人肝(gan)細胞HL-7702[L-02]復蘇方法
慧穎生物熱賣細胞：

人(ren)源 人腎透明細(xi)(xi)胞(bao)(bao)腺(xian)癌(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)786-O 1×10?cells T25培(pei)養瓶 RPMI1640培養基(ji)；10%胎牛血清；1%雙抗 貼壁(bi)生(sheng)長(chang) 提供STR鑒(jian)定報告 37 常溫

人源 人肝細胞HL-7702[L-02] 1×10?cells T25培養瓶 RPMI1640培養基；10%胎牛(niu)血清；1%雙抗 貼壁生長 提(ti)供STR鑒(jian)定(ding)報告(gao) 37 常溫

人源 人胃癌細胞(bao)MKN-45 1×10?cells T25培(pei)養瓶 RPMI1640培養基(ji)；10%胎牛(niu)血清；1%雙抗 貼壁和少(shao)量懸浮(fu)生長 提供STR鑒定報告 37 常溫

人源(yuan) 人急(ji)性T淋巴細胞(bao)白血病細胞(bao)Jurkat 1×10?cells T25培養瓶 RPMI1640培(pei)養基；15%胎(tai)牛血(xue)清(qing)；1%雙(shuang)抗 懸浮生長 提供(gong)STR鑒(jian)定報告(gao) 37 常溫

人源 人(ren)前(qian)列(lie)腺癌細胞DU 145 1×10?cells T25培養瓶 MEM培(pei)養基；10%胎牛血清(qing)；1%雙抗 貼壁(bi)生長 提供STR鑒定報告(gao) 37 常(chang)溫

人源 人神經母細胞瘤細胞SK-N-SH 1×10?cells T25培養瓶 MEM培養基(ji)；10%胎牛血(xue)清；1%雙抗(kang) 貼壁生長(chang) 提供STR鑒定報告 37 常溫

人(ren)肝細(xi)胞HL-7702[L-02]復蘇方法

1、提前打開(kai)水裕鍋，加熱到37度(du)，從液氮 罐中(zhong)取(qu)出需要復蘇(su)的細胞；

2、放水(shui)裕鍋快速解凍(中途(tu)不要隨意拿(na)出凍(dong) 存管直到(dao)凍(dong)存管中的(de)液體全部融(rong)化)準備細 胞專用培養基和無(wu)菌離心管培養基需提前預 熱

3、用完(wan)培稀釋凍存管中的細(xi)胞(bao)懸液至離心 管中收(shou)集細(xi)胞(bao)至元南離心管，800-1100 rp/5min，取出離心管，管底(di)可見細胞沉淀(dian)

4、去除上清，用(yong)5ml完培重懸離心管中的 細胞液至T25瓶中(zhong)，十字搖晃均勻；放入培 養箱(xiang)，隔天觀察

傳(chuan)代
1、準(zhun)備所需耗材紫外消毒30分鐘(zhong)，觀察細胞密(mi)度 80%即可(ke)傳代； 2、去掉舊培養基，加入3mIPBS緩沖液輕(qing)輕(qing)潤洗后去 除，加(jia)入1ml胰酶(mei)，均勻覆蓋細胞(bao)表面(mian)(胰酶需(xu)提(ti)前(qian)預 熱)； 3、細胞消(xiao)化至變圓，輕拍瓶身滑落(luo).加入(ru)4ml完培(pei)終 止消化，收集消化下(xia)來(lai)的細胞至無(wu)菌離心(xin)管， 800-1100 rpm/5min 4、取出離心管(guan)，管(guan)底可(ke)見細胞沉淀，準備兩個T25瓶 ,各加(jia)入2.5ml培養基； 5、離心管內(nei)去上清，用5ml完培重(zhong)細(xi)胞懸液(ye)，分裝至 2個T25瓶，十字搖(yao)晃均勻放入培(pei)養箱(xiang)，隔天觀察；

特殊細(xi)胞收到(dao)注意事項(xiang)

部分細(xi)胞由(you)于貼(tie)壁(bi)不牢在運輸過程中發生細(xi)胞脫落，這是正常現象(xiang)正確處理后(hou)都可以正常生長。 1、將培養瓶(ping)內所有培養基(ji)轉入無菌離(li)心管，離(li)心收集細胞（1200rpm3-5min）去除舊培養基； 2、用(yong)PBS重(zhong)懸細胞，將(jiang)所有細胞收集到一個(ge)離心管中，再次(ci)離心（1200rpm3-5min）去除PBS； 3、加入1ml左右0.25%胰(yi)酶重懸(xuan)細胞(bao)，混勻即可，不能吹打太多次，放(fang)入培養箱(xiang)消(xiao)化，根據細胞(bao)特性決定消(xiao)化時間（約1~2分鐘） 4、消化好后，用移(yi)液槍輕輕吹打細(xi)胞懸液，使細(xi)胞團分散，迅速(su)加入3-5ml培(pei)養基混(hun)勻以終(zhong)止消(xiao)化(hua)，離心 （1200rpm3-5min） 去除胰酶； 5、加入5ml左(zuo)右的細胞相應的培養(yang)基混勻(yun)，按比例接入無(wu)菌培養(yang)瓶(ping)/皿(min)中(zhong)； 6、顯微(wei)鏡下觀察(cha)看細(xi)(xi)胞是否成(cheng)均勻分(fen)散的(de)單顆細(xi)(xi)胞，若有3-5個(ge)成(cheng)團(tuan)(tuan)的小細胞(bao)團(tuan)(tuan)可不用重新消化，使之貼壁后待細胞(bao)生長穩 定后再(zai)消散細胞(bao)。