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TE353.sk細胞(bao),人(ren)正常皮膚(fu)細胞(bao)
組成部分:細(xi)胞 T25瓶 細胞數(shu)量1-3百萬級別(bie)+說(shuo)明書(shu)
組織來源:皮(pi)膚
形態特征:成纖(xian)維樣(yang)
生(sheng)長特性:貼壁生(sheng)長
培養條件:培養基:90% DMEM培養基+10% 特級胎牛血(xue)清(qing)
氣(qi)相:空(kong)氣(qi)95%,二氧化碳5%
溫度:37℃
TE353.sk細胞,人正常皮膚細胞 操(cao)作步(bu)驟:
1.用75%酒(jiu)精(jing)噴灑整個瓶消毒(du),將其平躺置于(yu)培(pei)養箱(xiang)中進行(xing)2-3小時的緩(huan)沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口(kou),將其中(zhong)的培(pei)養(yang)液去掉,再往其中(zhong)加入5-6mL新鮮(xian)培(pei)(pei)養基(ji)并(bing)置于細(xi)胞培(pei)(pei)養箱中培(pei)(pei)養,根據細(xi)胞生長(chang)狀況及(ji)培(pei)(pei)養基(ji)顏色變化對其進行換液以及(ji)傳代;
2.待細胞長滿(man)瓶底(di)面積80%-90%,需要對其進行傳(chuan)代,第一次傳(chuan)代比例為1:2。
3傳(chuan)代(dai)步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱,倒掉培養瓶中的(de)培養基(ji),往培養瓶中加入1mlPBS,輕晃(huang)洗滌(di)后(hou)棄去。往瓶中加(jia)1ml預(yu)熱好的胰酶,置于37°孵(fu)育消化(hua)(hua)(第一次消化(hua)(hua)需時(shi)常取出置于顯微鏡(jing)下觀察,以顯微鏡(jing)下細胞觸角(jiao)回收變圓、輕拍瓶(ping)壁見細胞脫落(luo)為消化(hua)(hua)時(shi)間,記錄消化(hua)(hua)時(shi)間,以便(bian)于下次消化(hua)(hua)),消化(hua)(hua)好后加入(ru)1ml培養(yang)基終止消化。用移液(ye)槍輕輕吹打(da)瓶(ping)壁上的細胞,使之(zhi)脫落,然后(hou)收集細胞懸液(ye),1200rpm離(li)心3min,棄(qi)上清,加入(ru)培養基重懸細(xi)胞(bao),進行傳代。
注意事項(xiang):
1 收到細胞后(hou)首先觀察T-25瓶是否有(you)損(sun)壞、漏液、渾濁等現象(xiang)(xiang),若有(you)上(shang)述(shu)現象(xiang)(xiang)發生(sheng)請(qing)及時和我們聯系。
2 瓶中(zhong)運輸的(de)培養液不能重復使用,請換新鮮培養液培養
3 對(dui)于(yu)(yu)貼(tie)壁細(xi)胞(bao)(bao),若(ruo)大(da)部分(fen)(fen)細(xi)胞(bao)(bao)漂(piao)浮,置于(yu)(yu)培養箱(xiang)隔夜觀察,大(da)部分(fen)(fen)漂(piao)浮細(xi)胞(bao)(bao)重(zhong)新(xin)貼(tie)壁,表(biao)明細(xi)胞(bao)(bao)活力正常,繼續培養,剩余漂(piao)浮的細(xi)胞(bao)(bao)可以(yi)去(qu)掉;若(ruo)大(da)部分(fen)(fen)細(xi)胞(bao)(bao)仍然(ran)不貼(tie)壁,將漂(piao)浮的細(xi)胞(bao)(bao)離心收集(ji),用臺盼(pan)藍染色鑒定(ding)細(xi)胞(bao)(bao)活力,并(bing)與本公(gong)司銷售人員及時聯系。
4 建(jian)議客戶收到細(xi)胞后不同倍(bei)鏡各拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞的照片,記錄細(xi)胞狀(zhuang)態,如(ru)細(xi)胞狀(zhuang)態出現問題請于72h內與本公司銷(xiao)售聯系(xi),以(yi)便于更好的幫(bang)您解(jie)決(jue)問題,超(chao)過時間我段,本公司則默(mo)認細胞狀態良好,不免費對(dui)后(hou)續細胞狀態問題進行售后(hou)。
5 因(yin)(yin)細胞(bao)(bao)產品的(de)(de)特殊性,如(ru)客戶對本公(gong)司細胞(bao)(bao)質(zhi)量(liang)存(cun)有(you)疑問,請于收到細胞(bao)(bao)后兩個月內與本公(gong)司銷(xiao)售聯系(xi),超(chao)過時(shi)間段(duan),本公(gong)司則默(mo)認細胞(bao)(bao)質(zhi)量(liang)優良,不承擔因(yin)(yin)細胞(bao)(bao)產生的(de)(de)任何責任。
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