BEL7404細胞/ BEL7404人肝癌細胞      培(pei)養步驟

產品名稱：BEL7404細胞

中文(wen)名稱(cheng)：人肝癌細胞；BEL7404

規(gui)格：T25

形態(tai)特征：用Northernblot方法，未能檢測到細胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表達。 

生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態：上皮細(xi)胞樣

特征特性：貼(tie)壁生長

培(pei)養(yang)條件：DMEM(高糖）+10%FBS（推薦HAKATA優等胎牛血清貨號：HN-FBS-500）

傳(chuan)代方法：消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。

凍存條(tiao)件：HAKATA ® 無血(xue)清細胞凍存液 貨號：H-W-100 規格：100ML

支原(yuan)體(ti)檢測：陰性

使用權限：A類

參考(kao)文獻(xian)：Amelogenin:X；CSF1PO:9,10；D13S317:12,13.3；D16S539:9,10；D18S51:16；D19S433:13,14；D21S11:27,28；D2S1338:17；D3S1358:18；D5S818:11,12；D7S820:8,12；D8S1179:12；FGA:21TH01:7；TPOX:8,12；vWA:16,18

供應商：上海(hai)慧穎生物科(ke)技有限公司

復蘇周期：10個工作(zuo)日左右

培養步驟：

1）復蘇細胞(bao)(bao)：將(jiang)含有(you)1mL細胞(bao)(bao)懸液(ye)的(de)凍(dong)存管在37℃水浴中迅速搖晃解(jie)凍(dong)，加(jia)入(ru)5mL培(pei)養(yang)基(ji)混合均勻(yun)。在1000RPM條件下離心5分鐘(zhong)，棄去上(shang)清液(ye)，補加(jia)4-6mL*培(pei)養(yang)基(ji)后吹勻(yun)。然后將(jiang)所有(you)細胞(bao)(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過夜(ye)（或將(jiang)細胞(bao)(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)6cm皿中），培(pei)養(yang)過夜(ye)。第二天換液(ye)并檢查(cha)細胞(bao)(bao)密度。

2）細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度(du)達80%-90%，即(ji)可進行傳(chuan)代(dai)培養。

1、對于貼壁細(xi)胞，傳代可參考以(yi)下方法：

1. 棄去培養(yang)上清，用不含鈣、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤洗細胞1-2次(ci)。

2. 加1-2ml消(xiao)(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)養瓶中(zhong)，置于37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)(xiao)化(hua)1-2min，然后在顯微鏡下(xia)觀察細(xi)(xi)胞消(xiao)(xiao)化(hua)情況，若細(xi)(xi)胞大部分變(bian)圓并脫(tuo)落，迅速拿回操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶后加5ml以上含10%血清(qing)的*培(pei)養基終止消(xiao)(xiao)化(hua)。

3.輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞，*脫落后(hou)吸出(chu)，在1000RPM條件下離(li)心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后(hou)吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yang)液，將細(xi)胞(bao)懸液按1：2到(dao)1：5的比例分(fen)到(dao)新的含5-6 ml培養(yang)液的新皿中或(huo)者瓶中。

PS：若(ruo)(ruo)客戶(hu)收到(dao)2ml小(xiao)管細胞，收到(dao)細胞后(hou)，用75%酒精噴灑整個管子消毒后(hou)放(fang)到(dao)超(chao)凈臺或(huo)安(an)全柜(ju)內，嚴格無菌操作；將小(xiao)管細胞轉移至T25培養(yang)(yang)瓶或(huo)6cm培養(yang)(yang)皿(min)，加入5ml左右*培養(yang)(yang)基混勻，放(fang)入培養(yang)(yang)箱過夜培養(yang)(yang)后(hou)查(cha)看細胞密(mi)度(du)：若(ruo)(ruo)密(mi)度(du)未超(chao)過80%，換液繼續培養(yang)(yang)，視情況(kuang)傳代或(huo)者凍存。若(ruo)(ruo)密(mi)度(du)超(chao)過80%，可直接進(jin)行傳代（方法同上）。

2、對于懸浮細胞，傳代可(ke)參考以下方法：

方(fang)法一(yi)：收集細胞，1000RPM條件下(xia)離心(xin)8-10分鐘，棄去上清液，補(bu)加(jia)1-2mL培(pei)養(yang)液后吹勻(yun)，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培(pei)養(yang)基的新皿(min)中或者瓶中。

