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無外泌體血清|胎牛血清使用方法

發布時間:2024-05-10瀏(liu)覽:390次

無外泌(mi)體血(xue)清|胎牛血清(qing)使用方(fang)法
大多數細胞(bao)的生長所需(xu)的標準培養基,都(dou)需(xu)要添加胎(tai)牛血清(fetal bovine serum, FBS)作為其生長所需補充物(wu)。但(dan)是(shi),FBS 來(lai)源(yuan)于牛血清(qing),其中天然(ran)含有大量的(de)包(bao)括外泌體(ti)(exosome)在內的(de)外源(yuan)性細(xi)(xi)胞外囊泡(extracellular vesicles)。exosome 其內含有的(de)蛋白質與核(he)酸分(fen)子包(bao)括 mRNA、miRNA、rRNA 和(he) snoRNA 等(deng),exosome 所含成份(fen)與其細(xi)(xi)胞來(lai)源(yuan)密切相關,這(zhe)也決定了 exosome 的(de)功能特異(yi)性。但(dan)是(shi),FBS 相關的(de) RNA 會在分(fen)離細(xi)(xi)胞外膜泡 RNA(exRNA)時一同(tong)被分(fen)離出來(lai),這(zhe)會對(dui)下游 RNA 分(fen)析造成干擾。因此,實驗設計過程(cheng)中采取(qu)減少 FBS 源(yuan) RNA 干擾的(de)預防措施(shi)是(shi)非常必(bi)要的(de)。

無外泌體(ti)(ti)血清適(shi)用外泌體(ti)(ti)研究。
其(qi)實(shi)無外泌(mi)體(ti)血清的(de)使用方(fang)法和(he)常(chang)規血清的(de)使用方(fang)法一樣(yang),根(gen)據細胞的(de)難(nan)易程度加5%,10%或者20%的量。保存方法也和常規血(xue)清(qing)一(yi)樣,-20度儲存,融(rong)化(hua)的溫度是(shi)放在4°C冰箱慢慢融(rong)化(hua),化(hua)開之后可(ke)能會有(you)少許(xu)沉(chen)淀(dian),也是(shi)正常的物理(li)特性。特別是(shi)無外泌體(ti)血(xue)清(qing)是(shi)經(jing)過特殊處理(li)后的,沉(chen)淀(dian)有(you)可(ke)能比常規血(xue)清(qing)要多(duo)一(yi)些,不用害(hai)怕,正常使用就(jiu)可(ke)以。如沉(chen)淀(dian)過多(duo)可(ke)聯系技術(shu)部。

 

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