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K562/ADR細胞| K562/ADR細胞系 培養步驟

發(fa)布時(shi)間:2020-07-06瀏覽:1414次

K562/ADR細胞| K562/ADR細胞系 培養步(bu)驟

產品名稱(cheng):K562/ADR細胞

中文名(ming)稱:人K562耐阿霉素細胞株;K562/ADR

規格(ge):T25

供(gong)應(ying)商:上海慧穎(ying)生物科技(ji)有限公司

復蘇周期:10個工作日左右

 

培(pei)養步驟:

1)復蘇細(xi)胞:將含有1mL細(xi)胞懸(xuan)(xuan)液的(de)凍存(cun)管在37℃水浴中(zhong)(zhong)迅速搖晃解凍,加入(ru)5mL培(pei)(pei)養(yang)基(ji)混合均勻。在1000RPM條(tiao)件下離心5分鐘,棄去上清(qing)液,補加4-6mL*培(pei)(pei)養(yang)基(ji)后(hou)吹勻。然(ran)后(hou)將所有細(xi)胞懸(xuan)(xuan)液加入(ru)培(pei)(pei)養(yang)瓶中(zhong)(zhong)培(pei)(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)(或將細(xi)胞懸(xuan)(xuan)液加入(ru)6cm皿中(zhong)(zhong)),培(pei)(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)。第二天(tian)換(huan)液并檢(jian)查細(xi)胞密度。

2)細胞(bao)(bao)傳代(dai):如果細胞(bao)(bao)密度(du)達80%-90%,即(ji)可進行傳代(dai)培養。

 

1、對(dui)于貼壁細胞,傳代可參考以下方(fang)法:

1. 棄去(qu)培(pei)養上清,用不含鈣、鎂(mei)離(li)子的PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

2. 加1-2ml消(xiao)化(hua)(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培養瓶中,置(zhi)于(yu)37℃培養箱中消(xiao)化(hua)(hua)1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞(bao)消(xiao)化(hua)(hua)情況,若細胞(bao)大部分變圓(yuan)并脫落,迅速拿回操(cao)作(zuo)臺,輕敲幾(ji)下培養瓶后加5ml以上含10%血清的*培養基終止(zhi)消(xiao)化(hua)(hua)。

3.輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞,*脫落后吸出,在1000RPM條(tiao)件(jian)下離心8-10分鐘,棄去上(shang)清液(ye),補加1-2mL培養液(ye)后吹(chui)勻(yun)。

4. 按5-6ml/瓶補加培(pei)養液,將(jiang)細胞懸液按1:2到1:5的比(bi)例(li)分到新的含(han)5-6 ml培(pei)養液的新皿中或者瓶中。

PS:若客戶收到2ml小(xiao)管(guan)細胞(bao),收到細胞(bao)后(hou)(hou),用75%酒精(jing)噴灑整個管(guan)子消毒(du)后(hou)(hou)放到超(chao)凈臺或安全(quan)柜(ju)內,嚴格無菌操(cao)作(zuo);將小(xiao)管(guan)細胞(bao)轉移至T25培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶或6cm培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)皿(min),加入(ru)5ml左右(you)*培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基混勻,放入(ru)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱過(guo)夜培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)后(hou)(hou)查看細胞(bao)密度(du):若密度(du)未超(chao)過(guo)80%,換液繼續(xu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang),視情況傳代或者凍存。若密度(du)超(chao)過(guo)80%,可直接進行傳代(方(fang)法同(tong)上)。

2、對于懸(xuan)浮細胞(bao),傳代(dai)可參考(kao)以(yi)下方法(fa):

方法一:收集細胞,1000RPM條件下離(li)心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹(chui)勻,將細胞懸液按1:2到1:5的(de)(de)比例分到新的(de)(de)含8ml培養基的(de)(de)新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)。

方(fang)法二:可選擇半數換液方(fang)式,棄去半數培養基后(hou),將(jiang)剩余細(xi)胞懸起,將(jiang)細(xi)胞懸液按1:2到1:3的比例分(fen)到新的含8ml培養基的新皿(min)中(zhong)或者瓶中(zhong)。

 