方法(fa)二：可選擇(ze)半數(shu)換液(ye)方式，棄去半數(shu)培養基后，將剩余細(xi)胞(bao)懸起，將細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1：2到(dao)1：3的(de)比例分(fen)到(dao)新的(de)含8ml培養基的(de)新皿中(zhong)或者瓶中(zhong)。

3）細胞凍存(cun)：待細胞生長(chang)狀態良(liang)好(hao)時，可進行(xing)細胞凍存(cun)。貼壁細胞凍存(cun)時，棄(qi)去(qu)培養基后加入(ru)(ru)少量胰(yi)酶，細胞變圓脫落后，進行(xing)離心收(shou)集，1000RPM條件(jian)下離心8-10分鐘(zhong)，去(qu)除上清，按凍存(cun)數量加入(ru)(ru)血(xue)清及(ji)DMSO，凍存(cun)比例為90%FBS+10%DMSO。

PS：若(ruo)客戶收到2ml小(xiao)管細(xi)胞，收到細(xi)胞后，用(yong)75%酒精噴灑整(zheng)個管子(zi)消毒后放(fang)(fang)到超(chao)凈臺(tai)或安全柜(ju)內，嚴格(ge)無(wu)菌操(cao)作；將小(xiao)管細(xi)胞轉移至T25培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶或6cm培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿，加入(ru)5ml左右*培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)混勻，放(fang)(fang)入(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱過(guo)夜培(pei)(pei)養(yang)(yang)后查看細(xi)胞密度：若(ruo)密度未超(chao)過(guo)80%，換液繼續培(pei)(pei)養(yang)(yang)，視情(qing)況傳(chuan)代或者凍(dong)存(cun)。若(ruo)密度超(chao)過(guo)80%，可直接(jie)進行傳(chuan)代（方(fang)法同上）。

慧(hui)穎生(sheng)物是(shi)一家(jia)專(zhuan)(zhuan)業(ye)從事細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)相關(guan)產(chan)品的公(gong)司，擁(yong)有獨立(li)細(xi)(xi)胞(bao)房（可隨時約定(ding)參觀），供應胎牛血(xue)清，無(wu)血(xue)清細(xi)(xi)胞(bao)凍(dong)存液(ye)，無(wu)血(xue)清培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)，常規培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)，胰(yi)酶，雙抗，*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)，STR鑒定(ding)細(xi)(xi)胞(bao)，感受態(tai)細(xi)(xi)胞(bao)等，專(zhuan)(zhuan)業(ye)，專(zhuan)(zhuan)注，性價比(bi)高，是(shi)您(nin)Shou選之家(jia)。

熱賣(mai)細胞：

貨號    簡稱(cheng)    中文名稱(cheng)    培養(yang)條(tiao)件(jian)    特性    形(xing)態(tai)

H001    HeLa    人宮頸癌(ai)細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H002    143B    人骨(gu)肉瘤細胞(bao)    DMEM+10% FBS ;   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H003    293T    人(ren)胚腎細胞(bao) DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H004    A2780   人卵(luan)巢癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H005    A549    人非小細胞(bao)肺癌細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H006    A673    人尤(you)因(yin)肉瘤細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    多邊形

H007    AGS 人胃腺癌細(xi)(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮細(xi)(xi)胞樣

H008    BGC823  人胃腺癌細胞(低分化(hua))    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上(shang)皮細胞樣

H009    C33A    人宮頸癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H010    CACO2   人結直腸腺癌細(xi)(xi)胞    DMEM+20% FBS    貼(tie)壁    上皮細(xi)(xi)胞樣

H011    COLO205 人結腸癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮  上皮細(xi)胞(bao)樣

H012    DU145   人前(qian)列腺癌(ai)細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H013    ES-2    人(ren)卵巢透明細胞(bao)(bao)癌細胞(bao)(bao)    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮(pi)細胞(bao)(bao)樣

H014    H1650   人(ren)非小細(xi)(xi)胞肺癌細(xi)(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細(xi)(xi)胞樣

H015    H460    人大細胞(bao)(bao)肺癌細胞(bao)(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)(bao)樣

H016    HACAT   人永生化角質形成細胞(bao)    DMEM+15% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H017    HCT116  人結腸癌細(xi)胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H018    HEK293  人胚腎細胞(bao) DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H019    HEPG2   人肝(gan)癌(ai)細(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣(yang)

