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KATO III細胞/ KATO III人胃癌細胞 培養步驟

發(fa)布時間:2019-12-25瀏覽:1422次

KATO III細胞(bao)/ KATO III人(ren)胃癌(ai)細胞(bao)     培(pei)養步驟

產品名稱:KATO III細(xi)胞

中文名(ming)稱:人胃癌(ai)細胞;KATO III

規(gui)格:T25

形態特征:

生長狀態:上皮細胞 

特(te)征特(te)性(xing):貼壁(bi)生長

培養(yang)條件:IMDM+20%FBS(推薦HAKATA優等胎牛(niu)血清貨(huo)號:HN-FBS-500)

傳代(dai)方法:1:2。3天內可長滿。

凍(dong)存(cun)條件:HAKATA ® 無血清(qing)細胞凍(dong)存(cun)液 貨號:H-W-100 規格:100ML

支原體檢測:陰性

使用權(quan)限:A類

參考文(wen)獻:

供應商(shang):上海慧穎生物科技有(you)限公(gong)司

復蘇周期:10個工作日左右

 

培養步(bu)驟:

1)復蘇(su)細(xi)胞:將(jiang)含有(you)1mL細(xi)胞懸液(ye)(ye)的(de)凍(dong)存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍(dong),加(jia)(jia)入5mL培養(yang)(yang)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液(ye)(ye),補加(jia)(jia)4-6mL*培養(yang)(yang)基后(hou)吹(chui)勻。然后(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞懸液(ye)(ye)加(jia)(jia)入培養(yang)(yang)瓶中培養(yang)(yang)過夜(ye)(或將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)(ye)加(jia)(jia)入6cm皿中),培養(yang)(yang)過夜(ye)。第二天換液(ye)(ye)并檢查細(xi)胞密(mi)度(du)。

2)細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai):如果細(xi)胞(bao)密度達80%-90%,即可進行傳(chuan)代(dai)培養。

 

1、對于貼壁細胞,傳代可參(can)考以下方法:

1. 棄去培養上清,用(yong)不含(han)鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消(xiao)(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養(yang)(yang)瓶中,置(zhi)于(yu)37℃培(pei)養(yang)(yang)箱中消(xiao)(xiao)化1-2min,然后(hou)在顯微鏡下(xia)觀察細胞(bao)消(xiao)(xiao)化情況,若細胞(bao)大(da)部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下(xia)培(pei)養(yang)(yang)瓶后(hou)加5ml以上含10%血清(qing)的*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)終止消(xiao)(xiao)化。

3.輕輕吹打細胞,*脫落(luo)后(hou)(hou)吸出,在1000RPM條(tiao)件下離心8-10分鐘,棄(qi)去上清液,補加1-2mL培養液后(hou)(hou)吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培(pei)養(yang)液,將細胞懸(xuan)液按1:2到1:5的(de)比(bi)例分到新(xin)的(de)含5-6 ml培(pei)養(yang)液的(de)新(xin)皿中或者瓶中。

PS:若客(ke)戶(hu)收到(dao)2ml小管細(xi)(xi)胞(bao),收到(dao)細(xi)(xi)胞(bao)后(hou),用75%酒精(jing)噴(pen)灑(sa)整個管子消毒(du)后(hou)放到(dao)超(chao)凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細(xi)(xi)胞(bao)轉(zhuan)移(yi)至T25培(pei)養(yang)(yang)瓶或6cm培(pei)養(yang)(yang)皿,加入(ru)(ru)5ml左右*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)混勻,放入(ru)(ru)培(pei)養(yang)(yang)箱過(guo)夜培(pei)養(yang)(yang)后(hou)查看(kan)細(xi)(xi)胞(bao)密(mi)度(du):若密(mi)度(du)未超(chao)過(guo)80%,換液繼(ji)續培(pei)養(yang)(yang),視情況傳代或者凍存。若密(mi)度(du)超(chao)過(guo)80%,可直(zhi)接進行(xing)傳代(方法同上)。

2、對于懸浮細胞(bao),傳代可參(can)考以(yi)下方法(fa):

