)未超(chao)過(guo)80%,換液繼(ji)續培(pei)養(yang)(yang),視情況傳代或者凍存。若密(mi)度(du)超(chao)過(guo)80%,可直(zhi)接進行(xing)傳代(方法同上)。
2、對于懸浮細胞(bao),傳代可參(can)考以(yi)下方法(fa):
方法(fa)一:收集細胞(bao),1000RPM條(tiao)件下(xia)離心8-10分鐘,棄(qi)去(qu)上清液(ye),補加1-2mL培養液(ye)后吹(chui)勻,將細胞(bao)懸液(ye)按1:2到1:5的(de)比(bi)例分到新的(de)含8ml培養基(ji)的(de)新皿中或者瓶(ping)中。
方法二:可選擇(ze)半數換液(ye)方式(shi),棄去半數培養(yang)基后,將剩余(yu)細胞(bao)懸起,將細胞(bao)懸液(ye)按1:2到1:3的(de)比例(li)分到新(xin)的(de)含8ml培養(yang)基的(de)新(xin)皿中或者(zhe)瓶中。
3)細(xi)胞凍(dong)(dong)存:待細(xi)胞生長狀態良好(hao)時,可進行細(xi)胞凍(dong)(dong)存。貼(tie)壁細(xi)胞凍(dong)(dong)存時,棄去培養基后加入(ru)少量胰酶,細(xi)胞變圓脫落后,進行離心(xin)收集,1000RPM條件下離心(xin)8-10分鐘,去除上清(qing)(qing),按凍(dong)(dong)存數量加入(ru)血清(qing)(qing)及DMSO,凍(dong)(dong)存比例為(wei)90%FBS+10%DMSO。
PS:若(ruo)(ruo)客戶收(shou)到2ml小(xiao)管細胞,收(shou)到細胞后(hou),用75%酒精噴灑(sa)整(zheng)個管子消毒后(hou)放(fang)到超凈(jing)臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將(jiang)小(xiao)管細胞轉移至T25培(pei)養(yang)瓶或6cm培(pei)養(yang)皿,加(jia)入5ml左(zuo)右*培(pei)養(yang)基混勻,放(fang)入培(pei)養(yang)箱過(guo)(guo)夜培(pei)養(yang)后(hou)查看細胞密(mi)度(du):若(ruo)(ruo)密(mi)度(du)未超過(guo)(guo)80%,換液(ye)繼續培(pei)養(yang),視(shi)情況傳(chuan)代或者凍存。若(ruo)(ruo)密(mi)度(du)超過(guo)(guo)80%,可直接進(jin)行傳(chuan)代(方法同上(shang))。
慧(hui)穎生物是一家(jia)專業(ye)從(cong)事細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)相關產品的公司,擁(yong)有獨(du)立細(xi)(xi)胞(bao)房(可隨時約定參觀),供應胎牛(niu)血清,無血清細(xi)(xi)胞(bao)凍(dong)存液,無血清培(pei)養(yang)(yang)基(ji),常規培(pei)養(yang)(yang)基(ji),胰酶,雙抗(kang),*培(pei)養(yang)(yang)基(ji),STR鑒定細(xi)(xi)胞(bao),感受態細(xi)(xi)胞(bao)等,專業(ye),專注,性價比高,是您Shou選之家(jia)。
熱賣細(xi)胞(bao):
貨號(hao) 簡(jian)稱 中文(wen)名稱 培養條件 特性 形態
H001 HeLa 人宮(gong)頸癌細胞(bao) DMEM+10% FBS 貼壁 上皮(pi)細胞(bao)樣
H002 143B 人骨肉瘤細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上(shang)皮細胞樣(yang)
H003 293T 人胚腎細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣
H004 A2780 人卵巢癌(ai)細胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞(bao)樣(yang)
H005 A549 人非(fei)小細(xi)胞肺癌細(xi)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xi)胞樣(yang)
H006 A673 人(ren)尤因肉瘤細胞 DMEM+10% FBS 貼(tie)壁(bi) 多邊(bian)形
H007 AGS 人胃(wei)腺癌(ai)細(xi)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮(pi)細(xi)胞樣
H008 BGC823 人胃腺癌細胞(bao)(低分化) RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞(bao)樣(yang)
H009 C33A 人宮頸癌細(xi)胞(bao)(bao) DMEM+10% FBS 貼(tie)壁 上皮細(xi)胞(bao)(bao)樣
H010 CACO2 人結直腸腺癌細(xi)胞(bao) DMEM+20% FBS 貼(tie)壁 上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣
H011 COLO205 人結腸癌細胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 半懸(xuan)浮 上皮細胞(bao)樣