H020    HGC27   人胃癌(ai)細胞(bao)(未分化)  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞(bao)樣(yang)

H021    HT-29  人結腸癌(ai)細(xi)胞(bao)    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)樣

H022    HUVEC   人臍靜脈內(nei)皮細胞    ECM 貼壁    上(shang)皮細胞樣

H023    KYSE150 人(ren)食(shi)道癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細胞樣

H024    L02(HL7702)(QSG-7701)   人正常肝細(xi)胞    RPMI-1640+20% FBS   貼(tie)壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H025    LOVO    人結腸癌細胞    F12K+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞樣

H026    MCF-10A 人正常乳腺上皮細(xi)胞  DMEM/F12(1:1) 培養基+胰島素(10ug/ml)+表皮生長因子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病(bing)毒(du) +5% 馬血(xue)清   貼(tie)壁(bi)    上皮細(xi)胞樣

H027    MCF7   人乳腺癌細胞(bao)    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H028    LX-2    人肝(gan)星狀細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞樣

H029    MDA-MB-468  人乳腺癌細胞(bao)    L-15+10% FBS    貼壁    上(shang)皮(pi)細胞(bao)樣

H030    MIA Paca2   人胰腺(xian)癌細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang) 少量圓形懸(xuan)浮

H031    NCI-H1299   人非小細胞(bao)肺癌細胞(bao) RPMI1640+10%FBS 貼壁    上皮細胞(bao)樣

H032    PANC-1  人胰腺癌(ai)細胞    DMEM+10% FBS ;   貼(tie)壁    上皮細胞樣

H033    RBE 人肝膽管癌細(xi)胞(bao)(bao) DMEM+10%FBS 貼壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)(bao)樣

H034    SAOS-2  人成骨肉瘤細胞 McCoy's 5A+15%FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮(pi)細胞樣

H035    SiHa    人子宮頸鱗癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞樣

H036    NB 4    急性早(zao)幼(you)粒細胞白血病細胞    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    圓形

H037    SPC-A-1 人(ren)肺腺癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H038    SW480   人結腸(chang)癌(ai)細(xi)胞    L-15+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H039    U-87MG 人腦星形膠質母細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H040    ZR-75-1 人(ren)乳(ru)腺癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H041    SW1116  人(ren)結(jie)腸(chang)腺癌(ai)細胞(bao)  L-15+10% FBS ;   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H042    293A    人(ren)胚腎細胞  DMEM+10% FBS    貼壁  ;  上(shang)皮細胞樣

H043    SGC-7901    人胃腺(xian)癌細胞    RPMI-1640 +10% FBS  貼壁    上皮(pi)細胞樣

H044    Ishikawa    人子(zi)宮內膜(mo)癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上(shang)皮細胞樣(yang)

H045    Eca-109 人食(shi)管癌細胞    RPMI-1640+10% FBS  ; 貼壁    上皮(pi)細胞樣

H046    RD-ES   人(ren)尤文氏(shi)肉瘤    RPMI-1640+15% FBS   貼壁(bi)   ; 上皮細胞樣

H047    NCI-H1437   人肺癌細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H048    HOS     人骨肉瘤細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮(pi)細胞(bao)樣

H049    Hela S3 人宮頸癌細(xi)胞(bao)    F12K+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H050    ECC1    人宮(gong)頸內膜腺癌細(xi)(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細(xi)(xi)胞(bao)樣

H051    SUP-B15     人Ph+急淋白血病細胞系   IMDM+20% FBS    懸浮    淋巴(ba)母細胞樣

H052    TF-1    人(ren)血液白血病(bing)細(xi)胞    RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人(ren)GM-CSF   懸(xuan)浮    淋巴母細(xi)胞樣(yang)

H053    NCI-H446    人小細(xi)(xi)胞肺癌細(xi)(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)(xi)胞樣

H054    GES-1   人胃正(zheng)常黏(nian)膜上(shang)(shang)皮細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)(shang)皮細(xi)胞樣

H055    IOSE80 人卵巢正(zheng)常上皮細胞株    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H056    GIST882 人胃腸(chang)道間(jian)質瘤(liu)細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H057    KGN 人(ren)卵(luan)巢顆(ke)粒細胞(bao)(bao)癌(ai)    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細胞(bao)(bao)樣

H058    U937    人(ren)組織細胞(bao)淋巴瘤細胞(bao)    RPMI-1640 +10% FBS  懸浮(fu)    單核(he)細胞(bao)樣

