Hepa 1-6細胞/ Hepa 1-6小鼠肝癌細胞   培養步驟

產品名稱：Hepa 1-6細胞

中文名稱：小鼠肝癌細胞；Hepa 1-6

規格(ge)：T25

形態特(te)征：此細(xi)胞株源自C57/L小鼠中引發的BW7756肝癌(ai)；表達AFP、α1抗胰蛋白酶(mei)、淀粉酶(mei)；鼠痘病毒陰(yin)性。此細(xi)胞可以在(zai)無(wu)血清的培(pei)養基(ji)(ji)中繁殖，培(pei)養基(ji)(ji)成分是：DMEM,75%;Waymouth'sMAB87/3培(pei)養基(ji)(ji)，25%。添加(jia)3x10-8M硒。

生長狀態(tai)：上皮樣

特征特性：貼壁生長

培養條件：DMEM+10%FBS（推薦HAKATA優等胎(tai)牛血(xue)清貨號：HN-FBS-500）

傳(chuan)代(dai)方法：1：2傳(chuan)代(dai)

凍存條件：HAKATA ® 無血清細胞凍存液 貨號：H-W-100 規格：100ML

支原體檢測：陰性

使用權限：A類(lei)

參考文(wen)獻：

供應商：上海(hai)慧穎生物(wu)科(ke)技有限公司

復(fu)蘇周期：10個工作日左(zuo)右

培養步驟：

1）復蘇細(xi)(xi)胞：將含有(you)1mL細(xi)(xi)胞懸液(ye)(ye)的(de)凍存管在(zai)(zai)37℃水浴(yu)中迅(xun)速搖(yao)晃解凍，加入(ru)5mL培養(yang)基(ji)混合均勻(yun)。在(zai)(zai)1000RPM條件下離心5分鐘，棄(qi)去上清液(ye)(ye)，補加4-6mL*培養(yang)基(ji)后吹勻(yun)。然后將所有(you)細(xi)(xi)胞懸液(ye)(ye)加入(ru)培養(yang)瓶中培養(yang)過(guo)夜（或將細(xi)(xi)胞懸液(ye)(ye)加入(ru)6cm皿中），培養(yang)過(guo)夜。第二天換液(ye)(ye)并檢查細(xi)(xi)胞密度。

2）細胞(bao)傳(chuan)代：如果細胞(bao)密度達80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳(chuan)代培養。

1、對于貼壁細(xi)胞，傳代可參考以下(xia)方法：

1. 棄去培養上清，用不含(han)鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次(ci)。

2. 加1-2ml消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)(pei)養瓶中，置于37℃培(pei)(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2min，然后在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化(hua)情況，若細胞(bao)大部分變圓(yuan)并脫落，迅速拿回(hui)操作臺，輕敲幾下(xia)培(pei)(pei)養瓶后加5ml以上含10%血清的(de)*培(pei)(pei)養基終止消(xiao)化(hua)。

3.輕輕吹打(da)細胞，*脫落后吸出，在(zai)1000RPM條件下離(li)心8-10分鐘(zhong)，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶(ping)補加培養液，將細胞懸液按1：2到(dao)1：5的(de)比例分到(dao)新的(de)含(han)5-6 ml培養液的(de)新皿(min)中或者瓶(ping)中。

PS：若客(ke)戶(hu)收(shou)到2ml小管細(xi)胞(bao)，收(shou)到細(xi)胞(bao)后(hou)，用(yong)75%酒(jiu)精噴(pen)灑整個管子(zi)消(xiao)毒后(hou)放到超凈臺(tai)或安全(quan)柜(ju)內，嚴格無菌操(cao)作(zuo)；將小管細(xi)胞(bao)轉移至(zhi)T25培(pei)養(yang)(yang)瓶或6cm培(pei)養(yang)(yang)皿，加入(ru)5ml左右(you)*培(pei)養(yang)(yang)基混勻(yun)，放入(ru)培(pei)養(yang)(yang)箱過(guo)夜培(pei)養(yang)(yang)后(hou)查看細(xi)胞(bao)密度：若密度未超過(guo)80%，換(huan)液(ye)繼續培(pei)養(yang)(yang)，視情況傳代或者凍(dong)存。若密度超過(guo)80%，可(ke)直接(jie)進行傳代（方(fang)法同上）。

2、對于懸(xuan)浮(fu)細胞，傳代(dai)可參考(kao)以(yi)下(xia)方法(fa)：

方法一：收集細胞，1000RPM條(tiao)件下離心8-10分鐘，棄(qi)去上(shang)清液，補加(jia)1-2mL培養(yang)液后吹勻，將細胞懸液按(an)1：2到(dao)1：5的(de)比例(li)分到(dao)新(xin)(xin)的(de)含8ml培養(yang)基的(de)新(xin)(xin)皿中或(huo)者瓶中。