H012 DU145 人前列(lie)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao) DMEM+10% FBS 貼(tie)壁 上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣
H013 ES-2 人(ren)卵巢(chao)透(tou)明細(xi)胞癌(ai)細(xi)胞 McCoy's 5A+10%FBS 貼壁(bi) 上(shang)皮細(xi)胞樣(yang)
H014 H1650 人非(fei)小細胞肺癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣
H015 H460 人(ren)大細(xi)胞(bao)(bao)肺癌細(xi)胞(bao)(bao) RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xi)胞(bao)(bao)樣
H016 HACAT 人永生化角質形成細胞 DMEM+15% FBS 貼(tie)壁 上皮(pi)細胞樣(yang)
H017 HCT116 人結腸(chang)癌(ai)細(xi)胞 McCoy's 5A+10%FBS 貼壁 上皮(pi)細(xi)胞樣
H018 HEK293 人胚腎(shen)細(xi)(xi)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xi)(xi)胞樣
H019 HEPG2 人肝癌細胞 DMEM+10% FBS 貼(tie)壁 上(shang)皮細胞樣
H020 HGC27 人胃(wei)癌細胞(未分化) DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣
H021 HT-29 人結(jie)腸(chang)癌細(xi)胞(bao) McCoy's 5A+10%FBS 貼壁 上皮細(xi)胞(bao)樣
H022 HUVEC 人臍(qi)靜脈內皮細胞(bao) ECM 貼壁 上皮細胞(bao)樣
H023 KYSE150 人食道癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣
H024 L02(HL7702)(QSG-7701) 人正常肝細(xi)胞 RPMI-1640+20% FBS 貼壁 上(shang)皮細(xi)胞樣
H025 LOVO 人結腸癌細胞(bao) F12K+10% FBS 貼壁 上(shang)皮細胞(bao)樣
H026 MCF-10A 人正(zheng)常乳腺上(shang)皮細(xi)(xi)胞 DMEM/F12(1:1) 培養基+胰島素(10ug/ml)+表(biao)皮生長因子(zi)(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒 +5% 馬血清 貼壁 上(shang)皮細(xi)(xi)胞樣(yang)
H027 MCF7 人乳腺癌細(xi)胞(bao) DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素 貼(tie)壁 上皮細(xi)胞(bao)樣
H028 LX-2 人肝星(xing)狀細胞(bao) DMEM+10% FBS 貼壁(bi) 上皮細胞(bao)樣
H029 MDA-MB-468 人(ren)乳腺癌細胞(bao) L-15+10% FBS 貼壁 上皮細胞(bao)樣
H030 MIA Paca2 人胰(yi)腺癌細(xi)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xi)胞樣 少量圓(yuan)形(xing)懸浮(fu)
H031 NCI-H1299 人非(fei)小細(xi)胞肺癌細(xi)胞 RPMI1640+10%FBS 貼壁(bi) 上(shang)皮細(xi)胞樣
H032 PANC-1 人(ren)胰腺癌細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣(yang)
H033 RBE 人肝膽管癌細(xi)胞 DMEM+10%FBS 貼壁 上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣(yang)
H034 SAOS-2 人成骨肉瘤細(xi)(xi)胞 McCoy's 5A+15%FBS 貼壁(bi) 上皮(pi)細(xi)(xi)胞樣
H035 SiHa 人子宮(gong)頸鱗癌(ai)細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮(pi)細胞樣
H036 NB 4 急性早幼粒細胞(bao)白血病細胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 懸浮(fu) 圓形(xing)
H037 SPC-A-1 人肺腺(xian)癌細(xi)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xi)胞樣
H038 SW480 人結腸(chang)癌細(xi)胞 L-15+10% FBS 貼(tie)壁 上皮細(xi)胞樣
H039 U-87MG 人(ren)腦星形(xing)膠質母細胞瘤細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣
