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WB-F344肝上皮樣干(gan)細(xi)胞, 進(jin)口胎牛血(xue)清慧穎(ying)生(sheng)物一站式采購商城,細(xi)(xi)胞株(zhu)細(xi)(xi)胞系,耐藥株(zhu),STR鑒(jian)定(ding),各品牌進口胎(tai)牛血清,培養基(ji),胰酶,雙抗,*培養基(ji),PBS緩沖液,DMSO,細(xi)(xi)胞生(sheng)長因子等,種類(lei)齊(qi)全,*!
細胞(bao)(bao)培養技(ji)(ji)術(shu)屬于(yu)細胞(bao)(bao)工程范(fan)疇(chou),細胞(bao)(bao)工程包括(kuo)細胞(bao)(bao)融合技(ji)(ji)術(shu)、單克隆抗體的制備、核移植技(ji)(ji)術(shu)(克隆)等,而這(zhe)些技(ji)(ji)術(shu)中都有(you)細胞(bao)(bao)培養過程,所以說細胞(bao)(bao)培養是生物學研究的zui基本(ben)技(ji)(ji)術(shu)之一。
上海慧穎(ying)生物(wu)供應WB-F344肝上皮樣干(gan)細胞, 進口胎牛血(xue)清,活(huo)性好、存活(huo)率(lv)高。隨著(zhu)細胞生物學尤其是干細胞研究(jiu)的快速發展,在細胞治療領域已經(jing)(jing)進行(xing)了大量的探索,取得了一(yi)系列(lie)的令(ling)人振奮的成果(guo)(guo),且部分基礎研究(jiu)成果(guo)(guo)已經(jing)(jing)在心血管系統疾病 、神經(jing)(jing)系統疾病、肌肉(rou)骨(gu)骼相關疾病、糖尿病等。
養細胞經驗分享:
1.細胞(bao)(bao)形(xing)態觀(guan)察。細胞(bao)(bao)膜是每天必(bi)須觀(guan)察的(de)(de),看是否清(qing)晰,細胞(bao)(bao)的(de)(de)死亡往(wang)往(wang)是從細胞(bao)(bao)膜的(de)(de)破(po)裂開始(shi)的(de)(de),早期的(de)(de)表現就(jiu)是細胞(bao)(bao)膜某(mou)一(yi)點(dian)出現欠完整或者毛發(fa)影。
2.細(xi)胞(bao)(bao)往往會(hui)有“抱團”現象,抱團生長或死亡,個(ge)人認為(wei)應該勤(qin)換液或傳代,盡(jin)量避 免細(xi)胞(bao)(bao)抱團。
3.細胞生長迅速,強烈建議用較大的培養瓶(ping)養,用小(xiao)瓶(ping)養的話(hua),換液不及時,很容易死 亡(wang)。細胞的生長速度一(yi)般為(wei)2天左右就需要傳(chuan)(chuan)代,并且一(yi)般為(wei)一(yi)傳(chuan)(chuan)三,或一(yi)傳(chuan)(chuan)四。
4.培養液:1640|DMEM|MEM|IMDM|a-MEM培養液,1L一般加碳酸氫鈉2g,并加雙(shuang)抗,胎牛血清濃度(du)*為12%,zui低(di)不低(di)于10%,有些細胞對胎牛血清高(gao)度(du)依賴(lai),比如WRO細胞,HT-22細胞,HA-VSMC細(xi)胞,NK-92細(xi)胞等(deng)。培養液PH應調為7.20-7.40之間。
5.防污(wu)(wu)染。L-02細胞生長迅速,較少發生污(wu)(wu)染,但(dan)常規措施(shi)應(ying)該做好。比如無菌操(cao)作,酒精 消毒等,培養瓶口建議(yi)過火,包括(kuo)瓶蓋,應(ying)過火4秒左右。
6.凍存(cun)。-20一小時,-80次夜,液(ye)氮(dan)長期保(bao)存(cun)。強烈建議液(ye)氮(dan)長期保(bao)存(cun),盡量不(bu)要在-80長期 保(bao)存(cun),死亡率很高。
7.復蘇。調節水浴箱(xiang)溫(wen)(wen)度(du)為42℃,并提(ti)前在試管(guan)(guan)內(nei)放置(zhi)10倍(bei)培(pei)養液(ye),使(shi)培(pei)養液(ye)溫(wen)(wen)度(du)與室溫(wen)(wen)一 致(zhi)。1分鐘內(nei)融化(hua)細(xi)胞(bao)(禁止搖(yao)晃(huang)凍存管(guan)(guan)),移(yi)取至試管(guan)(guan)內(nei),動作要(yao)輕,從(cong)試管(guan)(guan)管(guan)(guan)底開始(shi)慢(man)慢(man)上提(ti) 移(yi)液(ye)管(guan)(guan),使(shi)細(xi)胞(bao)在培(pei)養液(ye)內(nei)分布(bu)均勻,離心,洗(xi)2次。
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其它經驗概括(kuo):
細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)類型 編(bian)輯 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)類型根據是否附(fu)(fu)于(yu)支(zhi)(zhi)(zhi)持(chi)物(wu)上生長的(de)(de)(de)特(te)性,分為(wei) 貼(tie)(tie)附(fu)(fu)型、懸浮(fu)型。 貼(tie)(tie)附(fu)(fu)型 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)貼(tie)(tie)附(fu)(fu)在(zai)(zai)(zai)支(zhi)(zhi)(zhi)持(chi)物(wu)表(biao)面生長,只依(yi)賴貼(tie)(tie)附(fu)(fu)才(cai)能生長的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)叫做貼(tie)(tie)附(fu)(fu)型細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(Anchorrage-dependent cells)這種現象與(yu)(yu)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)分化(hua)(hua)有關(guan)。 貼(tie)(tie)附(fu)(fu)型細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)分型 1.成(cheng)纖(xian)維(wei)型細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao):(fibroblast) 來自(zi)中(zhong)胚層 特(te)點:與(yu)(yu)體(ti)(ti)內成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)形態(tai)相似,胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)體(ti)(ti)梭型或不(bu)規則三角(jiao)(jiao)形,中(zhong)央(yang)有圓形核,胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)質向外伸(shen)出(chu)(chu)2~3個長短不(bu)同(tong)的(de)(de)(de)突(tu)起。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)(zai)生長時呈(cheng)放(fang)射(she)狀,漩渦或火焰(yan)狀走(zou)行。 起源(yuan):細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)來自(zi)中(zhong)胚層間(jian)充質組織(zhi)。 