C8-D1A細(xi)胞/ C8-D1A小(xiao)鼠小(xiao)腦細胞     培養步驟

產品名稱：C8-D1A細胞

中文名稱(cheng)：小鼠小腦細胞；C8-D1A

規(gui)格(ge)：T25

形態特征：該永生化細胞(bao)(bao)(bao)系源自出生8天小(xiao)(xiao)鼠小(xiao)(xiao)腦組織，由B Pessac, D Trisler建(jian)立。該細胞(bao)(bao)(bao)具有小(xiao)(xiao)神(shen)經(jing)(jing)膠質(zhi)細胞(bao)(bao)(bao)特征。該細胞(bao)(bao)(bao)為(wei)GFAP陽性細胞(bao)(bao)(bao)，除(chu)此之(zhi)外，沒(mei)有檢測(ce)到(dao)其它神(shen)經(jing)(jing)膠質(zhi)神(shen)經(jing)(jing)元或小(xiao)(xiao)神(shen)經(jing)(jing)膠質(zhi)細胞(bao)(bao)(bao)的分子標記。 

生(sheng)長狀(zhuang)態：神(shen)經元細胞

特征特性：貼壁生長

培養條件：DMEM(高(gao)糖）+10%FBS（推薦HAKATA優等胎牛血清(qing)貨號：HN-FBS-500）

傳代方法(fa)：1:4~1:6傳代；每周(zhou)換(huan)液2~3次(ci)。

凍存條件：HAKATA ® 無(wu)血清細胞(bao)凍存液 貨號(hao)：H-W-100 規格：100ML

支原體檢(jian)測：陰性

使用(yong)權限：A類

參考文(wen)獻(xian)：

供應商：上海(hai)慧穎生物(wu)科(ke)技有限公司(si)

復蘇(su)周期：10個工作日左右

培養步(bu)驟：

1）復蘇(su)細(xi)胞(bao)：將(jiang)含有1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍存管在37℃水浴中(zhong)迅速搖晃解凍，加(jia)(jia)入5mL培養基混(hun)合均勻(yun)。在1000RPM條件(jian)下離(li)心5分鐘，棄去上(shang)清液，補加(jia)(jia)4-6mL*培養基后(hou)吹勻(yun)。然(ran)后(hou)將(jiang)所(suo)有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)(jia)入培養瓶中(zhong)培養過(guo)夜（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)(jia)入6cm皿中(zhong)），培養過(guo)夜。第二天(tian)換(huan)液并檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度。

2）細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果細胞(bao)密度達80%-90%，即可進行傳(chuan)代(dai)培養。

1、對于貼壁細胞(bao)，傳代可參(can)考以下(xia)方法：

1. 棄(qi)去培養上清，用不含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yang)瓶中，置于37℃培養(yang)箱(xiang)中消化1-2min，然(ran)后(hou)在顯微(wei)鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓(yuan)并脫落，迅速拿回操作臺(tai)，輕敲幾下培養(yang)瓶后(hou)加5ml以上含10%血清的*培養(yang)基終止消化。

3.輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去(qu)上清液，補(bu)加1-2mL培(pei)養(yang)液后吹(chui)勻。

4. 按(an)5-6ml/瓶補加培養液(ye)，將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按(an)1：2到1：5的比例分(fen)到新(xin)的含5-6 ml培養液(ye)的新(xin)皿(min)中或者瓶中。

PS：若客(ke)戶收(shou)到2ml小管(guan)細(xi)胞，收(shou)到細(xi)胞后(hou)，用75%酒精噴(pen)灑(sa)整個管(guan)子消毒后(hou)放(fang)到超凈(jing)臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將(jiang)小管(guan)細(xi)胞轉移至T25培(pei)養(yang)瓶或6cm培(pei)養(yang)皿，加入5ml左右*培(pei)養(yang)基混(hun)勻，放(fang)入培(pei)養(yang)箱過夜培(pei)養(yang)后(hou)查看細(xi)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培(pei)養(yang)，視情況傳代(dai)(dai)或者凍(dong)存。若密度超過80%，可(ke)直接進行(xing)傳代(dai)(dai)（方法同上）。

2、對(dui)于懸浮(fu)細胞，傳代可參(can)考以下方(fang)法(fa)：

方法一：收集(ji)細(xi)胞(bao)，1000RPM條件下(xia)離(li)心(xin)8-10分鐘(zhong)，棄去上清(qing)液(ye)，補加1-2mL培養液(ye)后吹勻，將細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶(ping)中。