H059    SV-HUC-1    人膀胱上(shang)皮(pi)永生化(hua)細胞    F12K+10% FBS    貼壁    上(shang)皮(pi)細胞樣

H060    tpc-1   人乳頭瘤狀甲狀腺癌細胞(bao)  F12K+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細胞(bao)樣

H061    hela-luci   Luciferase穩(wen)定(ding)表達Hela細(xi)胞(bao) DMEM(L)+10% FBS 貼壁 ;   上皮細(xi)胞(bao)樣

H062    colo320 人結(jie)腸癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮  圓形

H063    bxpc-3  人(ren)胰(yi)腺(xian)腺(xian)癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H064    raji    人(ren)Burkitt's淋巴瘤細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   懸(xuan)浮    淋巴母(mu)細(xi)胞樣

H065    5637    人(ren)膀胱癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H066    chang-liver 人肝細胞(已被hela污染）    DMEM(L)+10% FBS 貼壁(bi)    上皮細胞樣

H067    a549-gfp    gfp標(biao)記的A549細胞(bao)  F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H068    hs578.t 人乳腺癌(ai)細胞(bao)    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰(yi)島素    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H069    T24 人(ren)膀胱(guang)移行細(xi)胞癌細(xi)胞    McCoy's 5A+15%FBS   貼(tie)壁    上皮細(xi)胞樣

H070    K562    人(ren)慢(man)性髓(sui)系白(bai)血病細胞    IMDM+10% FBS   ; 懸浮    淋巴母細胞樣

H071    EH-GB1  人(ren)膽囊癌細胞(bao)(bao)（表達GFP和RED2）  DMEM+15% FBS    貼壁(bi)    上(shang)皮細胞(bao)(bao)樣(yang)

H072    skov-3  人卵巢腺癌細胞(bao)  McCoy's 5A+15%FBS   貼(tie)壁(bi)    上皮(pi)細胞(bao)樣(yang)

H073    ECV304  人膀胱癌細胞（T24衍(yan)生物）   M199+20%FBS 貼壁 ;   上皮細胞樣(yang)

H074    nci-n87 人胃癌細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H075    B-CPAP  人甲狀腺癌細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H076    NCI-H1975   人非小細(xi)(xi)胞肺腺癌細(xi)(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細(xi)(xi)胞樣

H077    HK-2    人腎皮質近(jin)曲小管上(shang)皮細(xi)胞    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣(yang)

H078    J82 人(ren)膀胱癌(ai)細(xi)胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細(xi)胞樣

H079    A431    人皮(pi)(pi)膚鱗癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)(pi)細胞樣

H080    MG63    人(ren)骨肉瘤細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上(shang)皮(pi)細胞樣

H081    SW48    人結腸癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣

H082    ME180   人宮頸表皮(pi)樣癌  McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H083    hepaRG-GFP  Gfp標記的人肝(gan)癌(ai)細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁(bi)    上皮(pi)細胞樣(yang)

H084    BEAS-2B 人(ren)正常肺(fei)上皮細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H085    THP-1  ATCC：TIB-202    人髓系白血病單(dan)核(he)細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    單(dan)核(he)細胞(bao)樣

H086    PC9 人(ren)肺(fei)癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣(yang)

H087    Fadu    人咽鱗癌細(xi)胞    DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁(bi)    上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣

H088    Huh7    人肝癌細(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H089    Hcc9810 人肝癌(ai)細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁(bi)    上皮(pi)細(xi)胞樣

H090    Jurkat cloneE6-1  ;  人急性T淋巴細(xi)胞白血病細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細(xi)胞樣

H091    KBM-7   人慢性粒細胞白血病(bing)細胞  IMDM+10% FBS    懸(xuan)浮    圓形

H092    GBC-SD  人膽囊癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H093    JEKO-1  人套(tao)細(xi)胞淋巴癌(ai)細(xi)胞  RPMI-1640+20% FBS   懸浮    圓形

H094    CAL27   人口腔鱗癌  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H095    DB  彌(mi)漫大B細胞淋巴瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮(fu)    淋巴母(mu)細胞樣

H096    hne1-lmp1   轉入LMP1基因人鼻咽癌細胞(bao)   RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H097    nci-h226    人肺鱗癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁  ;  上皮細(xi)胞(bao)樣

H098    hepg2.2.15  人(ren)肝癌細(xi)(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)(xi)胞(bao)樣