葡(pu)聚(ju)糖凝膠(jiao)使(shi)用說(shuo)明   

化學(xue)和物理性質(zhi)    葡聚糖凝膠(jiao)是一種(zhong)珠狀的凝膠(jiao)，含有大(da)量的羥基，很容易在水中(zhong)和電解質溶液中(zhong)溶脹。G型的(de)葡聚糖(tang)凝(ning)膠有各種不(bu)同的(de)交聯度(du)，因此它們的(de)溶脹度(du)和分級(ji)分離范圍也有所(suo)不(bu)同。葡聚糖(tang)凝(ning)膠的(de)溶脹度(du)基本(ben)上不(bu)因鹽和洗滌劑的(de)存在而受(shou)影響(xiang)。   

葡(pu)聚糖凝膠有不(bu)同(tong)的粒度。    超細(xi)級(ji)(ji)的(de)葡聚糖(tang)凝膠是(shi)用于需(xu)要*分(fen)辨率的(de)柱色(se)譜(pu)(pu)和薄層色(se)譜(pu)(pu)。粗級(ji)(ji)和中級(ji)(ji)的(de)凝膠用于制(zhi)備性色(se)譜(pu)(pu)過(guo)程(cheng)，可在(zai)較低的(de)壓力下獲得較高的(de)流速(su)。另外，粗級(ji)(ji)也可用于批量工藝。   

化學(xue)穩(wen)定性(xing)    葡聚糖凝(ning)膠(jiao)(jiao)不溶(rong)(rong)于一切溶(rong)(rong)劑（除非它被化學降解）。它在(zai)水(shui)、鹽溶(rong)(rong)液、有機溶(rong)(rong)劑、堿和弱酸性(xing)溶(rong)(rong)液中(zhong)(zhong)都是(shi)穩定的，在(zai)強酸中(zhong)(zhong)凝(ning)膠(jiao)(jiao)骨(gu)架的糖苷鍵被水(shui)解。長期接觸(chu)氧化劑將破壞凝(ning)膠(jiao)(jiao)，因而應避免(mian)使用。  

 物理穩定(ding)性    葡聚糖凝膠并不熔融，可以在濕態、中性PH進行滅菌(jun)或在(zai)高壓(ya)滅菌(jun)器120℃、30分鐘(zhong)而(er)不(bu)影響它的色譜性質(zhi)。干態的凝膠(jiao)加熱至120℃以上將開始(shi)焦糖化。葡(pu)聚糖凝膠的機械(xie)強度取決于交(jiao)聯度。   

產品說明：

使用(yong)方法(fa)：   

1. 乙醇浸泡(pao)：    在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙(yi)醇中至(zhi)少24小(xiao)時，并不斷攪拌以保證凝膠(jiao)溶脹，用無鹽水(shui)洗去殘存的(de)乙醇(chun)濾干;   

2. 無(wu)鹽水浸泡：    室溫下，在無鹽水中充(chong)分溶(rong)脹24小(xiao)時，間隙攪拌，以保證凝膠的(de)*溶(rong)脹，然后；   

3. 鹽酸浸泡：   在常(chang)溫下再用(yong)0.2N HCl浸泡12小時，間隙攪拌(ban)，濾(lv)干，水洗(xi)只(zhi)中性；   

4. 將(jiang)溶脹好的凝膠(jiao)脫(tuo)氣后（真空(kong)抽濾或(huo)超聲波）根據裝(zhuang)柱(zhu)要求一(yi)次(ci)性(xing)置入柱(zhu)內，注意保持濕態裝(zhuang)柱(zhu)，并避免柱(zhu)內產生氣泡(pao)或(huo)斷層；   

5. 上樣(yang)前(qian)平衡層(ceng)析柱(zhu)至(zhi)少3-5個柱(zhu)體積直到記錄儀(yi)基線變得平穩為(wei)止（流出液(ye)的(de)PH值(zhi)等于上柱(zhu)的Buffer的PH值）；   

6. 凝膠過(guo)濾的上樣量一(yi)般為5%的柱床體積(ji)，我們建議初次上樣(yang)控制在(zai)1-2%的床體積，視分(fen)離情(qing)況可(ke)(ke)以(yi)調整；脫鹽時上樣(yang)量可(ke)(ke)以(yi)達到(dao)20%的柱(zhu)床體積(ji)，柱(zhu)高的選擇也與(yu)分離要求(qiu)相關，柱(zhu)高控(kong)制在(zai)40-50cm 以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應(ying)當盡可能避免(mian)。難分(fen)離(li)物質(zhi)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比為5：1即可；   

7. 洗脫方法：    可以用(yong)無(wu)鹽(yan)水(shui)，也可以采用(yong)上(shang)柱時(shi)的(de)緩沖液洗脫；在(zai)上(shang)柱Buffer中加入NaCl等梯度(du)洗脫或鹽梯度(du)洗脫也可以*分離純化；   

8. 在位清洗（CIP）    凝膠使用(yong)十次后作(zuo)一(yi)次CIP，目的是去除柱(zhu)床內沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反(fan)向洗四(si)個柱體積(ji)，再以至少三(san)個柱體積(ji)平衡緩沖液再生。    備注: 其它規格葡聚糖凝膠處(chu)理方法類似。

PS： G-75可以重復(fu)使用，一般幾(ji)十(shi)次都沒問題的。保質(zhi)期2年(nian)。    

未使用，室溫(wen)保存即可。

使(shi)用(yong)(yong)后保存方法如下(xia)(xia)：凝(ning)膠(jiao)層(ceng)析的(de)載體(ti)不會與被分離的(de)物質(zhi)發生(sheng)任何作用(yong)(yong)，因此(ci)(ci)凝(ning)膠(jiao)柱(zhu)在層(ceng)析分離后稍加(jia)平衡(heng)即可進行下(xia)(xia)一次的(de)分離操作。但使(shi)用(yong)(yong)多次后，由于床(chuang)體(ti)積變(bian)小，流動速率(lv)降低或雜質(zhi)污染等原因，使(shi)分離效果受到影響。此(ci)(ci)時對(dui)凝(ning)膠(jiao)柱(zhu)需進行再生(sheng)處理，其方法是:先(xian)用水反復進行逆向沖(chong)洗，再用緩(huan)沖(chong)溶液平衡，即可進行下一次分離。     

對(dui)使用過的(de)凝膠，若短(duan)時間保(bao)存，只要(yao)反復(fu)洗(xi)滌除(chu)去(qu)蛋白(bai)質(zhi)(zhi)等雜質(zhi)(zhi)，加入適量防腐劑即可(ke)；若長期保(bao)存，則需(xu)將凝膠從(cong)柱中(zhong)取(qu)出，進行洗(xi)滌、脫(tuo)水和干燥等處理后，裝瓶保(bao)存。