BHK細胞/ BHK倉(cang)鼠腎成纖維細胞(bao)      培養步驟(zou)

產品名(ming)稱：BHK細胞

中文名(ming)稱：倉鼠(shu)腎(shen)成纖維(wei)細胞；BHK

規(gui)格(ge)：T25

形態特征(zheng)：該細胞(bao)系(xi)是于1961年由Macpherson IA、Stoker MGP建系(xi)，源自5只未(wei)辨性別的1天齡倉(cang)鼠(shu)腎；可作為(wei)轉(zhuan)化宿主；OIE組織將(jiang)該細胞(bao)用于狂(kuang)犬病的診斷。 

生長狀態：成(cheng)纖維細胞(bao)樣(yang)

特征特性：貼壁生長

培養(yang)條(tiao)件：EMEM+10%FBS（推薦HAKATA優(you)等胎牛血清貨號：HN-FBS-500）

傳代方法：1：2傳代，每周換液1~2次。

凍存(cun)條件：HAKATA ® 無血清細胞凍存(cun)液 貨號：H-W-100 規(gui)格：100ML

支原(yuan)體檢測：陰性

使用權限(xian)：A類

參(can)考文獻：

供應商：上海(hai)慧(hui)穎生物科技(ji)有限公司

復蘇周期：10個工(gong)作日左右

培養(yang)步驟：

1）復蘇細(xi)胞(bao)：將含有(you)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存管在(zai)37℃水浴中迅速搖晃解凍(dong)，加入5mL培(pei)(pei)養(yang)基混合均勻(yun)。在(zai)1000RPM條件下離(li)心(xin)5分鐘，棄去上清液(ye)，補加4-6mL*培(pei)(pei)養(yang)基后(hou)吹勻(yun)。然后(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入培(pei)(pei)養(yang)瓶中培(pei)(pei)養(yang)過(guo)夜（或將細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入6cm皿中），培(pei)(pei)養(yang)過(guo)夜。第(di)二天換液(ye)并檢查細(xi)胞(bao)密度。

2）細胞傳代(dai)：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代(dai)培(pei)養。

1、對于(yu)貼壁細胞，傳代可(ke)參考以下方法：

1. 棄(qi)去培(pei)養上(shang)清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂離子的(de)PBS潤洗細胞1-2次(ci)。

2. 加1-2ml消(xiao)(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yang)(yang)瓶中，置于37℃培養(yang)(yang)箱中消(xiao)(xiao)化(hua)1-2min，然后在顯微鏡下觀(guan)察細胞消(xiao)(xiao)化(hua)情況，若(ruo)細胞大部(bu)分(fen)變圓并(bing)脫落，迅速拿回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲幾下培養(yang)(yang)瓶后加5ml以上(shang)含10%血清的*培養(yang)(yang)基終止(zhi)消(xiao)(xiao)化(hua)。

3.輕輕吹(chui)打細胞，*脫落(luo)后吸(xi)出，在1000RPM條件下離(li)心8-10分鐘，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，補加1-2mL培養液后吹(chui)勻(yun)。

4. 按5-6ml/瓶(ping)補加培養液(ye)，將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)按1：2到1：5的(de)比(bi)例分(fen)到新的(de)含5-6 ml培養液(ye)的(de)新皿中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)。

PS：若客戶收到2ml小管(guan)細胞(bao)，收到細胞(bao)后，用75%酒精噴灑整個管(guan)子消(xiao)毒后放到超凈臺(tai)或安全柜內，嚴格無菌操作(zuo)；將小管(guan)細胞(bao)轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加(jia)入5ml左(zuo)右*培養基混勻，放入培養箱過夜培養后查看細胞(bao)密度：若密度未超過80%，換(huan)液繼(ji)續培養，視情況傳代或者(zhe)凍(dong)存。若密度超過80%，可直接(jie)進行傳代（方(fang)法同上）。

2、對于懸(xuan)浮細胞，傳代可參(can)考以下方法：

方(fang)法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bu)加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到(dao)1：5的(de)比(bi)例(li)分到(dao)新的(de)含8ml培養基(ji)的(de)新皿(min)中或(huo)者瓶中。

