的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證Elisa檢測結果準確可靠的必要條件。的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式Elisa各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球Elisa，國外試劑均與特殊儀器配合應用，兩者均有詳細的使用說明，嚴格遵照規定操作，必能得出準確的結果。

標(biao)本的(de)采取和(he)保存

可(ke)(ke)(ke)用(yong)作(zuo)Elisa測定的標(biao)本(ben)(ben)(ben)十分(fen)(fen)廣泛，體液(ye)（如血(xue)(xue)清(qing)(qing)）、分(fen)(fen)泌物（唾液(ye)）和排泄物（如尿(niao)液(ye)、糞(fen)便(bian)）等均(jun)可(ke)(ke)(ke)作(zuo)標(biao)本(ben)(ben)(ben)以(yi)測定其中(zhong)(zhong)(zhong)某種抗體或抗原(yuan)成份。有些(xie)標(biao)本(ben)(ben)(ben)可(ke)(ke)(ke)直(zhi)接進行測定（如血(xue)(xue)清(qing)(qing)、尿(niao)液(ye)），有些(xie)則需(xu)經預處(chu)理(li)（如糞(fen)便(bian)和某些(xie)分(fen)(fen)泌物）。大部(bu)分(fen)(fen)Elisa檢測均(jun)以(yi)血(xue)(xue)清(qing)(qing)為標(biao)本(ben)(ben)(ben)。血(xue)(xue)漿中(zhong)(zhong)(zhong)除(chu)尚(shang)含有纖維(wei)蛋白(bai)原(yuan)和抗凝(ning)劑外(wai)，其他成份均(jun)同等于(yu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)。制備血(xue)(xue)漿標(biao)本(ben)(ben)(ben)需(xu)借助于(yu)抗凝(ning)劑，而血(xue)(xue)清(qing)(qing)標(biao)本(ben)(ben)(ben)只要待血(xue)(xue)清(qing)(qing)自然凝(ning)固、血(xue)(xue)塊收縮后(hou)即可(ke)(ke)(ke)取(qu)得。除(chu)特殊情況(kuang)外(wai)，在醫學檢驗中(zhong)(zhong)(zhong)均(jun)以(yi)血(xue)(xue)清(qing)(qing)作(zuo)為檢測標(biao)本(ben)(ben)(ben)。在Elisa中(zhong)(zhong)(zhong)血(xue)(xue)漿和血(xue)(xue)清(qing)(qing)可(ke)(ke)(ke)同等應(ying)用(yong)。血(xue)(xue)清(qing)(qing)標(biao)本(ben)(ben)(ben)可(ke)(ke)(ke)按常規(gui)方法(fa)采集，應(ying)注意避免(mian)溶(rong)(rong)血(xue)(xue)，紅細胞溶(rong)(rong)解時(shi)會(hui)釋放出具(ju)有過氧化物酶活(huo)性的物質，以(yi)HRP為標(biao)記的Elisa測定中(zhong)(zhong)(zhong)，溶(rong)(rong)血(xue)(xue)標(biao)本(ben)(ben)(ben)可(ke)(ke)(ke)能會(hui)增(zeng)加非特異性顯(xian)色。

血(xue)(xue)清(qing)標本(ben)宜在(zai)(zai)新鮮(xian)時(shi)檢測(ce)。如有(you)細菌污染，菌體中(zhong)(zhong)可(ke)能含有(you)內(nei)(nei)源性HRP，也(ye)會產生(sheng)(sheng)假陽性反應(ying)。如在(zai)(zai)冰(bing)箱中(zhong)(zhong)保(bao)存(cun)過(guo)久，其中(zhong)(zhong)的(de)可(ke)發生(sheng)(sheng)聚合，在(zai)(zai)間接法Elisa中(zhong)(zhong)可(ke)使(shi)本(ben)底加深。一般(ban)說來，在(zai)(zai)5天(tian)內(nei)(nei)測(ce)定(ding)的(de)血(xue)(xue)清(qing)標本(ben)可(ke)放置于4℃，超(chao)過(guo)一周測(ce)定(ding)的(de)需(xu)(xu)低溫冰(bing)存(cun)。凍結血(xue)(xue)清(qing)融解后，蛋白質局部濃縮，分(fen)布不均，應(ying)充分(fen)混勻宜輕(qing)緩，避(bi)免氣(qi)泡，可(ke)上下顛(dian)倒混和，不要(yao)在(zai)(zai)混勻器上強烈振(zhen)蕩。混濁或有(you)沉淀的(de)血(xue)(xue)清(qing)標本(ben)應(ying)先(xian)離(li)心或過(guo)濾，澄清(qing)后再檢測(ce)。反復凍融會使(shi)抗(kang)體效價跌落，所以測(ce)抗(kang)體的(de)血(xue)(xue)清(qing)標本(ben)如需(xu)(xu)保(bao)存(cun)作(zuo)多次(ci)檢測(ce)，宜少量(liang)分(fen)裝(zhuang)冰(bing)存(cun)。保(bao)存(cun)血(xue)(xue)清(qing)自(zi)采集時(shi)就(jiu)應(ying)注意無菌操作(zuo)，也(ye)可(ke)加入(ru)適(shi)當防腐劑。