方法(fa)一:收集細胞(bao),1000RPM條(tiao)件下(xia)離心8-10分鐘,棄(qi)去(qu)上清液(ye),補加1-2mL培養液(ye)后吹(chui)勻,將細胞(bao)懸液(ye)按1:2到1:5的(de)比(bi)例分到新的(de)含8ml培養基(ji)的(de)新皿中或者瓶(ping)中。

方法二:可選擇(ze)半數換液(ye)方式(shi),棄去半數培養(yang)基后,將剩余(yu)細胞(bao)懸起,將細胞(bao)懸液(ye)按1:2到1:3的(de)比例(li)分到新(xin)的(de)含8ml培養(yang)基的(de)新(xin)皿中或者(zhe)瓶中。

 

3)細(xi)胞凍(dong)(dong)存:待細(xi)胞生長狀態良好(hao)時,可進行細(xi)胞凍(dong)(dong)存。貼(tie)壁細(xi)胞凍(dong)(dong)存時,棄去培養基后加入(ru)少量胰酶,細(xi)胞變圓脫落后,進行離心(xin)收集,1000RPM條件下離心(xin)8-10分鐘,去除上清(qing)(qing),按凍(dong)(dong)存數量加入(ru)血清(qing)(qing)及DMSO,凍(dong)(dong)存比例為(wei)90%FBS+10%DMSO。

 

PS:若(ruo)(ruo)客戶收(shou)到2ml小(xiao)管細胞,收(shou)到細胞后(hou),用75%酒精噴灑(sa)整(zheng)個管子消毒后(hou)放(fang)到超凈(jing)臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將(jiang)小(xiao)管細胞轉移至T25培(pei)養(yang)瓶或6cm培(pei)養(yang)皿,加(jia)入5ml左(zuo)右*培(pei)養(yang)基混勻,放(fang)入培(pei)養(yang)箱過(guo)(guo)夜培(pei)養(yang)后(hou)查看細胞密(mi)度(du):若(ruo)(ruo)密(mi)度(du)未超過(guo)(guo)80%,換液(ye)繼續培(pei)養(yang),視(shi)情況傳(chuan)代或者凍存。若(ruo)(ruo)密(mi)度(du)超過(guo)(guo)80%,可直接進(jin)行傳(chuan)代(方法同上(shang))。

 

慧(hui)穎生物是一家(jia)專業(ye)從(cong)事細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)相關產品的公司,擁(yong)有獨(du)立細(xi)(xi)胞(bao)房(可隨時約定參觀),供應胎牛(niu)血清,無血清細(xi)(xi)胞(bao)凍(dong)存液,無血清培(pei)養(yang)(yang)基(ji),常規培(pei)養(yang)(yang)基(ji),胰酶,雙抗(kang),*培(pei)養(yang)(yang)基(ji),STR鑒定細(xi)(xi)胞(bao),感受態細(xi)(xi)胞(bao)等,專業(ye),專注,性價比高,是您Shou選之家(jia)。

 

熱賣細(xi)胞(bao):

貨號(hao)    簡(jian)稱    中文(wen)名稱    培養條件    特性    形態

H001    HeLa    人宮(gong)頸癌細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H002    143B    人骨肉瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞樣(yang)

H003    293T    人胚腎細胞 DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H004    A2780   人卵巢癌(ai)細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣(yang)

H005    A549    人非(fei)小細(xi)胞肺癌細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣(yang)

H006    A673    人(ren)尤因肉瘤細胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁(bi)    多邊(bian)形

H007    AGS 人胃(wei)腺癌(ai)細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H008    BGC823  人胃腺癌細胞(bao)(低分化)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣(yang)

H009    C33A    人宮頸癌細(xi)胞(bao)(bao)    DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細(xi)胞(bao)(bao)樣

H010    CACO2   人結直腸腺癌細(xi)胞(bao)    DMEM+20% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣

H011    COLO205 人結腸癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   半懸(xuan)浮  上皮細胞(bao)樣

H012    DU145   人前列(lie)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣

H013    ES-2    人(ren)卵巢(chao)透(tou)明細(xi)胞癌(ai)細(xi)胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮細(xi)胞樣(yang)

H014    H1650   人非(fei)小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H015    H460    人(ren)大細(xi)胞(bao)(bao)肺癌細(xi)胞(bao)(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)(bao)樣

