人多(duo)形性惡性膠質瘤T98G傳(chuan)代方法
慧穎生物熱賣細胞：

人(ren)多發性骨髓瘤細(xi)胞RPMI-8226 1×10?cells T25培養(yang)瓶(ping) RPMI1640培(pei)養基；10%胎牛(niu)血清(qing)；1%雙抗 懸浮(fu)生長(chang) 提(ti)供(gong)STR鑒定(ding)報告

人(ren)結直(zhi)腸腺(xian)癌(ai)細胞(bao)LS174T 1×10?cells T25培養瓶 MEM培養(yang)基；10%胎牛血清；1%雙(shuang)抗(kang) 貼壁生長 提(ti)供STR鑒定報告

人多形性惡(e)性膠質瘤T98G 1×10?cells T25培養(yang)瓶 MEM培養(yang)基；10%胎牛血(xue)清；1%雙抗 貼壁生長(chang) 提供STR鑒定報告

人膽(dan)管(guan)癌細(xi)胞HuCCT1 1×10?cells T25培養瓶(ping) RPMI1640培養基；10%胎牛血清(qing)；1%雙抗 貼壁(bi)生長 提供STR鑒(jian)定(ding)報告

人子宮內(nei)膜癌細(xi)胞Ishikawa 1×10?cells T25培養瓶 DMEM培養基；10%胎(tai)牛血清；1%雙抗 貼壁生長 提供STR鑒定報告

人(ren)葡萄膜(mo)黑色(se)素瘤(liu)92-1 1×10?cells T25培養瓶 RPMI1640培養基；10%胎(tai)牛血清；1%雙抗 貼壁生長 提(ti)供STR鑒定報告

人(ren)結腸癌細胞HCT-116 1×10?cells T25培養瓶 McCoy’s 5A培養(yang)基；10%胎牛(niu)血清；1%雙抗 貼壁生長 提(ti)供(gong)STR鑒定報(bao)告

人非小細(xi)(xi)胞肺(fei)癌細(xi)(xi)胞NCI-H3122 1×10?cells T25培養瓶 RPMI1640培養基；10%胎牛血清；1%雙抗 貼壁生長(chang) 提供(gong)STR鑒定報告

人(ren)胰腺(xian)癌細胞HPAC 1×10?cells T25培(pei)養瓶(ping) DMEM培養基(ji)；10%胎牛血清(qing)；1%雙抗 貼壁(bi)生長 提供STR鑒(jian)定報告

人(ren)肝癌細胞SNU-398 1×10?cells T25培(pei)養瓶 RPMI1640培養基；10%胎(tai)牛(niu)血清；1%雙(shuang)抗 貼壁，懸浮混合(he)生長 提供STR鑒定報告

人多形性惡性膠質瘤T98G傳代方(fang)法

1、提前打(da)開水裕鍋(guo)，加熱(re)到37度，從液氮 罐(guan)中(zhong)取(qu)出需要復蘇的(de)細(xi)胞；

2、放水裕鍋快速解凍(中途不要隨意(yi)拿(na)出凍 存管直到凍存管中的(de)液(ye)體(ti)全部(bu)融化)準備細 胞專用培養基和無(wu)菌離心(xin)管培養基需提前(qian)預(yu) 熱

3、用完培稀釋凍存管(guan)中(zhong)的細胞(bao)懸液(ye)至離心 管(guan)中(zhong)收集細胞(bao)至元南離心管(guan)，800-1100 rp/5min，取出離心(xin)管，管底可見細胞(bao)沉淀

4、去除上清，用5ml完培重懸(xuan)離心(xin)管中(zhong)的(de) 細胞液至T25瓶中，十(shi)字搖(yao)晃均勻；放入培 養箱，隔天(tian)觀察

傳代(dai)
1、準備(bei)所需耗(hao)材(cai)紫(zi)外消毒30分(fen)鐘，觀察細胞密度 80%即可(ke)傳代； 2、去(qu)掉舊培養基，加入3mIPBS緩沖液輕輕潤洗后去 除，加入1ml胰(yi)酶，均勻覆蓋細胞表面(胰酶需提前預 熱)； 3、細胞消(xiao)化(hua)至(zhi)變圓，輕拍瓶(ping)身(shen)滑落.加入4ml完培終 止(zhi)消化，收(shou)集消化下(xia)來的(de)細胞至無菌離心管， 800-1100 rpm/5min 4、取出(chu)離心(xin)管，管底可見細(xi)胞沉淀(dian)，準備兩個T25瓶 ,各加入2.5ml培養基； 5、離(li)心管(guan)內去上清，用5ml完培重細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，分(fen)裝至 2個T25瓶，十(shi)字搖晃均(jun)勻放(fang)入(ru)培養箱，隔天觀(guan)察(cha)；

特殊細胞收到注意(yi)事項

部分細(xi)胞由于貼壁不牢在運(yun)輸(shu)過程中發生細(xi)胞脫(tuo)落，這是正(zheng)(zheng)常(chang)現象正(zheng)(zheng)確處理后都可以正(zheng)(zheng)常(chang)生長。 1、將培(pei)養(yang)瓶內(nei)所有培(pei)養(yang)基轉入無菌離心(xin)管，離心(xin)收集細胞（1200rpm3-5min）去(qu)除舊培養(yang)基(ji)； 2、用PBS重懸細胞，將所有(you)細胞收集到(dao)一個(ge)離心(xin)管中，再次離心(xin)（1200rpm3-5min）去(qu)除PBS； 3、加入1ml左右0.25%胰酶重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，混(hun)勻(yun)即可，不(bu)能(neng)吹打太多次，放(fang)入培養箱消化，根(gen)據細(xi)胞(bao)特(te)性決定消化時間（約1~2分鐘） 4、消化(hua)好后，用移(yi)液槍輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，使細(xi)胞(bao)團分散，迅速加入3-5ml培養基混(hun)勻以(yi)終(zhong)止消(xiao)化(hua)，離心(xin) （1200rpm3-5min） 去(qu)除胰酶(mei)； 5、加入5ml左(zuo)右(you)的細胞(bao)相應的培(pei)養基(ji)混勻，按比例接(jie)入無菌培(pei)養瓶/皿中； 6、顯微鏡下觀察(cha)看細(xi)胞是否成(cheng)均勻分散的單顆細(xi)胞，若有3-5個成團的小細胞(bao)(bao)團可不用重新消化，使之貼壁后待細胞(bao)(bao)生長穩(wen) 定后再消散細胞(bao)(bao)。