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CFSC-2G鼠(shu)肝(gan)星形(xing)細(xi)胞, 進(jin)口胎(tai)牛(niu)血清慧穎生物一站式采購商(shang)城,細胞株細胞系,耐藥株,STR鑒定(ding),各品牌進口胎牛血清,培(pei)養基,胰酶,雙抗,*培(pei)養基,PBS緩沖(chong)液,DMSO,細胞生長因子等,種類齊全,*!
細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養技術(shu)屬(shu)于(yu)細(xi)(xi)胞(bao)工程(cheng)(cheng)范疇,細(xi)(xi)胞(bao)工程(cheng)(cheng)包括細(xi)(xi)胞(bao)融合技術(shu)、單(dan)克隆抗體的(de)制(zhi)備(bei)、核移植技術(shu)(克隆)等,而這(zhe)些技術(shu)中都有細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養過(guo)程(cheng)(cheng),所以說細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養是生物學(xue)研究的(de)zui基本技術(shu)之一。
上海慧穎生物供(gong)應CFSC-2G鼠肝星形細胞(bao), 進口胎牛血(xue)清,活性好(hao)、存活率(lv)高。隨著(zhu)細胞生物(wu)學(xue)尤其是干細胞研究的快速(su)發展,在細胞治療領域已(yi)經(jing)(jing)(jing)進行了大量的探索(suo),取得了一系列的令(ling)人振奮的成果(guo),且部分基礎(chu)研究成果(guo)已(yi)經(jing)(jing)(jing)在心血管系統疾病 、神經(jing)(jing)(jing)系統疾病、肌肉骨骼相(xiang)關疾病、糖尿病等。
養(yang)細胞(bao)經驗分享:
1.細胞(bao)(bao)(bao)形態觀察。細胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)是每天必須觀察的(de),看是否清晰,細胞(bao)(bao)(bao)的(de)死亡往往是從細胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)的(de)破(po)裂開始的(de),早期的(de)表現(xian)就是細胞(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)某一點(dian)出現(xian)欠(qian)完(wan)整(zheng)或者毛發影。
2.細胞往往會有(you)“抱(bao)團(tuan)(tuan)”現象,抱(bao)團(tuan)(tuan)生(sheng)長(chang)或(huo)死亡,個(ge)人認為(wei)應該勤換液(ye)或(huo)傳代,盡量避 免細胞抱(bao)團(tuan)(tuan)。
3.細胞生(sheng)長迅速(su),強烈建議(yi)用較大(da)的培養(yang)瓶養(yang),用小(xiao)瓶養(yang)的話,換液不及(ji)時,很容易(yi)死 亡。細胞的生(sheng)長速(su)度(du)一(yi)般(ban)為2天左右就需要(yao)傳代,并且一(yi)般(ban)為一(yi)傳三,或一(yi)傳四。
4.培養液(ye):1640|DMEM|MEM|IMDM|a-MEM培養液(ye),1L一般加(jia)碳酸氫鈉2g,并(bing)加(jia)雙抗,胎牛(niu)(niu)血清濃(nong)度*為12%,zui低(di)(di)不(bu)低(di)(di)于10%,有(you)些細(xi)胞(bao)對(dui)胎牛(niu)(niu)血清高度依賴(lai),比如WRO細(xi)胞(bao),HT-22細(xi)胞(bao),HA-VSMC細(xi)胞,NK-92細(xi)胞等。培養液PH應調為7.20-7.40之(zhi)間。
5.防污染。L-02細胞生長迅速,較少(shao)發生污染,但(dan)常規措施(shi)應該做好。比如(ru)無菌操作,酒精(jing) 消(xiao)毒(du)等,培養瓶口(kou)建議過火,包括瓶蓋(gai),應過火4秒左右。
6.凍存(cun)(cun)(cun)。-20一小時,-80次夜,液(ye)氮長(chang)(chang)期保(bao)(bao)存(cun)(cun)(cun)。強(qiang)烈建議液(ye)氮長(chang)(chang)期保(bao)(bao)存(cun)(cun)(cun),盡(jin)量不要(yao)在-80長(chang)(chang)期 保(bao)(bao)存(cun)(cun)(cun),死亡(wang)率很高。
7.復蘇。調節水浴箱溫(wen)度(du)為(wei)42℃,并(bing)提(ti)前在(zai)試管(guan)內放置10倍(bei)培(pei)養液(ye),使培(pei)養液(ye)溫(wen)度(du)與室溫(wen)一 致(zhi)。1分鐘內融化細胞(禁(jin)止搖晃凍存(cun)管(guan)),移(yi)取(qu)至試管(guan)內,動作(zuo)要輕(qing),從試管(guan)管(guan)底(di)開始(shi)慢(man)慢(man)上提(ti) 移(yi)液(ye)管(guan),使細胞在(zai)培(pei)養液(ye)內分布均勻,離心(xin),洗2次。
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其它(ta)經驗概(gai)括:
細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)類型(xing)(xing) 編輯 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)類型(xing)(xing)根據是(shi)否附(fu)于支(zhi)持物(wu)(wu)上生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)(chang)的(de)(de)(de)(de)特性(xing),分為 貼附(fu)型(xing)(xing)、懸(xuan)浮(fu)型(xing)(xing)。 貼附(fu)型(xing)(xing) 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)貼附(fu)在(zai)(zai)支(zhi)持物(wu)(wu)表面(mian)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)(chang),只依賴貼附(fu)才能(neng)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)(chang)的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)叫(jiao)做(zuo)貼附(fu)型(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(Anchorrage-dependent cells)這種(zhong)(zhong)(zhong)現象與(yu)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)分化有關(guan)(guan)。 貼附(fu)型(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)分型(xing)(xing) 1.成(cheng)(cheng)纖(xian)維(wei)型(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao):(fibroblast) 來(lai)自(zi)(zi)中(zhong)(zhong)胚層(ceng) 特點(dian):與(yu)體(ti)內成(cheng)(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)形(xing)(xing)(xing)態(tai)相(xiang)似(si),胞(bao)(bao)(bao)體(ti)梭型(xing)(xing)或(huo)(huo)不(bu)(bu)規則(ze)三角形(xing)(xing)(xing),中(zhong)(zhong)央有圓形(xing)(xing)(xing)核(he),胞(bao)(bao)(bao)質(zhi)向外(wai)(wai)伸出2~3個(ge)長(chang)(chang)短不(bu)(bu)同(tong)的(de)(de)(de)(de)突(tu)起(qi)(qi)。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)(chang)時(shi)呈放(fang)射狀(zhuang),漩渦(wo)或(huo)(huo)火焰狀(zhuang)走行。 起(qi)(qi)源:細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)來(lai)自(zi)(zi)中(zhong)(zhong)胚層(ceng)間充質(zhi)組(zu)織(zhi)。 除真正的(de)(de)(de)(de)成(cheng)(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)、心肌、平滑肌、成(cheng)(cheng)骨細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)、血管內皮細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)。 注意:細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)培(pei)養(yang)時(shi)成(cheng)(cheng)為成(cheng)(cheng)纖(xian)維(wei)型(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)是(shi)一種(zhong)(zhong)(zhong)慣稱,與(yu)體(ti)內細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)不(bu)(bu)同(tong)。 2.上皮型(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(epithlium cell type) 來(lai)自(zi)(zi)外(wai)(wai)胚層(ceng)。 特點(dian):扁平不(bu)(bu)規則(ze)多(duo)角型(xing)(xing)、圓形(xing)(xing)(xing)核(he)、細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)緊(jin)密相(xiang)連成(cheng)(cheng)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)增殖(zhi)數目增多(duo)時(shi),整個(ge)上皮膜隨之移動。邊緣細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)很少脫(tuo)離(li)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)群(qun)而(er)單獨活動“ 拉(la)網”現象與(yu)起(qi)(qi)源內外(wai)(wai)胚層(ceng)組(zu)織(zhi)有關(guan)(guan)。 組(zu)織(zhi): 皮膚表皮及其衍生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)(汗腺(xian)、皮脂腺(xian))消化道分上皮、肝、胰(yi)、肺泡(pao)上皮。 3. 