方(fang)法二：可選擇半數(shu)換液方(fang)式，棄去半數(shu)培養基后(hou)，將剩(sheng)余(yu)細胞(bao)懸起，將細胞(bao)懸液按1：2到1：3的(de)比例分到新的(de)含(han)8ml培養基的(de)新皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)。

3）細(xi)(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)(cun)：待細(xi)(xi)胞(bao)生長狀態良好時，可進(jin)行細(xi)(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)(cun)。貼壁細(xi)(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)(cun)時，棄去(qu)培養基(ji)后加入少(shao)量胰酶，細(xi)(xi)胞(bao)變圓脫(tuo)落后，進(jin)行離心(xin)收(shou)集，1000RPM條件下離心(xin)8-10分鐘，去(qu)除上清，按(an)凍(dong)存(cun)(cun)數量加入血清及DMSO，凍(dong)存(cun)(cun)比例為90%FBS+10%DMSO。

PS：若(ruo)客(ke)戶收到(dao)2ml小(xiao)管(guan)細(xi)胞(bao)，收到(dao)細(xi)胞(bao)后，用75%酒精噴灑(sa)整個管(guan)子消毒后放(fang)到(dao)超(chao)凈臺或(huo)安(an)全柜內，嚴格無菌操(cao)作(zuo)；將小(xiao)管(guan)細(xi)胞(bao)轉移至(zhi)T25培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)或(huo)6cm培(pei)養(yang)(yang)(yang)皿，加入5ml左(zuo)右*培(pei)養(yang)(yang)(yang)基混(hun)勻，放(fang)入培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱過(guo)夜培(pei)養(yang)(yang)(yang)后查(cha)看細(xi)胞(bao)密(mi)度：若(ruo)密(mi)度未超(chao)過(guo)80%，換液繼續培(pei)養(yang)(yang)(yang)，視情況傳代或(huo)者凍(dong)存。若(ruo)密(mi)度超(chao)過(guo)80%，可直接進行傳代（方法同上）。

慧穎生物(wu)是(shi)一家(jia)專業從事細胞培(pei)養(yang)(yang)相關產(chan)品(pin)的公司(si)，擁(yong)有獨立細胞房（可隨時約定參(can)觀），供應胎牛(niu)血(xue)清，無血(xue)清細胞凍存(cun)液，無血(xue)清培(pei)養(yang)(yang)基，常規培(pei)養(yang)(yang)基，胰(yi)酶，雙抗，*培(pei)養(yang)(yang)基，STR鑒定細胞，感受態細胞等(deng)，專業，專注，性價比(bi)高，是(shi)您Shou選之家(jia)。

熱賣(mai)細胞：

貨號    簡稱(cheng)    中文名稱(cheng)    培養條件    特性    形態(tai)

H001    HeLa    人宮頸(jing)癌細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H002    143B    人骨肉瘤細胞 ;   DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣(yang)

H003    293T    人胚腎細(xi)胞 DMEM+10% FBS    貼(tie)壁(bi)    上(shang)皮細(xi)胞樣

H004    A2780   人卵巢癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H005    A549    人非小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞樣

H006    A673    人(ren)尤(you)因肉(rou)瘤(liu)細胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    多(duo)邊(bian)形(xing)

H007    AGS 人胃腺癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮細(xi)胞樣

H008    BGC823  人胃腺癌細(xi)胞(低分化)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣

H009    C33A    人宮頸癌(ai)細(xi)(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁  ;  上皮細(xi)(xi)胞(bao)樣

H010    CACO2   人(ren)結(jie)直腸腺(xian)癌細(xi)胞(bao)    DMEM+20% FBS    貼(tie)壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H011    COLO205 人結腸癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮  上皮細胞樣

H012    DU145   人前(qian)列(lie)腺癌細(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H013    ES-2    人(ren)卵巢透(tou)明細胞(bao)(bao)癌細胞(bao)(bao)    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮(pi)細胞(bao)(bao)樣

H014    H1650   人非小(xiao)細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H015    H460    人大細(xi)胞(bao)肺癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)樣

H016    HACAT   人(ren)永生化角質(zhi)形成細(xi)胞    DMEM+15% FBS    貼(tie)壁(bi)    上皮(pi)細(xi)胞樣