方法二：可選擇(ze)半數換液(ye)方式，棄去半數培(pei)養(yang)基后(hou)，將(jiang)剩余細(xi)胞懸(xuan)起，將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按1：2到(dao)1：3的(de)比例分到(dao)新的(de)含8ml培(pei)養(yang)基的(de)新皿(min)中或者瓶(ping)中。

3）細(xi)(xi)胞凍存(cun)：待(dai)細(xi)(xi)胞生長狀態(tai)良好時，可進行(xing)(xing)細(xi)(xi)胞凍存(cun)。貼(tie)壁細(xi)(xi)胞凍存(cun)時，棄去培養基后(hou)加入少量胰酶(mei)，細(xi)(xi)胞變圓脫(tuo)落后(hou)，進行(xing)(xing)離(li)(li)心收集，1000RPM條件(jian)下離(li)(li)心8-10分鐘，去除上清(qing)，按凍存(cun)數(shu)量加入血(xue)清(qing)及DMSO，凍存(cun)比例為90%FBS+10%DMSO。

PS：若(ruo)客戶收到2ml小管細胞(bao)，收到細胞(bao)后，用75%酒精(jing)噴灑整個(ge)管子消毒后放到超(chao)凈臺或安全柜內，嚴格無(wu)菌操作；將小管細胞(bao)轉移至T25培養(yang)瓶(ping)或6cm培養(yang)皿，加入(ru)5ml左右(you)*培養(yang)基混勻，放入(ru)培養(yang)箱過(guo)(guo)夜培養(yang)后查看細胞(bao)密(mi)度：若(ruo)密(mi)度未超(chao)過(guo)(guo)80%，換液繼續培養(yang)，視情況傳代(dai)或者凍存。若(ruo)密(mi)度超(chao)過(guo)(guo)80%，可直(zhi)接進行傳代(dai)（方法同上）。

慧穎生(sheng)物是一家專(zhuan)業從(cong)事細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)相關產品的(de)公司(si)，擁有獨立細(xi)胞(bao)房（可(ke)隨時約定參觀），供應胎牛血清，無血清細(xi)胞(bao)凍存液，無血清培(pei)(pei)養(yang)基，常(chang)規培(pei)(pei)養(yang)基，胰酶，雙抗，*培(pei)(pei)養(yang)基，STR鑒定細(xi)胞(bao)，感(gan)受態細(xi)胞(bao)等，專(zhuan)業，專(zhuan)注，性價(jia)比高，是您Shou選之家。

熱賣細(xi)胞(bao)：

貨號    簡稱    中文名稱    培養條件(jian)    特性    形(xing)態

H001    HeLa    人宮頸癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H002    143B    人(ren)骨(gu)肉瘤細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H003    293T    人胚腎細(xi)胞 DMEM+10% FBS  ;  貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H004    A2780   人卵巢癌細(xi)(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細(xi)(xi)胞樣

H005    A549    人非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H006    A673    人尤因(yin)肉瘤細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁  ;  多邊形

H007    AGS 人胃腺癌細(xi)胞 ;   RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細(xi)胞樣

H008    BGC823  人胃腺癌(ai)細(xi)胞(低分化(hua))    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮細(xi)胞樣

H009    C33A    人宮頸癌細胞    DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣

H010    CACO2   人結直腸腺(xian)癌細胞(bao)    DMEM+20% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H011    COLO205 人結腸癌(ai)細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   半(ban)懸浮  上(shang)皮細胞(bao)樣

H012    DU145   人前列腺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁(bi) ;   上(shang)皮細胞樣

H013    ES-2    人卵(luan)巢透明細胞癌細胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H014    H1650   人非(fei)小細(xi)胞(bao)(bao)肺癌細(xi)胞(bao)(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)(bao)樣

H015    H460    人(ren)大細胞(bao)(bao)肺癌細胞(bao)(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)(bao)樣

H016    HACAT   人永生(sheng)化(hua)角質形成(cheng)細(xi)胞    DMEM+15% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H017    HCT116  人結(jie)腸癌(ai)細胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H018    HEK293  人胚腎細(xi)胞 DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H019    HEPG2   人(ren)肝癌細(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁 ;   上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣

