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A549/DDP耐順鉑肺(fei)癌細胞,DDP終濃度1-2ug/ml慧(hui)穎生(sheng)(sheng)物一站式采(cai)購商(shang)城,細(xi)胞(bao)株(zhu)細(xi)胞(bao)系,耐藥株(zhu),STR鑒定,各品(pin)牌(pai)進口胎牛血(xue)清,培養基(ji)(ji),胰酶(mei),雙抗,*培養基(ji)(ji),PBS緩沖(chong)液(ye),DMSO,細(xi)胞(bao)生(sheng)(sheng)長因子等,種類齊全,*!
細胞培(pei)養技(ji)術屬于(yu)細胞工程(cheng)范疇,細胞工程(cheng)包括細胞融合技(ji)術、單(dan)克(ke)隆抗體的(de)制(zhi)備(bei)、核移植技(ji)術(克(ke)隆)等,而這些技(ji)術中(zhong)都有細胞培(pei)養過程(cheng),所以(yi)說細胞培(pei)養是生物學研究的(de)zui基本技(ji)術之一。
上海慧穎(ying)生物供應A549/DDP耐順鉑(bo)肺(fei)癌細(xi)胞,DDP終(zhong)濃度1-2ug/ml,活性好、存活率高。隨著(zhu)細(xi)胞(bao)生物學尤其是干細(xi)胞(bao)研(yan)(yan)究的快速發展,在細(xi)胞(bao)治療領(ling)域已經進行了(le)大量的探索,取得了(le)一系(xi)列的令人振奮的成果,且部(bu)分基(ji)礎研(yan)(yan)究成果已經在心血管(guan)系(xi)統疾病 、神經系(xi)統疾病、肌(ji)肉骨(gu)骼(ge)相關疾病、糖尿病等(deng)。
養(yang)細(xi)胞經驗分享:
1.細(xi)胞(bao)形(xing)態觀(guan)察(cha)。細(xi)胞(bao)膜(mo)(mo)是每天(tian)必須觀(guan)察(cha)的(de)(de)(de)(de),看是否(fou)清晰,細(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)(de)死亡往(wang)往(wang)是從細(xi)胞(bao)膜(mo)(mo)的(de)(de)(de)(de)破裂開(kai)始(shi)的(de)(de)(de)(de),早期的(de)(de)(de)(de)表現就(jiu)是細(xi)胞(bao)膜(mo)(mo)某一點出現欠完整或者(zhe)毛發影。
2.細胞往往會有“抱團”現象,抱團生長或死亡(wang),個人認為應該(gai)勤(qin)換液或傳(chuan)代(dai),盡量避 免(mian)細胞抱團。
3.細胞生長迅(xun)速,強烈建議用(yong)較(jiao)大的培養瓶養,用(yong)小瓶養的話,換液不及(ji)時,很容易死(si) 亡。細胞的生長速度一般為(wei)2天左右就需要傳(chuan)代(dai),并且(qie)一般為(wei)一傳(chuan)三,或一傳(chuan)四。
4.培(pei)養液:1640|DMEM|MEM|IMDM|a-MEM培(pei)養液,1L一般加(jia)(jia)碳酸氫鈉2g,并(bing)加(jia)(jia)雙(shuang)抗,胎牛血清濃度(du)*為12%,zui低(di)不低(di)于10%,有些細胞(bao)(bao)對胎牛血清高度(du)依賴,比如WRO細胞(bao)(bao),HT-22細胞(bao)(bao),HA-VSMC細胞,NK-92細胞等。培養液PH應調為7.20-7.40之間。
5.防污(wu)染(ran)。L-02細胞生(sheng)長迅速,較少發(fa)生(sheng)污(wu)染(ran),但常(chang)規措施應該做(zuo)好。比如(ru)無菌操作,酒(jiu)精 消(xiao)毒(du)等(deng),培養瓶口建(jian)議過(guo)火(huo),包括(kuo)瓶蓋(gai),應過(guo)火(huo)4秒左右。
6.凍存(cun)。-20一小(xiao)時,-80次夜(ye),液氮長期(qi)保(bao)存(cun)。強烈建(jian)議(yi)液氮長期(qi)保(bao)存(cun),盡量不要在-80長期(qi) 保(bao)存(cun),死亡(wang)率很高(gao)。
7.復蘇。調節水浴箱溫度為(wei)42℃,并提(ti)前在(zai)試管(guan)內(nei)放(fang)置10倍(bei)培(pei)養液,使(shi)培(pei)養液溫度與室溫一 致。1分鐘內(nei)融(rong)化細(xi)胞(bao)(禁止搖晃凍(dong)存管(guan)),移取至(zhi)試管(guan)內(nei),動作要輕,從試管(guan)管(guan)底開始慢慢上(shang)提(ti) 移液管(guan),使(shi)細(xi)胞(bao)在(zai)培(pei)養液內(nei)分布(bu)均(jun)勻,離心,洗2次。
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其它經驗(yan)概(gai)括:
細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)類型(xing) 編輯 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)類型(xing)根據是(shi)否附于(yu)支持(chi)物(wu)上(shang)生長(chang)(chang)(chang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)特(te)性,分(fen)(fen)(fen)為 貼(tie)(tie)(tie)附型(xing)、懸(xuan)(xuan)浮型(xing)。 