H017    HCT116  人結(jie)腸癌細胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H018    HEK293  人胚腎細(xi)(xi)胞 DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細(xi)(xi)胞樣

H019    HEPG2   人(ren)肝(gan)癌細胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮(pi)細胞樣

H020    HGC27   人胃癌細胞(未分化(hua))  DMEM+10% FBS    貼壁 ;   上皮細胞樣(yang)

H021    HT-29  人(ren)結(jie)腸癌細(xi)胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H022    HUVEC   人臍靜脈內皮(pi)細(xi)胞(bao)    ECM 貼壁(bi)    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H023    KYSE150 人食道癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H024    L02(HL7702)(QSG-7701)   人正常肝細胞(bao)    RPMI-1640+20% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H025    LOVO    人(ren)結腸癌細胞    F12K+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H026    MCF-10A 人正常乳腺上皮細胞(bao)(bao)  DMEM/F12(1:1) 培養基(ji)+胰島素(su)(10ug/ml)+表(biao)皮生長(chang)因子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂(luan)病毒 +5% 馬血清   貼壁    上皮細胞(bao)(bao)樣(yang)

H027    MCF7   人乳腺(xian)癌細胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰(yi)島素    貼壁    上皮細胞樣

H028    LX-2    人肝星狀(zhuang)細胞(bao)   ; DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H029    MDA-MB-468  人乳腺癌(ai)細胞    L-15+10% FBS    貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H030    MIA Paca2   人(ren)胰腺癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上(shang)皮(pi)細胞樣 少量圓(yuan)形懸浮(fu)

H031    NCI-H1299   人非小(xiao)細(xi)(xi)胞肺(fei)癌細(xi)(xi)胞 RPMI1640+10%FBS 貼壁    上(shang)皮細(xi)(xi)胞樣

H032    PANC-1  人胰腺癌細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H033    RBE 人肝膽管癌細胞(bao)(bao) DMEM+10%FBS 貼壁(bi)    上(shang)皮細胞(bao)(bao)樣

H034    SAOS-2  人成骨肉(rou)瘤細(xi)胞 McCoy's 5A+15%FBS   貼(tie)壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H035    SiHa    人(ren)子(zi)宮(gong)頸鱗癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞樣

H036    NB 4    急性早幼粒細(xi)胞白血病細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   懸(xuan)浮    圓形(xing)

H037    SPC-A-1 人肺腺(xian)癌細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H038    SW480   人(ren)結腸癌細(xi)胞    L-15+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H039    U-87MG 人腦星形膠質母細(xi)胞瘤細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H040    ZR-75-1 人乳腺癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H041    SW1116  人結腸腺(xian)癌細胞  L-15+10% FBS  ;  貼壁(bi)    上皮細胞樣

H042    293A    人胚腎細胞  DMEM+10% FBS ;   貼壁    上皮細胞樣

H043    SGC-7901    人(ren)胃腺癌(ai)細胞    RPMI-1640 +10% FBS  貼壁    上皮細胞樣

H044    Ishikawa   ; 人子(zi)宮(gong)內膜(mo)癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H045    Eca-109 人食(shi)管(guan)癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細胞(bao)樣

H046    RD-ES   人(ren)尤文氏肉瘤(liu)    RPMI-1640+15% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H047    NCI-H1437   人肺癌細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H048    HOS     人骨肉瘤細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁   ; 上皮(pi)細(xi)胞樣

H049    Hela S3 人宮頸癌細胞(bao)(bao) ;   F12K+10% FBS    貼壁    上(shang)皮(pi)細胞(bao)(bao)樣

H050    ECC1    人宮頸內(nei)膜(mo)腺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣(yang)

H051    SUP-B15    ; 人(ren)Ph+急淋白血(xue)病細(xi)(xi)胞系   IMDM+20% FBS    懸浮    淋巴(ba)母細(xi)(xi)胞樣

H052    TF-1    人(ren)血(xue)液(ye)白(bai)血(xue)病細胞(bao)    RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人(ren)GM-CSF   懸浮    淋巴母(mu)細胞(bao)樣

H053    NCI-H446    人(ren)小細(xi)胞肺(fei)癌(ai)細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細(xi)胞樣

H054    GES-1   人(ren)胃正常黏膜上(shang)皮細(xi)(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)(xi)胞樣

H055    IOSE80 人卵巢正(zheng)常上皮細(xi)(xi)胞(bao)株(zhu)    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁   ; 上皮細(xi)(xi)胞(bao)樣