H020    HGC27   人胃癌細胞(bao)(未(wei)分化(hua))  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣(yang)

H021    HT-29  人(ren)結腸癌細胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H022    HUVEC   人臍靜脈內皮細胞    ECM 貼壁   ; 上皮細胞樣

H023    KYSE150 人食道癌(ai)細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞樣

H024    L02(HL7702)(QSG-7701)   人正常肝細胞    RPMI-1640+20% FBS   貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H025    LOVO    人結腸癌細胞    F12K+10% FBS    貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H026    MCF-10A 人(ren)正常乳(ru)腺上皮(pi)細胞(bao)  DMEM/F12(1:1) 培養基+胰島素(10ug/ml)+表皮(pi)生(sheng)長因(yin)子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒(du) +5% 馬血清   貼(tie)壁(bi)    上皮(pi)細胞(bao)樣

H027    MCF7   人乳腺癌(ai)細(xi)胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素    貼壁    上皮細(xi)胞樣(yang)

H028    LX-2    人肝(gan)星狀細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞樣

H029    MDA-MB-468  人乳腺(xian)癌(ai)細胞    L-15+10% FBS    貼壁 ;   上皮細胞樣

H030    MIA Paca2   人(ren)胰腺癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣 少(shao)量圓形懸浮

H031    NCI-H1299   人非小細胞肺癌細胞 RPMI1640+10%FBS 貼壁  ;  上(shang)皮細胞樣

H032    PANC-1  人(ren)胰腺癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H033    RBE 人(ren)肝膽管癌細胞 DMEM+10%FBS 貼壁    上皮細胞樣(yang)

H034    SAOS-2  人成(cheng)骨肉瘤細(xi)胞 McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H035    SiHa    人子宮頸鱗癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣(yang)

H036    NB 4    急性早幼粒(li)細(xi)胞(bao)白血(xue)病細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    圓形

H037    SPC-A-1 人肺腺癌(ai)細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H038    SW480   人結腸癌細胞(bao)(bao)    L-15+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)(bao)樣(yang)

H039    U-87MG 人腦星(xing)形膠質母(mu)細胞(bao)(bao)瘤(liu)細胞(bao)(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞(bao)(bao)樣

H040    ZR-75-1 人乳腺癌細胞(bao)(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞(bao)(bao)樣

H041    SW1116  人(ren)結腸腺(xian)癌細(xi)胞(bao)  L-15+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H042    293A    人胚腎細(xi)胞(bao)(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)(bao)樣

H043    SGC-7901    人胃腺癌細(xi)(xi)胞(bao)    RPMI-1640 +10% FBS  貼壁    上皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)樣

H044    Ishikawa    人子宮內膜癌(ai)細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞樣

H045    Eca-109 人食管癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣(yang)

H046    RD-ES   人尤文氏肉瘤    RPMI-1640+15% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H047    NCI-H1437   人肺癌細(xi)(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)(xi)胞樣(yang)

H048    HOS     人骨(gu)肉瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H049    Hela S3 人宮頸癌(ai)細胞(bao)    F12K+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞(bao)樣

H050    ECC1    人宮(gong)頸內膜腺癌細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣

H051    SUP-B15     人(ren)Ph+急淋(lin)白血病細胞系   IMDM+20% FBS    懸浮(fu)    淋(lin)巴母細胞樣(yang)

H052    TF-1    人(ren)血液白血病細胞(bao)    RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重(zhong)組人(ren)GM-CSF   懸浮    淋巴母細胞(bao)樣

H053    NCI-H446    人小細(xi)(xi)胞肺癌(ai)細(xi)(xi)胞  ;  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮(pi)細(xi)(xi)胞樣(yang)

H054    GES-1   人(ren)胃(wei)正常(chang)黏膜上皮細(xi)(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)(xi)胞樣

H055    IOSE80 人卵巢(chao)正常(chang)上(shang)皮細胞株(zhu)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細胞樣

H056    GIST882 人胃腸(chang)道(dao)間質(zhi)瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮細胞樣(yang)

H057    KGN 人(ren)卵巢(chao)顆粒(li)細(xi)胞癌    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H058    U937    人(ren)組(zu)織細胞淋(lin)巴瘤細胞    RPMI-1640 +10% FBS  懸浮    單核(he)細胞樣