貼(tie)(tie)(tie)附型(xing) 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)貼(tie)(tie)(tie)附在(zai)(zai)支持(chi)物(wu)表面生長(chang)(chang)(chang),只依賴貼(tie)(tie)(tie)附才能生長(chang)(chang)(chang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)叫做貼(tie)(tie)(tie)附型(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(Anchorrage-dependent cells)這(zhe)種現象與(yu)(yu)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)分(fen)(fen)(fen)化有關(guan)(guan)。 貼(tie)(tie)(tie)附型(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)型(xing) 1.成(cheng)纖(xian)(xian)維型(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao):(fibroblast) 來(lai)自中胚(pei)層 特(te)點(dian)(dian):與(yu)(yu)體(ti)內(nei)成(cheng)纖(xian)(xian)維細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)形(xing)(xing)(xing)態(tai)相(xiang)似,胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)體(ti)梭型(xing)或不(bu)(bu)規(gui)則三(san)角形(xing)(xing)(xing),中央有圓形(xing)(xing)(xing)核,胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)質向外伸出2~3個長(chang)(chang)(chang)短不(bu)(bu)同的(de)(de)(de)(de)(de)(de)突起(qi)。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)生長(chang)(chang)(chang)時(shi)(shi)(shi)(shi)呈(cheng)放射狀(zhuang)(zhuang),漩渦或火(huo)焰(yan)狀(zhuang)(zhuang)走行。 起(qi)源:細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)來(lai)自中胚(pei)層間(jian)充質組(zu)織(zhi)(zhi)。 除(chu)真正的(de)(de)(de)(de)(de)(de)成(cheng)纖(xian)(xian)維細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、心肌(ji)、平(ping)滑肌(ji)、成(cheng)骨細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、血管內(nei)皮(pi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。 注意:細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)時(shi)(shi)(shi)(shi)成(cheng)為成(cheng)纖(xian)(xian)維型(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)是(shi)一種慣(guan)稱,與(yu)(yu)體(ti)內(nei)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)不(bu)(bu)同。 2.上(shang)皮(pi)型(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(epithlium cell type) 來(lai)自外胚(pei)層。 特(te)點(dian)(dian):扁平(ping)不(bu)(bu)規(gui)則多(duo)角型(xing)、圓形(xing)(xing)(xing)核、細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)緊密(mi)相(xiang)連(lian)成(cheng)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)增殖(zhi)數目(mu)增多(duo)時(shi)(shi)(shi)(shi),整個上(shang)皮(pi)膜(mo)隨之(zhi)移(yi)動(dong)。邊緣細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)很少脫離細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)群而單獨(du)活動(dong)“ 拉網(wang)”現象與(yu)(yu)起(qi)源內(nei)外胚(pei)層組(zu)織(zhi)(zhi)有關(guan)(guan)。 組(zu)織(zhi)(zhi): 皮(pi)膚表皮(pi)及其衍生物(wu)(汗腺(xian)、皮(pi)脂腺(xian))消化道分(fen)(fen)(fen)上(shang)皮(pi)、肝、胰(yi)、肺泡上(shang)皮(pi)。 3. 