人結腸(chang)癌細胞HCT-116傳代方法
慧穎生物熱(re)賣細胞：

人多(duo)發性(xing)骨髓瘤細(xi)胞RPMI-8226 1×10?cells T25培養瓶 RPMI1640培養基；10%胎牛(niu)血(xue)清；1%雙(shuang)抗 懸浮生長 提供STR鑒定(ding)報(bao)告(gao)

人(ren)結直腸腺癌細胞LS174T 1×10?cells T25培養瓶 MEM培(pei)養基；10%胎牛血清；1%雙(shuang)抗(kang) 貼壁(bi)生長 提供STR鑒定報告

人多形性惡性膠質瘤T98G 1×10?cells T25培養瓶(ping) MEM培養基；10%胎牛(niu)血清；1%雙抗 貼壁生(sheng)長(chang) 提供STR鑒定報告

人膽管癌細胞(bao)HuCCT1 1×10?cells T25培養瓶 RPMI1640培養基；10%胎牛血(xue)清；1%雙抗 貼壁生長 提供STR鑒定報告

人子宮內膜癌細胞Ishikawa 1×10?cells T25培養瓶 DMEM培養基；10%胎牛(niu)血清；1%雙抗 貼壁生長(chang) 提供(gong)STR鑒定(ding)報告

人(ren)葡萄膜黑(hei)色素瘤(liu)92-1 1×10?cells T25培養瓶 RPMI1640培養基；10%胎牛血清(qing)；1%雙抗 貼(tie)壁生長 提供STR鑒定報告

人結腸(chang)癌細胞HCT-116 1×10?cells T25培養瓶 McCoy’s 5A培養基；10%胎牛(niu)血清；1%雙抗 貼壁生長 提(ti)供STR鑒定報告

人(ren)非小細(xi)胞(bao)肺(fei)癌細(xi)胞(bao)NCI-H3122 1×10?cells T25培養瓶 RPMI1640培養基；10%胎(tai)牛血清；1%雙抗 貼壁生(sheng)長 提供STR鑒定報告(gao)

人(ren)胰(yi)腺癌細胞HPAC 1×10?cells T25培養瓶 DMEM培養基；10%胎牛(niu)血清；1%雙抗 貼壁生長 提供(gong)STR鑒定(ding)報告(gao)

人肝癌(ai)細胞SNU-398 1×10?cells T25培養瓶 RPMI1640培養基；10%胎牛血清；1%雙抗 貼壁，懸浮混合生長 提供STR鑒定報告

人結腸癌(ai)細胞HCT-116傳(chuan)代(dai)方法

1、提前打開(kai)水裕鍋，加熱到37度(du)，從液氮(dan) 罐(guan)中(zhong)取(qu)出需要復蘇的細胞；

2、放(fang)水裕鍋(guo)快速(su)解凍(中途不要隨意拿出凍(dong)(dong) 存管直到凍(dong)(dong)存管中的液(ye)體(ti)全部融化)準備(bei)細 胞專用培養基(ji)和無(wu)菌(jun)離心管(guan)培養基(ji)需提前預 熱

3、用完(wan)培稀釋凍存管(guan)中的細胞懸液至離心 管(guan)中收集細胞至元南離心管(guan)，800-1100 rp/5min，取出離心管，管底可見(jian)細胞沉淀

4、去除上清，用5ml完培重懸離(li)心管中的 細胞液至T25瓶(ping)中，十(shi)字搖晃均勻(yun)；放(fang)入(ru)培 養箱，隔天觀察

傳代
1、準備所(suo)需(xu)耗材紫外消毒30分鐘(zhong)，觀察細胞(bao)密度 80%即可傳代； 2、去掉舊培養基(ji)，加入3mIPBS緩沖液輕輕潤洗后去 除，加入1ml胰酶(mei)，均勻覆蓋細胞表面(mian)(胰酶(mei)需(xu)提前預 熱)； 3、細胞消化至變圓，輕拍瓶身滑落(luo).加入4ml完培終 止消化(hua)(hua)，收集消化(hua)(hua)下(xia)來的(de)細胞至無菌離(li)心管， 800-1100 rpm/5min 4、取出離(li)心管(guan)，管(guan)底可(ke)見細胞沉(chen)淀，準備兩個(ge)T25瓶 ,各加(jia)入2.5ml培養基； 5、離心管(guan)內去(qu)上(shang)清，用5ml完(wan)培重細胞懸液，分裝至 2個T25瓶，十字搖晃均勻放(fang)入培養箱，隔天觀(guan)察；

特殊(shu)細胞收到注意事項

部分細胞由于貼壁不牢(lao)在運輸過程中發生細胞脫落，這是正(zheng)(zheng)常(chang)現象(xiang)正(zheng)(zheng)確處(chu)理(li)后都(dou)可以正(zheng)(zheng)常(chang)生長。 1、將培養瓶內所有培養基轉入(ru)無菌離(li)心(xin)管，離(li)心(xin)收集細胞（1200rpm3-5min）去除(chu)舊培養基； 2、用PBS重懸細胞(bao)，將所有(you)細胞(bao)收(shou)集到(dao)一(yi)個離(li)心(xin)管中，再(zai)次離(li)心(xin)（1200rpm3-5min）去除PBS； 3、加入1ml左右0.25%胰酶(mei)重懸細(xi)胞(bao)，混勻即可，不能(neng)吹打太多次，放入培(pei)養箱消(xiao)化(hua)，根據(ju)細(xi)胞(bao)特性決定消(xiao)化(hua)時間(jian)（約(yue)1~2分(fen)鐘） 4、消化好(hao)后，用移液(ye)(ye)槍(qiang)輕輕吹(chui)打細(xi)胞懸液(ye)(ye)，使細(xi)胞團分散，迅(xun)速(su)加入3-5ml培(pei)養基混(hun)勻以終(zhong)止消化，離(li)心 （1200rpm3-5min） 去除胰酶； 5、加(jia)入5ml左右的(de)細(xi)胞相(xiang)應的(de)培養基混勻，按比例接入(ru)無菌(jun)培養瓶/皿中； 6、顯微鏡(jing)下觀(guan)察看(kan)細胞是(shi)否(fou)成均勻分散(san)的單顆細胞，若有3-5個成團(tuan)的小細(xi)胞團(tuan)可(ke)不用重新(xin)消(xiao)化，使(shi)之(zhi)貼壁(bi)后待細(xi)胞生長(chang)穩(wen) 定后再消(xiao)散細(xi)胞。