H059    SV-HUC-1    人膀胱上皮永生化細(xi)胞    F12K+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H060    tpc-1   人乳頭瘤狀(zhuang)甲狀(zhuang)腺癌細(xi)胞  F12K+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細(xi)胞樣

H061    hela-luci   Luciferase穩(wen)定(ding)表達Hela細(xi)胞(bao) DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H062    colo320 人(ren)結(jie)腸癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   半(ban)懸浮  圓形

H063    bxpc-3  人胰腺腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣(yang)

H064    raji    人Burkitt's淋(lin)巴瘤(liu)細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   懸(xuan)浮    淋(lin)巴母細(xi)胞樣(yang)

H065    5637    人膀胱癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H066    chang-liver 人肝細(xi)胞(bao)(bao)(已被hela污染）    DMEM(L)+10% FBS 貼壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)(bao)樣

H067    a549-gfp    gfp標記的(de)A549細胞(bao)  F12K+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞(bao)樣

H068    hs578.t 人乳腺(xian)癌細(xi)胞(bao)(bao)    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素    貼壁(bi)    上(shang)皮細(xi)胞(bao)(bao)樣

H069    T24 人(ren)膀胱移行(xing)細(xi)胞癌細(xi)胞    McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H070    K562    人慢性髓系(xi)白(bai)血病細(xi)胞    IMDM+10% FBS   ; 懸浮    淋巴(ba)母細(xi)胞樣

H071    EH-GB1  人膽(dan)囊(nang)癌細胞（表達GFP和RED2）  DMEM+15% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H072    skov-3  人(ren)卵巢(chao)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)  McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H073    ECV304  人膀胱癌細胞（T24衍生(sheng)物(wu)）   M199+20%FBS 貼壁    上皮(pi)細胞樣

H074    nci-n87 人胃(wei)癌細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H075    B-CPAP  人甲(jia)狀腺癌細(xi)胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H076    NCI-H1975   人非(fei)小細(xi)胞(bao)肺腺癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H077    HK-2    人腎(shen)皮(pi)質(zhi)近曲(qu)小管上皮(pi)細(xi)胞(bao)    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H078    J82 人膀胱(guang)癌(ai)細胞(bao)    DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁    上皮(pi)細胞(bao)樣(yang)

H079    A431    人皮(pi)膚鱗癌細胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣

H080    MG63    人骨肉瘤細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H081    SW48    人結腸癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H082    ME180   人宮(gong)頸表皮樣癌(ai)  McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H083    hepaRG-GFP  Gfp標記的人肝癌細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H084    BEAS-2B 人(ren)正常肺上皮(pi)細胞    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H085    THP-1  ATCC：TIB-202    人髓系(xi)白血病(bing)單核細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   懸浮(fu)    單核細胞(bao)樣

H086    PC9 人肺癌細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H087    Fadu    人咽鱗癌(ai)細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣(yang)

H088    Huh7    人肝癌(ai)細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H089    Hcc9810 人肝癌(ai)細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H090    Jurkat cloneE6-1    人急性T淋(lin)巴(ba)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)白(bai)血病細(xi)(xi)胞(bao)(bao)  RPMI-1640+10% FBS   懸浮(fu)    淋(lin)巴(ba)母細(xi)(xi)胞(bao)(bao)樣

H091    KBM-7   人慢性粒(li)細胞(bao)白(bai)血病細胞(bao)  IMDM+10% FBS    懸浮    圓形

H092    GBC-SD  人(ren)膽囊癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣(yang)

H093    JEKO-1  人套細(xi)胞淋巴癌細(xi)胞  RPMI-1640+20% FBS   懸浮    圓形

H094    CAL27   人(ren)口腔鱗癌  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H095    DB  彌漫大B細胞(bao)淋巴瘤細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細胞(bao)樣

H096    hne1-lmp1   轉(zhuan)入(ru)LMP1基因(yin)人(ren)鼻咽癌細胞   RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H097    nci-h226    人(ren)肺鱗癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮細(xi)胞樣

H098    hepg2.2.15  人(ren)肝癌(ai)細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