H040 ZR-75-1 人乳腺癌(ai)細胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞(bao)樣
H041 SW1116 人結腸腺癌細胞 L-15+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣
H042 293A 人(ren)胚(pei)腎細(xi)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xi)胞樣(yang)
H043 SGC-7901 人胃腺癌細胞(bao) RPMI-1640 +10% FBS 貼(tie)壁 上皮細胞(bao)樣
H044 Ishikawa 人子宮內膜(mo)癌細胞 DMEM+10% FBS 貼(tie)壁 上皮(pi)細胞樣
H045 Eca-109 人(ren)食管(guan)癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上(shang)皮細胞樣
H046 RD-ES 人尤文氏肉瘤 RPMI-1640+15% FBS 貼壁 上皮細胞樣(yang)
H047 NCI-H1437 人(ren)肺癌(ai)細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣(yang)
H048 HOS 人骨肉瘤細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣
H049 Hela S3 人宮頸癌細胞 F12K+10% FBS 貼壁(bi) 上皮細胞樣
H050 ECC1 人宮頸內膜腺癌細胞 DMEM+10% FBS 貼壁(bi) 上皮細胞樣
H051 SUP-B15 人Ph+急(ji)淋(lin)白(bai)血(xue)病(bing)細胞系 IMDM+20% FBS 懸浮 淋(lin)巴母細胞樣(yang)
H052 TF-1 人(ren)血(xue)液(ye)白血(xue)病(bing)細胞(bao)(bao) RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人(ren)GM-CSF 懸浮 淋巴母細胞(bao)(bao)樣
H053 NCI-H446 人小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌(ai)細(xi)胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xi)胞(bao)樣
H054 GES-1 人胃正常黏膜(mo)上皮(pi)(pi)細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮(pi)(pi)細胞樣(yang)
H055 IOSE80 人卵(luan)巢正常上(shang)皮(pi)細(xi)胞株(zhu) RPMI-1640+10% FBS 貼壁(bi) 上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣
H056 GIST882 人胃腸道間質(zhi)瘤細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣
H057 KGN 人卵巢顆粒細胞(bao)癌 DMEM/F12(1:1)+10% FBS 貼壁 上皮細胞(bao)樣
H058 U937 人組(zu)織細胞淋巴瘤細胞 RPMI-1640 +10% FBS 懸浮 單核細胞樣
H059 SV-HUC-1 人膀胱上(shang)皮永生化細胞(bao) F12K+10% FBS 貼(tie)壁 上(shang)皮細胞(bao)樣
H060 tpc-1 人乳頭瘤(liu)狀甲狀腺癌(ai)細胞(bao) F12K+10% FBS 貼壁 上皮細胞(bao)樣
H061 hela-luci Luciferase穩定表達(da)Hela細胞(bao)(bao) DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁 上(shang)皮細胞(bao)(bao)樣
H062 colo320 人(ren)結腸癌細胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 半(ban)懸浮(fu) 圓形
H063 bxpc-3 人胰腺(xian)(xian)腺(xian)(xian)癌細胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上(shang)皮細胞(bao)樣
H064 raji 人Burkitt's淋巴瘤細胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 懸浮 淋巴母細胞(bao)樣(yang)
H065 5637 人膀胱癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼(tie)壁 上皮細胞樣
H066 chang-liver 人肝細胞(bao)(已被hela污染) DMEM(L)+10% FBS 貼壁 上皮細胞(bao)樣
H067 a549-gfp gfp標記的A549細胞 F12K+10% FBS 貼(tie)壁 上(shang)皮細胞樣(yang)
H068 hs578.t 人(ren)乳腺癌細胞(bao) DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素 貼壁 上皮(pi)細胞(bao)樣
