有經驗和剛剛從事細胞培養工作的人員都應該認真仔細地詢問下細胞提供方提供的建議，提前了解所要培養細胞的詳細資料，準備好細胞所要用到的培養基和相關試劑，雖然所有的貼壁，半貼壁或者懸浮細胞處理方式差不多，但是不同的實驗室培養條件和處理力度還有試劑的批間差這些問題存在，也會導致對細胞處理不當，或者環境的不適應而造成細胞的死亡。

　　1.收到細(xi)胞(bao)，*時(shi)(shi)間要鏡檢：觀(guan)察細(xi)胞(bao)形態(tai)是(shi)否(fou)正(zheng)常(chang)，對于貼(tie)(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)則要注意看(kan)貼(tie)(tie)壁(bi)情(qing)況是(shi)否(fou)很好，觀(guan)察細(xi)胞(bao)密度，有疑(yi)議及(ji)時(shi)(shi)咨提供細(xi)胞(bao)的(de)技術人員。由于運輸的(de)時(shi)(shi)間或者溫度的(de)變化，很多(duo)貼(tie)(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)在(zai)盛滿培養(yang)基的(de)瓶(ping)子里生長(chang)的(de)狀態(tai)和平時(shi)(shi)會(hui)有點(dian)不一(yi)樣，主要是(shi)貼(tie)(tie)壁(bi)牢固問題。比(bi)如(ru)293T，平時(shi)(shi)貼(tie)(tie)壁(bi)就(jiu)不是(shi)很牢，在(zai)裝滿的(de)培養(yang)基瓶(ping)子里面，會(hui)發生大片的(de)脫落，細(xi)胞(bao)聚集在(zai)一(yi)起，但是(shi)細(xi)胞(bao)生長(chang)還是(shi)正(zheng)常(chang)的(de)，通過(guo)離心收集，加以(yi)胰酶(mei)的(de)消化，重新打散，又可(ke)以(yi)正(zheng)常(chang)的(de)貼(tie)(tie)壁(bi)生長(chang)。

　　2.當(dang)通(tong)過(guo)上一(yi)步(bu)的觀(guan)察，細胞(bao)初(chu)步(bu)沒有任何問題(ti)時(shi)，進行下(xia)一(yi)步(bu)操作。當(dang)收到(dao)的細胞(bao)密達到(dao)80%左右時(shi)，則處理如下(xia)：棄(qi)除瓶中大(da)部分培養(yang)基，僅保(bao)留5到(dao)10mL培養(yang)所需的常(chang)規培養(yang)基;或更換新鮮的培養(yang)基，置于培養(yang)箱中，隨后每天觀(guan)察。細胞(bao)在(zai)低于正常(chang)生長(chang)(chang)溫度(du)情況下(xia)，會(hui)調(diao)整(zheng)為靜止期，或者慢速生長(chang)(chang)期，必須(xu)恢復37度(du)的環(huan)境至少3個小(xiao)時(shi)左右，才能重新調(diao)整(zheng)到(dao)接近(jin)對(dui)數生長(chang)(chang)期的狀態，在(zai)對(dui)數生長(chang)(chang)期進行細胞(bao)的傳代會(hui)大(da)大(da)增(zeng)加傳代的成功(gong)率，和細胞(bao)的存活率。

　　3.如果經*步觀察發(fa)現細胞(bao)(bao)(bao)密度超過90%，并且細胞(bao)(bao)(bao)狀態(tai)很(hen)好時，則復溫后2個小時需要立(li)即傳代。傳代的(de)比例應依(yi)據不同的(de)細胞(bao)(bao)(bao)而定。對(dui)于(yu)生長比較(jiao)快(kuai)，狀態(tai)穩定，不易受外界影響的(de)細胞(bao)(bao)(bao)可以(yi)一次(ci)多(duo)傳幾瓶;對(dui)于(yu)生長較(jiao)慢，細胞(bao)(bao)(bao)比較(jiao)薄，狀態(tai)容易波動的(de)細胞(bao)(bao)(bao)類型，一次(ci)少傳些，保證(zheng)每(mei)瓶細胞(bao)(bao)(bao)密度大(da)些，便于(yu)穩定生長。至于(yu)一些比較(jiao)陌(mo)生的(de)細胞(bao)(bao)(bao)，*次(ci)處理也可以(yi)依(yi)照(zhao)第二(er)種情況。