H056    GIST882 人胃腸道間(jian)質瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H057    KGN 人卵(luan)巢顆粒(li)細胞癌 ;   DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細胞樣

H058    U937    人組(zu)織細(xi)胞淋巴瘤細(xi)胞    RPMI-1640 +10% FBS  懸浮(fu)    單核細(xi)胞樣

H059    SV-HUC-1    人膀胱上皮(pi)永生化細胞    F12K+10% FBS  ;  貼壁    上皮(pi)細胞樣

H060    tpc-1   人乳(ru)頭瘤狀(zhuang)甲狀(zhuang)腺癌(ai)細胞  F12K+10% FBS    貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H061    hela-luci   Luciferase穩定表達Hela細(xi)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H062    colo320 人結腸(chang)癌(ai)細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   半懸(xuan)浮(fu)  圓形

H063    bxpc-3  人胰(yi)腺(xian)腺(xian)癌細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣(yang)

H064    raji    人Burkitt's淋巴(ba)(ba)瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴(ba)(ba)母(mu)細胞樣(yang)

H065    5637    人膀胱癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H066    chang-liver 人肝細胞(bao)(已(yi)被hela污染(ran)）    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞(bao)樣

H067    a549-gfp   ; gfp標記的(de)A549細胞  F12K+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞樣

H068    hs578.t 人乳腺癌細胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島(dao)素    貼壁    上皮細胞樣

H069    T24 人膀(bang)胱移行(xing)細(xi)胞(bao)癌(ai)細(xi)胞(bao)    McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H070    K562    人慢性髓(sui)系(xi)白血(xue)病細胞    IMDM+10% FBS    懸浮    淋巴母(mu)細胞樣

H071    EH-GB1  人膽(dan)囊癌細胞（表達GFP和RED2）  DMEM+15% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H072    skov-3  人(ren)卵巢腺癌(ai)細胞(bao)  McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H073    ECV304  人(ren)膀胱癌細胞(bao)（T24衍生物）   M199+20%FBS 貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣(yang)

H074    nci-n87 人胃癌細(xi)胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H075    B-CPAP  人甲狀腺(xian)癌(ai)細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣(yang)

H076    NCI-H1975   人非小細胞肺腺癌(ai)細胞  ;  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣(yang)

H077    HK-2    人腎皮(pi)質近曲小管上皮(pi)細胞(bao)    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H078    J82 人(ren)膀胱癌細(xi)胞(bao)    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H079    A431    人(ren)皮(pi)膚鱗癌細(xi)胞(bao)(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細(xi)胞(bao)(bao)樣

H080    MG63    人骨肉瘤細(xi)胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細(xi)胞樣

H081    SW48    人(ren)結腸癌細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁 ;   上皮細胞(bao)樣

H082    ME180   人宮頸表皮樣癌  McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上(shang)皮細胞樣

H083    hepaRG-GFP  Gfp標(biao)記(ji)的人肝癌細(xi)胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁 ;   上皮細(xi)胞樣

H084    BEAS-2B 人正常肺上(shang)皮細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H085    THP-1  ATCC：TIB-202    人髓系白(bai)血病單核(he)細胞    RPMI-1640+10% FBS   懸浮(fu)    單核(he)細胞樣

H086    PC9 人(ren)肺癌(ai)細(xi)胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣(yang)

H087    Fadu    人咽(yan)鱗癌細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上(shang)皮細胞樣

H088    Huh7    人肝(gan)癌細胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H089    Hcc9810 人肝(gan)癌(ai)細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)  ;  上皮細胞樣

H090    Jurkat cloneE6-1    人急性T淋巴細胞(bao)白(bai)血病細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細胞(bao)樣

H091    KBM-7   人(ren)慢性粒細胞白血(xue)病細胞  IMDM+10% FBS    懸浮    圓形

H092    GBC-SD  人膽囊癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H093    JEKO-1  人套細(xi)胞淋巴癌細(xi)胞  RPMI-1640+20% FBS   懸浮(fu)  ;  圓形

H094    CAL27   人口腔鱗癌  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H095    DB  彌漫(man)大B細胞(bao)淋巴(ba)瘤細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴(ba)母細胞(bao)樣

H096    hne1-lmp1   轉入LMP1基因人鼻咽癌細(xi)胞   RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H097    nci-h226    人肺鱗癌細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H098    hepg2.2.15  人肝癌細(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)樣