H016    HACAT   人永生化角質形成細胞    DMEM+15% FBS    貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H017    HCT116  人結腸(chang)癌(ai)細(xi)胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H018    HEK293  人胚腎(shen)細(xi)(xi)胞 DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)(xi)胞樣

H019    HEPG2   人肝癌細胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細胞樣

H020    HGC27   人胃(wei)癌細胞(未分化)  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H021    HT-29  人結(jie)腸(chang)癌細(xi)胞(bao)    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H022    HUVEC   人臍(qi)靜脈內皮細胞(bao)    ECM 貼壁    上皮細胞(bao)樣

H023    KYSE150 人食道癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H024    L02(HL7702)(QSG-7701)   人正常肝細(xi)胞    RPMI-1640+20% FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H025    LOVO    人結腸癌細胞(bao)    F12K+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H026    MCF-10A 人正(zheng)常乳腺上(shang)皮細(xi)(xi)胞  DMEM/F12(1:1) 培養基+胰島素(10ug/ml)+表(biao)皮生長因子(zi)(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒 +5% 馬血清   貼壁    上(shang)皮細(xi)(xi)胞樣(yang)

H027    MCF7   人乳腺癌細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素    貼(tie)壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H028    LX-2    人肝星(xing)狀細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞(bao)樣

H029    MDA-MB-468  人(ren)乳腺癌細胞(bao)    L-15+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H030    MIA Paca2   人胰(yi)腺癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁  ;  上皮細(xi)胞樣 少量圓(yuan)形(xing)懸浮(fu)

H031    NCI-H1299   人非(fei)小細(xi)胞肺癌細(xi)胞 RPMI1640+10%FBS 貼壁(bi)    上(shang)皮細(xi)胞樣

H032    PANC-1  人(ren)胰腺癌細胞  ;  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣(yang)

H033    RBE 人肝膽管癌細(xi)胞 DMEM+10%FBS 貼壁    上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣(yang)

H034    SAOS-2  人成骨肉瘤細(xi)(xi)胞 McCoy's 5A+15%FBS   貼壁(bi)    上皮(pi)細(xi)(xi)胞樣

H035    SiHa    人子宮(gong)頸鱗癌(ai)細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞樣

H036    NB 4    急性早幼粒細胞(bao)白血病細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   懸浮(fu)    圓形(xing)

H037    SPC-A-1 人肺腺(xian)癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H038    SW480   人結腸(chang)癌細(xi)胞    L-15+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細(xi)胞樣

H039    U-87MG 人(ren)腦星形(xing)膠質母細胞瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H040    ZR-75-1 人乳腺癌(ai)細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁   ; 上皮細胞(bao)樣

H041    SW1116  人結腸腺癌細胞  L-15+10% FBS    貼壁 ;   上皮細胞樣

H042    293A    人(ren)胚(pei)腎細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣(yang)

H043    SGC-7901    人胃腺癌細胞(bao)    RPMI-1640 +10% FBS  貼(tie)壁    上皮細胞(bao)樣

H044    Ishikawa    人子宮內膜(mo)癌細胞    DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣

H045    Eca-109 人(ren)食管(guan)癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細胞樣

H046    RD-ES   人尤文氏肉瘤    RPMI-1640+15% FBS   貼壁    上皮細胞樣(yang)

H047    NCI-H1437   人(ren)肺癌(ai)細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣(yang)

H048    HOS     人骨肉瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H049    Hela S3 人宮頸癌細胞    F12K+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H050    ECC1    人宮頸內膜腺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H051    SUP-B15     人Ph+急(ji)淋(lin)白(bai)血(xue)病(bing)細胞系   IMDM+20% FBS    懸浮    淋(lin)巴母細胞樣(yang)

H052    TF-1    人(ren)血(xue)液(ye)白血(xue)病(bing)細胞(bao)(bao)    RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人(ren)GM-CSF   懸浮    淋巴母細胞(bao)(bao)樣

H053    NCI-H446  ;  人小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌(ai)細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H054    GES-1   人胃正常黏膜(mo)上皮(pi)(pi)細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)(pi)細胞樣(yang)

H055    IOSE80 人卵(luan)巢正常上(shang)皮(pi)細(xi)胞株(zhu)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣

H056    GIST882 人胃腸道間質(zhi)瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H057    KGN 人卵巢顆粒細胞(bao)癌    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H058    U937    人組(zu)織細胞淋巴瘤細胞    RPMI-1640 +10% FBS  懸浮    單核細胞樣

