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GM17940細(xi)胞,人骨骼肌(ji)成肌(ji)細(xi)胞
組成部分:細胞 T25瓶 細胞數(shu)量1-3百萬級別+說明書
生(sheng)長特(te)性(xing):貼壁(bi)生(sheng)長
培(pei)(pei)養條件:培(pei)(pei)養基:90% DMEM培養基+10% 特級胎牛血清
氣(qi)相(xiang):空氣(qi)95%,二氧化碳5%
溫度(du):37℃
GM17940細胞,人骨骼肌成肌細胞 操作步驟:
1.用(yong)75%酒(jiu)精噴灑整個瓶(ping)消毒(du),將其(qi)平躺置于培養箱中進(jin)行2-3小(xiao)時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打(da)開瓶口,將其中的培養液(ye)去掉,再往(wang)其中加入5-6mL新鮮培(pei)養基并(bing)置(zhi)于(yu)細(xi)胞培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養,根據細(xi)胞生長狀(zhuang)況及培(pei)養基顏色變化對其進行換液以及傳代;
2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進(jin)行傳代,第一次傳代比(bi)例為1:2。
3傳(chuan)代步驟(zou):將0.25%含EDTA胰酶(mei)置于37°預熱,倒掉培養(yang)瓶(ping)中的培養(yang)基,往培養(yang)瓶(ping)中加(jia)入(ru)1mlPBS,輕晃洗滌后(hou)棄(qi)去。往瓶中加(jia)1ml預熱好(hao)的胰酶,置于(yu)37°孵育消化(hua)(第(di)一次消化(hua)需時(shi)常取出(chu)置于顯微(wei)鏡(jing)下觀察,以顯微(wei)鏡(jing)下細(xi)胞(bao)觸角回收(shou)變圓、輕拍(pai)瓶壁見細(xi)胞(bao)脫落為消化(hua)時(shi)間,記錄消化(hua)時(shi)間,以便于下次消化(hua)),消化(hua)好(hao)后加入(ru)1ml培養基終止消化(hua)。用移(yi)液槍輕輕吹打瓶(ping)壁上(shang)的細(xi)胞(bao),使之脫落,然后(hou)收集細(xi)胞(bao)懸液,1200rpm離心(xin)3min,棄上清,加(jia)入培養基(ji)重懸細胞,進行(xing)傳代。
注意事項:
1 收(shou)到細胞后首先觀察(cha)T-25瓶是否有損壞(huai)、漏(lou)液、渾濁等現象,若(ruo)有上述現象發生請及時(shi)和我(wo)們聯系(xi)。
2 瓶中運(yun)輸的培養液不能重(zhong)復使用,請換新鮮培養液培養
3 對于貼壁細(xi)(xi)(xi)胞(bao),若大(da)部(bu)分(fen)(fen)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)漂(piao)(piao)浮(fu),置于培養箱(xiang)隔夜(ye)觀(guan)察,大(da)部(bu)分(fen)(fen)漂(piao)(piao)浮(fu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)重新貼壁,表明細(xi)(xi)(xi)胞(bao)活力(li)正常(chang),繼續培養,剩余漂(piao)(piao)浮(fu)的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)可以去掉(diao);若大(da)部(bu)分(fen)(fen)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)仍然不貼壁,將漂(piao)(piao)浮(fu)的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)離心(xin)收集,用臺(tai)盼藍染色(se)鑒定細(xi)(xi)(xi)胞(bao)活力(li),并與本公司(si)銷(xiao)售人員及時聯系。
4 建議客戶收(shou)到(dao)細胞(bao)后不同倍鏡各拍幾張細胞(bao)的照片(pian),記錄細胞(bao)狀(zhuang)態,如細胞(bao)狀(zhuang)態出(chu)現問題(ti)請于72h內與(yu)本公(gong)司銷售聯(lian)系,以便于更好的幫您解決問題,超(chao)過時間我段,本公(gong)司則默(mo)認細胞(bao)狀(zhuang)態良好,不免費對后續細胞(bao)狀(zhuang)態問題進行售后。
5 因(yin)細胞(bao)產品的特(te)殊性,如(ru)客(ke)戶對本公(gong)司細胞(bao)質(zhi)量存有疑問,請于收到細胞(bao)后(hou)兩個月內與本公(gong)司銷售聯系,超過(guo)時(shi)間(jian)段,本公(gong)司則默認細胞(bao)質(zhi)量優良,不承擔因(yin)細胞(bao)產生(sheng)的任何(he)責任。
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