方(fang)法二：可選擇半(ban)(ban)數換(huan)液(ye)方(fang)式，棄去(qu)半(ban)(ban)數培養基后，將(jiang)(jiang)剩余細胞(bao)懸起，將(jiang)(jiang)細胞(bao)懸液(ye)按1：2到1：3的比例分到新(xin)的含(han)8ml培養基的新(xin)皿中(zhong)(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)(zhong)。

3）細(xi)(xi)(xi)胞凍(dong)(dong)存(cun)(cun)：待(dai)細(xi)(xi)(xi)胞生長狀態良(liang)好(hao)時，可進行細(xi)(xi)(xi)胞凍(dong)(dong)存(cun)(cun)。貼壁(bi)細(xi)(xi)(xi)胞凍(dong)(dong)存(cun)(cun)時，棄去培養基后加(jia)入(ru)(ru)少(shao)量(liang)胰(yi)酶，細(xi)(xi)(xi)胞變(bian)圓脫落后，進行離(li)心(xin)收集，1000RPM條件下(xia)離(li)心(xin)8-10分鐘，去除上清，按凍(dong)(dong)存(cun)(cun)數量(liang)加(jia)入(ru)(ru)血清及DMSO，凍(dong)(dong)存(cun)(cun)比例為90%FBS+10%DMSO。

PS：若客戶收到(dao)(dao)2ml小(xiao)管細(xi)(xi)胞，收到(dao)(dao)細(xi)(xi)胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒(du)后放到(dao)(dao)超凈臺或安全柜(ju)內，嚴格無菌操作；將小(xiao)管細(xi)(xi)胞轉移至(zhi)T25培(pei)養瓶或6cm培(pei)養皿，加入5ml左右*培(pei)養基混勻(yun)，放入培(pei)養箱過(guo)夜培(pei)養后查(cha)看細(xi)(xi)胞密度：若密度未超過(guo)80%，換液繼(ji)續培(pei)養，視(shi)情況傳代(dai)或者凍(dong)存。若密度超過(guo)80%，可直接進行(xing)傳代(dai)（方法(fa)同上）。

慧(hui)穎生物是一家(jia)專(zhuan)業從事細胞(bao)培養(yang)相關產品的(de)公司，擁(yong)有獨立細胞(bao)房（可(ke)隨時約定參觀），供應胎(tai)牛血(xue)清(qing)，無血(xue)清(qing)細胞(bao)凍存液，無血(xue)清(qing)培養(yang)基，常規培養(yang)基，胰(yi)酶，雙(shuang)抗，*培養(yang)基，STR鑒定細胞(bao)，感受態細胞(bao)等(deng)，專(zhuan)業，專(zhuan)注，性價比高，是您Shou選之家(jia)。

熱賣細胞：

貨(huo)號(hao)    簡稱    中文(wen)名稱 ;   培養條件(jian)    特性    形態

H001    HeLa    人宮頸癌(ai)細(xi)胞    DMEM+10% FBS   ; 貼壁    上皮細(xi)胞樣

H002    143B    人骨(gu)肉瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上(shang)皮(pi)細胞樣(yang)

H003    293T    人胚腎細(xi)(xi)胞 DMEM+10% FBS    貼(tie)壁(bi)    上皮細(xi)(xi)胞樣(yang)

H004    A2780   人卵巢癌(ai)細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H005    A549    人非(fei)小細(xi)胞肺(fei)癌(ai)細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁   ; 上皮細(xi)胞樣

H006    A673    人尤(you)因肉瘤(liu)細(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    多邊(bian)形

H007    AGS 人胃腺癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H008    BGC823  人胃腺癌細胞(低分化)    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H009    C33A    人宮頸癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣(yang)

H010    CACO2   人結直(zhi)腸腺癌細胞(bao)    DMEM+20% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣(yang)

H011    COLO205 人結腸癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮(fu)  上皮細(xi)胞樣(yang)

H012    DU145   人前列腺癌(ai)細(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)   ; 上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣

H013    ES-2    人卵巢透明細胞癌(ai)細胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁(bi)    上皮細胞樣

H014    H1650   人非(fei)小(xiao)細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮細(xi)胞樣

H015    H460    人大細(xi)胞(bao)肺癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H016    HACAT   人永生(sheng)化角質(zhi)形成(cheng)細胞(bao)    DMEM+15% FBS    貼壁(bi)    上(shang)皮細胞(bao)樣(yang)