游(you)走型(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(wandering cell type) 特(te)點(dian)(dian):在(zai)(zai)支持(chi)物(wu)上(shang)散在(zai)(zai)生長(chang)(chang)(chang),不(bu)(bu)連(lian)接(jie)成(cheng)片(pian),胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)質伸出偽足或突起(qi)呈(cheng)活躍的(de)(de)(de)(de)(de)(de)游(you)走或變形(xing)(xing)(xing)運動(dong),速度(du)(du)快不(bu)(bu)規(gui)則, 密(mi)度(du)(du)大連(lian)接(jie)成(cheng)片(pian)呈(cheng)多(duo)角形(xing)(xing)(xing)不(bu)(bu)易與(yu)(yu)其他類型(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao) 區(qu)(qu)別。 4. 多(duo)形(xing)(xing)(xing)型(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(polymorphic cell type) 特(te)點(dian)(dian): 無規(gui)律的(de)(de)(de)(de)(de)(de)形(xing)(xing)(xing)態(tai),如神(shen)經細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。 懸(xuan)(xuan)浮型(xing) 特(te)點(dian)(dian): 不(bu)(bu)貼(tie)(tie)(tie)附在(zai)(zai)支持(chi)物(wu)生長(chang)(chang)(chang),胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)體(ti)圓形(xing)(xing)(xing),在(zai)(zai)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)液(ye)中生長(chang)(chang)(chang)空(kong)間(jian)大,可長(chang)(chang)(chang)時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)生長(chang)(chang)(chang),繁殖(zhi)旺盛便于(yu)做細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)代謝研究(jiu)。S180肉瘤、血液(ye)里(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)白細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、K562、 HL-60。 分(fen)(fen)(fen)型(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)目(mu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de): 方便描(miao)述細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)過程中的(de)(de)(de)(de)(de)(de)形(xing)(xing)(xing)態(tai)變化。培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)條件好時(shi)(shi)(shi)(shi),細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)相(xiang)對穩定(ding),可反映出起(qi)源、正常(chang)異常(chang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)區(qu)(qu)別,作(zuo)為判定(ding)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)生物(wu)學性狀(zhuang)(zhuang)指(zhi)標(biao)。 強調:一般形(xing)(xing)(xing)態(tai)并不(bu)(bu)是(shi)一項可靠指(zhi)標(biao)要受各方面影響(xiang)。 如:反復開關(guan)(guan)溫(wen)(wen)箱(xiang)、溫(wen)(wen)度(du)(du)、C02的(de)(de)(de)(de)(de)(de)濃(nong)度(du)(du)、培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基變堿、支原體(ti)、pH值。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)接(jie)種時(shi)(shi)(shi)(shi)呈(cheng)三(san)角型(xing)狀(zhuang)(zhuang)態(tai),經培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)一定(ding)時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)后,細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)(zai)傳代前(qian)已形(xing)(xing)(xing)成(cheng)上(shang)皮(pi)型(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。
KG-1a細胞(bao),人(ren)急性骨髓白(bai)血病(bing)細胞(bao) 25T
MV4-11細胞(bao),人急性(xing)白血病細胞(bao) 25T
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HS 505.T細胞,慢(man)性淋巴細胞白血(xue)病(CLL)細胞 25T
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