H069 T24 人膀胱移(yi)行細(xi)胞癌(ai)細(xi)胞 McCoy's 5A+15%FBS 貼壁 上皮細(xi)胞樣
H070 K562 人慢性髓系(xi)白(bai)血(xue)病細(xi)胞 IMDM+10% FBS 懸浮 淋巴母細(xi)胞樣
H071 EH-GB1 人(ren)膽(dan)囊癌細胞(表達GFP和(he)RED2) DMEM+15% FBS 貼(tie)壁 上皮細胞樣
H072 skov-3 人卵巢腺癌細胞 McCoy's 5A+15%FBS 貼壁 上皮細胞樣(yang)
H073 ECV304 人膀胱癌細胞(bao)(T24衍生物) M199+20%FBS 貼壁 上皮細胞(bao)樣
H074 nci-n87 人胃(wei)癌(ai)細胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上(shang)皮(pi)細胞(bao)樣
H075 B-CPAP 人甲狀(zhuang)腺(xian)癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮(pi)細胞樣
H076 NCI-H1975 人非小細(xi)胞(bao)肺腺(xian)癌細(xi)胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xi)胞(bao)樣
H077 HK-2 人腎皮(pi)(pi)質近(jin)曲(qu)小管上皮(pi)(pi)細胞 DMEM/F12(1:1)+10% FBS 貼壁 上皮(pi)(pi)細胞樣
H078 J82 人膀胱(guang)癌(ai)細(xi)胞(bao) DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁(bi) 上皮細(xi)胞(bao)樣
H079 A431 人皮(pi)膚鱗(lin)癌(ai)細(xi)(xi)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮(pi)細(xi)(xi)胞樣
H080 MG63 人(ren)骨肉瘤細(xi)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁 上皮細(xi)胞樣(yang)
H081 SW48 人結(jie)腸癌細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣
H082 ME180 人宮(gong)頸(jing)表(biao)皮樣癌(ai) McCoy's 5A+10%FBS 貼壁 上皮細胞樣
H083 hepaRG-GFP Gfp標記的(de)人肝癌細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁(bi) 上皮細胞樣(yang)
H084 BEAS-2B 人(ren)正常肺(fei)上皮(pi)細胞 DMEM+10% FBS 貼壁(bi) 上皮(pi)細胞樣
H085 THP-1 ATCC:TIB-202 人髓系白血病單(dan)核細(xi)胞(bao)(bao) RPMI-1640+10% FBS 懸浮 單(dan)核細(xi)胞(bao)(bao)樣
H086 PC9 人肺癌細胞 DMEM+10% FBS 貼壁(bi) 上皮細胞樣
H087 Fadu 人咽(yan)鱗癌細(xi)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁 上皮細(xi)胞樣
H088 Huh7 人(ren)肝癌細(xi)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上(shang)皮細(xi)胞樣(yang)
H089 Hcc9810 人肝癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣
H090 Jurkat cloneE6-1 人急(ji)性T淋巴細胞(bao)白(bai)血病細胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 懸浮 淋巴母細胞(bao)樣(yang)
H091 KBM-7 人(ren)慢性粒細胞白血病細胞 IMDM+10% FBS 懸浮 圓形
H092 GBC-SD 人膽囊癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮(pi)細胞樣(yang)
H093 JEKO-1 人套細胞(bao)淋巴癌細胞(bao) RPMI-1640+20% FBS 懸浮 圓形
H094 CAL27 人口腔鱗(lin)癌 DMEM+10% FBS 貼壁(bi) 上皮細胞樣
H095 DB 彌漫大B細胞淋(lin)巴瘤細胞 RPMI-1640+10% FBS 懸浮 淋(lin)巴母細胞樣
H096 hne1-lmp1 轉入LMP1基因人鼻咽(yan)癌(ai)細(xi)胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 貼(tie)壁 上皮細(xi)胞(bao)樣
H097 nci-h226 人肺鱗癌細胞(bao) RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮(pi)細胞(bao)樣
H098 hepg2.2.15 人肝癌細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮(pi)細胞樣(yang)