H017    HCT116  人結(jie)腸癌細胞    McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H018    HEK293  人(ren)胚腎細胞(bao) DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細胞(bao)樣

H019    HEPG2   人肝癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁   ; 上(shang)皮細胞樣

H020    HGC27   人(ren)胃(wei)癌細(xi)胞(未分化)  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H021    HT-29  人(ren)結腸癌細胞(bao)    McCoy's 5A+10%FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H022    HUVEC   人(ren)臍(qi)靜脈內皮細胞(bao)    ECM 貼壁(bi)    上皮細胞(bao)樣

H023    KYSE150 人食(shi)道癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H024    L02(HL7702)(QSG-7701)   人正常肝細(xi)胞(bao) ;   RPMI-1640+20% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H025    LOVO    人(ren)結腸(chang)癌細胞(bao)    F12K+10% FBS   ; 貼(tie)壁    上皮細胞(bao)樣(yang)

H026    MCF-10A 人(ren)正(zheng)常乳腺上皮細胞  DMEM/F12(1:1) 培養基+胰島素(10ug/ml)+表皮生長(chang)因(yin)子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒 +5% 馬血清   貼壁(bi)    上皮細胞樣

H027    MCF7   人乳腺癌細胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素(su)    貼壁    上皮(pi)細胞樣

H028    LX-2    人肝星狀細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)樣

H029    MDA-MB-468  人乳腺癌細(xi)胞 ;   L-15+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細(xi)胞樣

H030    MIA Paca2   人胰腺癌(ai)細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣 少(shao)量(liang)圓形懸浮

H031    NCI-H1299   人非小細胞肺癌細胞 RPMI1640+10%FBS 貼壁    上(shang)皮細胞樣

H032    PANC-1  人(ren)胰腺癌細胞(bao)    DMEM+10% FBS   ; 貼壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H033    RBE 人肝膽管癌細(xi)胞 DMEM+10%FBS 貼壁(bi)    上皮細(xi)胞樣(yang)

H034    SAOS-2  人成(cheng)骨肉瘤細胞 McCoy's 5A+15%FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮(pi)細胞樣

H035    SiHa    人子(zi)宮頸鱗癌細胞    DMEM+10% FBS   ; 貼壁    上皮(pi)細胞樣(yang)

H036    NB 4    急(ji)性早幼(you)粒細胞白血病細胞    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    圓形

H037    SPC-A-1 人(ren)肺(fei)腺癌細(xi)胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞樣

H038    SW480   人結腸癌細(xi)胞    L-15+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細(xi)胞樣

H039    U-87MG 人腦(nao)星形膠質母細胞(bao)瘤細胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞(bao)樣

H040    ZR-75-1 人乳腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣

H041    SW1116  人結腸腺癌細胞  L-15+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H042    293A    人胚腎(shen)細胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H043    SGC-7901    人胃(wei)腺(xian)癌細(xi)胞  ;  RPMI-1640 +10% FBS  貼壁    上皮細(xi)胞樣

H044    Ishikawa    人子宮內(nei)膜癌細胞    DMEM+10% FBS ;   貼(tie)壁    上皮(pi)細胞樣

H045    Eca-109 人食管癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞樣

H046    RD-ES   人尤文氏(shi)肉瘤    RPMI-1640+15% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞樣

H047    NCI-H1437   人肺癌細(xi)胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H048    HOS     人骨肉(rou)瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞樣

H049    Hela S3 人(ren)宮(gong)頸癌細(xi)(xi)胞    F12K+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細(xi)(xi)胞樣

H050    ECC1    人宮(gong)頸(jing)內膜(mo)腺(xian)癌(ai)細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H051  ;  SUP-B15     人Ph+急淋白血病細胞系   IMDM+20% FBS    懸浮    淋巴(ba)母細胞樣

H052    TF-1    人(ren)血液(ye)白血病細胞   ; RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人(ren)GM-CSF   懸浮    淋(lin)巴母細胞樣

H053    NCI-H446 ;   人小(xiao)細(xi)胞肺癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H054    GES-1   人胃(wei)正常黏膜上皮(pi)細胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮(pi)細胞(bao)樣

H055    IOSE80 人卵巢正常上皮細(xi)胞(bao)株    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H056    GIST882 人胃腸道(dao)間質瘤細(xi)胞 ; RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁    上皮細(xi)胞樣

H057    KGN 人卵巢顆(ke)粒細胞癌(ai)    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H058    U937    人組織(zhi)細胞淋(lin)巴瘤(liu)細胞    RPMI-1640 +10% FBS  懸浮    單核細胞樣

