細胞名稱：HeLa 人宮頸癌細胞

別名(ming)：HeLa細(xi)胞，人宮頸癌細胞系

種(zhong)屬：人(ren)

組織來源：宮(gong)頸腺(xian)癌

細胞形(xing)態：上(shang)皮(pi)細胞樣

培養(yang)條件：

培(pei)養(yang)基類型：D-MEM 培(pei)養(yang)基

FBS: 10%

抗(kang)生(sheng)素：雙抗(kang)

培養條件：37℃，CO2: 5%

傳代方法：

收(shou)到細胞后(hou)，在倒置顯微鏡下觀察(cha)細胞生長(chang)狀態：

如果沒長(chang)滿，將培養(yang)瓶用75%酒(jiu)精消毒后在超凈臺(tai)內更換新(xin)鮮培養(yang)液，繼續(xu)培養(yang)。

如果細胞已經(jing)長(chang)滿（約80%-90%）則傳代后繼續培(pei)養(yang)。

貼壁細胞傳(chuan)代方法：

1 棄去培養基(ji)，用不含鈣、鎂離子(zi)的PBS 洗1-2 次。

2 加1ml 0.25%的胰(yi)酶（含0.02%EDTA），讓胰(yi)酶與大(da)部分細(xi)胞接觸后放入37℃培(pei)養箱內，隨時(shi)觀察細(xi)胞狀(zhuang)態變化，待細(xi)胞大(da)部分變圓后加*培(pei)養基終止消化。

懸浮(fu)細胞傳(chuan)代方法(fa)：可以直接傳(chuan)代也可以離心法(fa)傳(chuan)代。

1 直(zhi)接傳代是(shi)讓懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)(bao)慢慢沉(chen)淀(dian)在瓶(ping)底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)(bao)形成細(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液后，分別接種(zhong)到其他(ta)培養皿或培養瓶(ping)中繼續培養。

2 離心法傳代(dai)是(shi)將細胞連同(tong)培(pei)養液一并轉移到離心管內，1000rpm，

5 分鐘(zhong)，去除上清(qing)，加新的培養(yang)液到離心管(guan)內，吹(chui)打(da)細胞形成細胞懸液后，分別(bie)接種到其他培養(yang)皿(min)或培養(yang)瓶中繼(ji)續培養(yang)。

一(yi)般沒有特殊(shu)說明，細胞一(yi)般是一(yi)傳二。

凍存(cun)方法：

70% *培(pei)養基，20%FBS，10%DMSO，現用現配。

儲存：液氮中長(chang)期保存。

注：

1 觀察(cha)細胞在低(di)倍鏡下觀察(cha)，便于(yu)整體估計(ji)細胞密度。

2 在運輸過程(cheng)中(zhong)可能會導致一(yi)些貼(tie)壁不牢的細胞(bao)發生部分脫落(luo)，可

離心吹(chui)打后(hou)重新種(zhong)入(ru)瓶中培(pei)養。

3 收到(dao)細(xi)胞(bao)后若發現培養瓶(ping)破損、細(xi)胞(bao)污染(ran)等，請(qing)在(zai)一周內與我(wo)們

。

來源：慧穎(ying)細胞實(shi)驗室

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：王