3)細(xi)胞(bao)凍(dong)(dong)存:待細(xi)胞(bao)生長狀(zhuang)態良(liang)好時,可進(jin)行細(xi)胞(bao)凍(dong)(dong)存。貼(tie)壁細(xi)胞(bao)凍(dong)(dong)存時,棄去(qu)培(pei)養(yang)基后(hou)加入少量(liang)胰酶,細(xi)胞(bao)變圓脫落后(hou),進(jin)行離(li)(li)心(xin)收集,1000RPM條件下離(li)(li)心(xin)8-10分鐘,去(qu)除上清,按(an)凍(dong)(dong)存數量(liang)加入血(xue)清及DMSO,凍(dong)(dong)存比例為90%FBS+10%DMSO。

 

PS:若客戶(hu)收到2ml小(xiao)管(guan)細胞,收到細胞后,用75%酒精噴(pen)灑整(zheng)個(ge)管(guan)子(zi)消毒后放到超凈(jing)臺或安(an)全柜內,嚴格(ge)無菌操作;將小(xiao)管(guan)細胞轉移至T25培(pei)養瓶(ping)或6cm培(pei)養皿,加入5ml左右*培(pei)養基混(hun)勻,放入培(pei)養箱(xiang)過(guo)夜培(pei)養后查看細胞密度(du):若密度(du)未(wei)超過(guo)80%,換液繼(ji)續培(pei)養,視情況傳(chuan)代或者凍存。若密度(du)超過(guo)80%,可直接進行傳(chuan)代(方法(fa)同(tong)上)。

 

慧穎(ying)生物是一家專(zhuan)業(ye)從事細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培養相關產品的公(gong)司,擁有獨立(li)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)房(可(ke)隨時約定參觀),供應胎牛血清(qing)(qing),無血清(qing)(qing)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)凍存液(ye),無血清(qing)(qing)培養基,常(chang)規培養基,胰酶,雙抗,*培養基,STR鑒定細(xi)(xi)胞(bao)(bao),感受態細(xi)(xi)胞(bao)(bao)等,專(zhuan)業(ye),專(zhuan)注,性價比高,是您Shou選之家。

 

熱賣(mai)細胞:

細(xi)胞(bao)名稱

英(ying)文簡稱

細胞類型

小(xiao)鼠乳腺癌細胞熒光(guang)酶(mei)標(biao)記

4T1-LUC

細胞系(xi)

SD大(da)鼠脂肪(fang)干細胞+RFP

原代細胞-RFP

原(yuan)代(dai)細胞

綿羊肺成纖維細(xi)胞永生化細(xi)胞

OAR-L1

原(yuan)代細(xi)胞永生化

奶(nai)山羊乳(ru)腺上皮細(xi)胞(bao)永生(sheng)化細(xi)胞(bao)

 

原代細胞永生化

人膽囊(nang)上(shang)皮細胞永生化細胞

原代SV40永生化

原代細胞永生化

人肺癌細胞紅色(se)標記

A549-RFP

細胞系

人(ren)肝竇內皮細胞(bao)永生化細胞(bao)

 

原代細(xi)胞永生化

人結腸癌紫(zi)杉(shan)醇耐藥株系(xi)

HCT-15/Taxol

細胞(bao)系耐藥株(zhu)

人結(jie)直腸癌氟尿嘧啶耐(nai)藥株

HCT-15/FU

細胞系耐藥株

人(ren)類星形(xing)膠質(zhi)瘤耐替莫唑胺細胞

U251MG/TMZ-luc

細胞系

人類星(xing)形膠質細胞(bao)瘤細胞(bao)

U251MG/TMZ

構(gou)建耐(nai)藥株(zhu)

人慢(man)性骨髓性白血病細胞阿霉素

K562/ADR

細胞系耐藥株(zhu)

人腦星(xing)形(xing)膠質母細胞瘤紅色標記

U-87MG-RFP

細胞(bao)系

人皮膚成纖維細胞 

HSF

原(yuan)代細胞永(yong)生化(hua)

人臍靜脈(mo)內皮綠色GFP標記

原代細胞-GFP

原代細胞(bao)

人臍靜脈內(nei)皮紅色RFP標記

HUVEC-RFP

細胞系(xi)

人臍靜脈(mo)內皮(pi)綠(lv)色GFP標記(ji)

HUVEC-GFP

細(xi)胞系(xi)

人臍靜(jing)脈內皮

HUV-EC-C

細胞系

人前庭(ting)鞘(qiao)膜瘤細胞永生化細胞

 