H059    SV-HUC-1    人膀胱上皮(pi)(pi)永生化細胞    F12K+10% FBS    貼壁   ; 上皮(pi)(pi)細胞樣

H060    tpc-1   人乳頭(tou)瘤狀甲狀腺癌細胞(bao)  F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞(bao)樣

H061    hela-luci   Luciferase穩(wen)定表達Hela細(xi)胞(bao) DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣

H062    colo320 人結腸(chang)癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮  圓(yuan)形(xing)

H063    bxpc-3  人胰腺腺癌細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮(pi)細(xi)胞樣

H064    raji    人Burkitt's淋巴瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細胞樣

H065    5637    人膀(bang)胱(guang)癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁(bi)    上皮細(xi)胞樣(yang)

H066    chang-liver 人肝細胞(已被hela污染(ran)）    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H067    a549-gfp    gfp標記的A549細(xi)胞(bao)  F12K+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣

H068    hs578.t 人乳腺癌細胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素    貼壁(bi)    上皮(pi)細胞樣

H069    T24 人膀胱(guang)移行細胞癌細胞    McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H070    K562    人(ren)慢性髓系白血病細胞(bao)(bao)    IMDM+10% FBS    懸(xuan)浮(fu)    淋巴母細胞(bao)(bao)樣

H071    EH-GB1  人膽囊癌細(xi)胞(bao)（表達GFP和RED2）  DMEM+15% FBS    貼(tie)壁    上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣

H072    skov-3  人卵巢腺(xian)癌(ai)細(xi)胞  McCoy's 5A+15%FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣(yang)

H073    ECV304  人膀胱癌細(xi)(xi)胞（T24衍(yan)生(sheng)物）   M199+20%FBS 貼(tie)壁(bi)    上皮細(xi)(xi)胞樣

H074    nci-n87 人(ren)胃癌(ai)細胞(bao)  RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁(bi)    上皮細胞(bao)樣

H075    B-CPAP  人甲狀腺癌(ai)細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H076    NCI-H1975   人(ren)非小細(xi)胞肺腺癌細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細(xi)胞樣

H077    HK-2    人腎皮(pi)質近曲小管上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁(bi)    上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)樣

H078    J82 人膀胱(guang)癌細(xi)胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細(xi)胞樣(yang)

H079    A431    人(ren)皮膚鱗癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁  ;  上(shang)皮細胞樣

H080    MG63    人骨肉瘤細(xi)胞    DMEM(L)+10% FBS 貼(tie)壁    上皮(pi)細(xi)胞樣

H081    SW48    人(ren)結腸癌細(xi)胞(bao)    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

H082    ME180   人宮(gong)頸表皮樣癌(ai)  McCoy's 5A+10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H083    hepaRG-GFP  Gfp標記的(de)人(ren)肝癌細胞(bao) DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞(bao)樣

H084    BEAS-2B 人(ren)正常肺上(shang)皮(pi)細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮(pi)細胞樣

H085    THP-1  ATCC：TIB-202    人(ren)髓系白血病單核細(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   懸浮(fu)    單核細(xi)胞樣

H086    PC9 人(ren)肺癌(ai)細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮(pi)細胞樣

H087    Fadu    人咽鱗癌細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H088    Huh7    人肝癌細(xi)胞(bao)  DMEM+10% FBS    貼壁(bi)    上皮細(xi)胞(bao)樣

H089    Hcc9810 人肝(gan)癌(ai)細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮(pi)細胞樣

H090    Jurkat cloneE6-1    人(ren)急(ji)性T淋(lin)巴細(xi)胞白(bai)血病細(xi)胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋(lin)巴母細(xi)胞樣

H091    KBM-7   人慢(man)性粒細胞白血(xue)病細胞  IMDM+10% FBS    懸浮(fu)    圓形

H092    GBC-SD  人膽囊癌細(xi)(xi)胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上(shang)皮細(xi)(xi)胞樣

H093    JEKO-1  人套細胞淋巴(ba)癌細胞  RPMI-1640+20% FBS   懸(xuan)浮    圓(yuan)形

H094    CAL27   人(ren)口(kou)腔鱗癌  DMEM+10% FBS    貼壁    上(shang)皮細胞樣

H095    DB  彌(mi)漫大B細胞淋巴(ba)瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴(ba)母(mu)細胞樣

H096    hne1-lmp1   轉入LMP1基(ji)因人鼻咽(yan)癌細胞(bao)   RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞(bao)樣

H097    nci-h226    人肺鱗癌細(xi)胞(bao)    RPMI-1640+10% FBS   貼(tie)壁 ;   上皮細(xi)胞(bao)樣

H098    hepg2.2.15  人肝癌細胞  DMEM+10% FBS    貼(tie)壁    上皮細胞樣