除真正(zheng)的(de)(de)(de)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、心(xin)肌、平滑肌、成(cheng)骨(gu)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、血管內皮(pi)(pi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。 注(zhu)意:細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)(zai)培(pei)(pei)養時成(cheng)為(wei)成(cheng)纖(xian)維(wei)型細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)是一(yi)種慣稱,與(yu)(yu)體(ti)(ti)內細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)不(bu)同(tong)。 2.上皮(pi)(pi)型細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(epithlium cell type) 來自(zi)外胚層。 特(te)點:扁平不(bu)規則多(duo)角(jiao)(jiao)型、圓形核、細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)緊密(mi)相連成(cheng)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)增殖(zhi)數目增多(duo)時,整(zheng)個上皮(pi)(pi)膜隨之移動(dong)。邊(bian)緣細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)很少脫離細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)群而單獨活動(dong)“ 拉網”現象與(yu)(yu)起源(yuan)內外胚層組織(zhi)有關(guan)。 組織(zhi): 皮(pi)(pi)膚表(biao)皮(pi)(pi)及(ji)其(qi)衍生物(wu)(汗腺(xian)、皮(pi)(pi)脂腺(xian))消化(hua)(hua)道(dao)分上皮(pi)(pi)、肝(gan)、胰、肺泡上皮(pi)(pi)。 3. 游走(zou)型細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(wandering cell type) 特(te)點:在(zai)(zai)(zai)支(zhi)(zhi)(zhi)持(chi)物(wu)上散(san)在(zai)(zai)(zai)生長,不(bu)連接成(cheng)片,胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)質伸(shen)出(chu)(chu)偽足或突(tu)起呈(cheng)活躍的(de)(de)(de)游走(zou)或變形運(yun)動(dong),速度快(kuai)不(bu)規則, 密(mi)度大(da)(da)連接成(cheng)片呈(cheng)多(duo)角(jiao)(jiao)形不(bu)易與(yu)(yu)其(qi)他類型的(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao) 區別。 4. 多(duo)形型細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(polymorphic cell type) 特(te)點: 無規律的(de)(de)(de)形態(tai),如神經(jing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。 懸浮(fu)型 特(te)點: 不(bu)貼(tie)(tie)附(fu)(fu)在(zai)(zai)(zai)支(zhi)(zhi)(zhi)持(chi)物(wu)生長,胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)體(ti)(ti)圓形,在(zai)(zai)(zai)培(pei)(pei)養液(ye)(ye)中(zhong)生長空(kong)間(jian)大(da)(da),可長時間(jian)的(de)(de)(de)生長,繁殖(zhi)旺(wang)盛便于(yu)做細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)代謝研究(jiu)。S180肉瘤、血液(ye)(ye)里(li)的(de)(de)(de)白細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、K562、 HL-60。 分型的(de)(de)(de)目的(de)(de)(de): 方便描述細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)(zai)培(pei)(pei)養過程中(zhong)的(de)(de)(de)形態(tai)變化(hua)(hua)。培(pei)(pei)養條件好時,細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)相對穩(wen)定(ding),可反映(ying)出(chu)(chu)起源(yuan)、正(zheng)常異常的(de)(de)(de)區別,作為(wei)判定(ding)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)生物(wu)學(xue)性狀指(zhi)標。 強調(diao):一(yi)般形態(tai)并(bing)不(bu)是一(yi)項可靠(kao)指(zhi)標要受各方面影(ying)響。 如:反復開關(guan)溫箱(xiang)、溫度、C02的(de)(de)(de)濃(nong)度、培(pei)(pei)養基變堿、支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)、pH值(zhi)。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)(zai)接種時呈(cheng)三角(jiao)(jiao)型狀態(tai),經(jing)培(pei)(pei)養一(yi)定(ding)時間(jian)后,細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)(zai)傳代前已形成(cheng)上皮(pi)(pi)型細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。
KG-1a細(xi)胞,人急性骨髓(sui)白(bai)血病細(xi)胞 25T
MV4-11細(xi)胞,人急性白血病(bing)細(xi)胞 25T
HL-60細胞(bao),人(ren)急性早幼粒白血病細胞(bao) 25T
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MOLM-13細(xi)(xi)胞,人(ren)急性髓系(xi)白(bai)血病細(xi)(xi)胞 25T
MOLM-14細胞,人急(ji)性髓系白(bai)血病細胞 25T
K562細胞,人慢(man)性髓系(xi)白血病細胞 25T
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HS 505.T細胞(bao),慢(man)性淋巴細胞(bao)白血(xue)病(CLL)細胞(bao) 25T