原代細胞永生化

人乳腺癌阿霉素耐藥(yao)細胞株

Mcf-7/adr

細胞系耐(nai)藥株

人乳腺癌細胞熒(ying)光素(su)酶(mei)標記

MCF7-luc

細胞系

人三陰性乳腺(xian)癌

MDA-MB-231-luciferase

細胞系(xi)

人神經母細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao)

SH-SY5Y 轉(zhuan)染突變型(xing)

細胞系

人神經母細胞瘤(liu)細胞

SH-SY5Y 轉染野生型

細胞系

人胰腺(xian)癌細胞(bao)吉西他濱(bin)耐藥株(zhu)

PANC-1/GEM

細胞系耐藥株

人(ren)胰腺神(shen)經(jing)內分(fen)泌腫瘤細胞(bao)永生化細胞(bao)

 

原代(dai)細胞(bao)永生(sheng)化

人胰腺腫瘤(liu)細胞永(yong)生化細胞

 

原(yuan)代細胞永生化

人胰腺腫瘤相(xiang)關(guan)成纖(xian)維(wei)永生化(hua)細(xi)胞

 

原代細(xi)胞(bao)永生化

人轉移(yi)灶淋巴結轉移(yi)腫(zhong)瘤細(xi)胞永生(sheng)化細(xi)胞

 

原代細胞永(yong)生(sheng)化

人主動脈內皮細(xi)胞(bao)永(yong)生化細(xi)胞(bao)

 

原(yuan)代細胞永生化(hua)

人子宮內膜上皮細胞(bao)永(yong)生化細胞(bao)

 

原代細(xi)胞永(yong)生化

大鼠腦微血管內皮細胞永生(sheng)化細胞

 

原代細胞(bao)永生化

小鼠(shu)肺成(cheng)纖維細胞永(yong)生(sheng)化(hua)細胞

 

原代(dai)細胞永生化(hua)

小鼠附睪脂肪干細胞永生化細胞

 

原代(dai)細胞永生化

小鼠肝癌細(xi)胞(bao)熒光素(su)酶標記

HEPA1-6-LUC

細胞系

小(xiao)鼠骨(gu)肉瘤成骨(gu)細胞

K7M2WT-LUC

細(xi)胞系

小鼠腎(shen)小球系膜細(xi)胞永(yong)生化細(xi)胞

 

原代細(xi)胞永生化(hua)

小(xiao)鼠(shu)胰腺星狀(zhuang)細(xi)胞永(yong)生化

 

原(yuan)代細(xi)胞永(yong)生化

C57小鼠脂肪干細胞(bao)永生(sheng)化(hua)細胞(bao)

 

原代(dai)細胞永生化

鴨(ya)腦微(wei)血(xue)管內皮細(xi)胞(bao)永生化細(xi)胞(bao)

 

原代細胞永生化(hua)

鴨胚成纖(xian)維細胞永(yong)生化(hua)

Duck embryo

原代細(xi)胞永生化

鴨胚肝(gan)間質細胞永生化細胞

 

原代細胞永生化

羊睪(gao)丸間質細胞永生化細胞

 

原代細胞永生化

湖羊瘤胃上皮細(xi)胞(bao)永生化細(xi)胞(bao)

 

原代細胞永生化

中國倉鼠卵巢細胞(bao) CHO-K1懸浮細胞(bao)

 CHO-K1懸浮細胞(bao)

馴化細胞(bao)系

豬(杜洛克,萊蕪)腹部脂肪干細胞永生化細胞

 

原代細(xi)胞永生化

豬扁(bian)桃體上(shang)皮(pi)細(xi)胞永生化(hua)細(xi)胞

 

原(yuan)代細胞永生化

豬(zhu)肝星狀細胞(bao)永生化細胞(bao)

 

原代細胞永生化

豬骨骼肌衛(wei)星細胞(bao)永生化細胞(bao)

 

原代細胞永生化

豬子宮內膜上皮(pi)細胞(bao)永(yong)生(sheng)化細胞(bao)

 

原代細(xi)胞永生化

豬(zhu)鼻腔粘(zhan)膜上(shang)皮(pi)細胞(bao)永生(sheng)化細胞(bao)

 

原代細胞永(yong)生化

兔(tu)肝(gan)臟(zang)間質細胞永生化細胞

 

原代細(xi)胞永生化

 

 

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