H059    SV-HUC-1    人膀胱上(shang)皮永生化細胞(bao)    F12K+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H060    tpc-1   人乳頭瘤(liu)狀甲狀腺癌(ai)細胞(bao)  F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H061    hela-luci   Luciferase穩定表達(da)Hela細胞(bao)(bao) DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁    上(shang)皮細胞(bao)(bao)樣

H062    colo320 人(ren)結腸癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   半(ban)懸浮(fu)  圓形

H063    bxpc-3  人胰腺(xian)(xian)腺(xian)(xian)癌細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H064    raji    人Burkitt's淋巴瘤細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細胞(bao)樣(yang)

H065    5637    人膀胱癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細胞樣

H066    chang-liver 人肝細胞(bao)(已被hela污染)    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞(bao)樣

H067    a549-gfp  ;  gfp標記的A549細胞  F12K+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細胞樣(yang)

H068    hs578.t 人(ren)乳腺癌細胞(bao)    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素    貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H069    T24 人膀胱移(yi)行細(xi)胞癌(ai)細(xi)胞    McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H070    K562    人慢性髓系(xi)白(bai)血(xue)病細(xi)胞    IMDM+10% FBS    懸浮    淋巴母細(xi)胞樣

H071    EH-GB1  人(ren)膽(dan)囊癌細胞(表達GFP和(he)RED2)  DMEM+15% FBS    貼(tie)壁    上皮細胞樣

H072    skov-3  人卵巢腺癌細胞  McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮細胞樣(yang)

H073    ECV304  人膀胱癌細胞(bao)(T24衍生物)   M199+20%FBS 貼壁    上皮細胞(bao)樣

H074    nci-n87 人胃(wei)癌(ai)細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮(pi)細胞(bao)樣

H075    B-CPAP  人甲狀(zhuang)腺(xian)癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞樣

H076    NCI-H1975   人非小細(xi)胞(bao)肺腺(xian)癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H077    HK-2    人腎皮(pi)(pi)質近(jin)曲(qu)小管上皮(pi)(pi)細胞    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上皮(pi)(pi)細胞樣

H078    J82 人膀胱(guang)癌(ai)細(xi)胞(bao)    DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)樣

H079    A431    人皮(pi)膚鱗(lin)癌(ai)細(xi)(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細(xi)(xi)胞樣

H080    MG63    人(ren)骨肉瘤細(xi)胞    DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁    上皮細(xi)胞樣(yang)

H081    SW48    人結(jie)腸癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H082    ME180   人宮(gong)頸(jing)表(biao)皮樣癌(ai)  McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H083    hepaRG-GFP  Gfp標記的(de)人肝癌細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁(bi)    上皮細胞樣(yang)

H084    BEAS-2B 人(ren)正常肺(fei)上皮(pi)細胞    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H085    THP-1  ATCC:TIB-202    人髓系白血病單(dan)核細(xi)胞(bao)(bao)    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    單(dan)核細(xi)胞(bao)(bao)樣

H086    PC9 人肺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁(bi) ;   上皮細胞樣

H087    Fadu    人咽(yan)鱗癌細(xi)胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細(xi)胞樣

H088    Huh7    人(ren)肝癌細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣(yang)

H089    Hcc9810 人肝癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H090    Jurkat cloneE6-1    人急(ji)性T淋巴細胞(bao)白(bai)血病細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細胞(bao)樣(yang)

H091    KBM-7   人(ren)慢性粒細胞白血病細胞  IMDM+10% FBS    懸浮    圓形

H092    GBC-SD  人膽囊癌細胞    RPMI-1640+10% FBS ;  貼壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H093    JEKO-1  人套細胞(bao)淋巴癌細胞(bao)  RPMI-1640+20% FBS   懸浮    圓形

H094    CAL27   人口腔鱗(lin)癌  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H095    DB  彌漫大B細胞淋(lin)巴瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮  ;  淋(lin)巴母細胞樣

H096    hne1-lmp1   轉入LMP1基因人鼻咽(yan)癌(ai)細(xi)胞(bao)   RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H097    nci-h226    人肺鱗癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H098    hepg2.2.15  人肝癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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