游走型(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(wandering cell type) 特點(dian):在(zai)(zai)支(zhi)持物(wu)(wu)上散(san)在(zai)(zai)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)(chang),不(bu)(bu)連接(jie)成(cheng)(cheng)片(pian),胞(bao)(bao)(bao)質(zhi)伸出偽足或(huo)(huo)突(tu)起(qi)(qi)呈活躍的(de)(de)(de)(de)游走或(huo)(huo)變形(xing)(xing)(xing)運動,速度快不(bu)(bu)規則(ze), 密度大(da)連接(jie)成(cheng)(cheng)片(pian)呈多(duo)角形(xing)(xing)(xing)不(bu)(bu)易與(yu)其他類型(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao) 區別。 4. 多(duo)形(xing)(xing)(xing)型(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(polymorphic cell type) 特點(dian): 無(wu)規律的(de)(de)(de)(de)形(xing)(xing)(xing)態(tai),如神經(jing)(jing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)。 懸(xuan)浮(fu)型(xing)(xing) 特點(dian): 不(bu)(bu)貼附(fu)在(zai)(zai)支(zhi)持物(wu)(wu)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)(chang),胞(bao)(bao)(bao)體(ti)圓形(xing)(xing)(xing),在(zai)(zai)培(pei)養(yang)液中(zhong)(zhong)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)(chang)空間大(da),可(ke)(ke)長(chang)(chang)時(shi)間的(de)(de)(de)(de)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)(chang),繁殖(zhi)旺盛便(bian)于做(zuo)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)代謝研究。S180肉(rou)瘤、血液里的(de)(de)(de)(de)白細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)、K562、 HL-60。 分型(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)目的(de)(de)(de)(de): 方便(bian)描(miao)述細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)培(pei)養(yang)過程中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)形(xing)(xing)(xing)態(tai)變化。培(pei)養(yang)條件好時(shi),細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)相(xiang)對穩定,可(ke)(ke)反映(ying)出起(qi)(qi)源、正常(chang)異常(chang)的(de)(de)(de)(de)區別,作為判定細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)學性(xing)狀(zhuang)指(zhi)標。 強調:一般形(xing)(xing)(xing)態(tai)并不(bu)(bu)是(shi)一項可(ke)(ke)靠指(zhi)標要受各(ge)方面(mian)影響。 如:反復開(kai)關(guan)(guan)溫箱、溫度、C02的(de)(de)(de)(de)濃(nong)度、培(pei)養(yang)基(ji)變堿(jian)、支(zhi)原體(ti)、pH值(zhi)。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)接(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)時(shi)呈三角型(xing)(xing)狀(zhuang)態(tai),經(jing)(jing)培(pei)養(yang)一定時(shi)間后,細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)傳代前已形(xing)(xing)(xing)成(cheng)(cheng)上皮型(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)。
KG-1a細(xi)胞(bao),人急性骨(gu)髓白血(xue)病細(xi)胞(bao) 25T
MV4-11細(xi)胞(bao),人急性白血(xue)病細(xi)胞(bao) 25T
HL-60細(xi)胞(bao),人急性早幼粒白血病細(xi)胞(bao) 25T
U937細(xi)胞,人急(ji)性早幼粒白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞 25T
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K562細(xi)胞,人慢性(xing)髓系白(bai)血(xue)病細(xi)胞 25T
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HS 505.T細(xi)胞(bao),慢性淋(lin)巴細(xi)胞(bao)白血病(bing)(CLL)細(xi)胞(bao) 25T