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MKN45人胃腺癌細胞慧穎生物一站式(shi)采購商城(cheng),細(xi)胞株細(xi)胞系(xi),耐藥株,STR鑒定(ding),各品(pin)牌進口胎(tai)牛血清,培養(yang)基,胰酶,雙(shuang)抗,*培養(yang)基,PBS緩沖液,DMSO,細(xi)胞生長(chang)因子等(deng),種(zhong)類齊全,*!
細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養(yang)技(ji)(ji)術屬于細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)工程范疇,細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)工程包(bao)括(kuo)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)融合技(ji)(ji)術、單克隆抗體的制備(bei)、核(he)移植技(ji)(ji)術(克隆)等,而這些技(ji)(ji)術中(zhong)都有細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養(yang)過程,所(suo)以(yi)說細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養(yang)是生物學研究(jiu)的zui基(ji)本技(ji)(ji)術之一(yi)。
上海慧穎(ying)生物供應MKN45人胃腺癌(ai)細胞(bao),活(huo)(huo)性(xing)好(hao)、存活(huo)(huo)率高。隨(sui)著(zhu)細胞(bao)生物學尤其是干細胞(bao)研(yan)究(jiu)的快速發展(zhan),在細胞(bao)治療領域已經進行了大量(liang)的探索(suo),取得(de)了一系(xi)列的令(ling)人(ren)振奮的成(cheng)果(guo),且部(bu)分基礎研(yan)究(jiu)成(cheng)果(guo)已經在心(xin)血管系(xi)統疾(ji)病 、神經系(xi)統疾(ji)病、肌肉骨骼相關疾(ji)病、糖尿病等。
養細胞(bao)經驗分享:
1.細(xi)胞形態觀察。細(xi)胞膜(mo)是每天必須(xu)觀察的(de)(de)(de),看是否清晰,細(xi)胞的(de)(de)(de)死亡往(wang)往(wang)是從細(xi)胞膜(mo)的(de)(de)(de)破裂開始的(de)(de)(de),早(zao)期(qi)的(de)(de)(de)表(biao)現就(jiu)是細(xi)胞膜(mo)某一點出現欠完整或者毛發影。
2.細(xi)(xi)胞往往會有“抱(bao)團(tuan)(tuan)”現象,抱(bao)團(tuan)(tuan)生(sheng)長或死亡,個人認(ren)為應該勤換(huan)液或傳代,盡量避 免細(xi)(xi)胞抱(bao)團(tuan)(tuan)。
3.細(xi)(xi)胞生長(chang)迅速(su),強烈建議(yi)用較大(da)的培養瓶養,用小瓶養的話,換液不(bu)及時(shi),很容易死(si) 亡。細(xi)(xi)胞的生長(chang)速(su)度(du)一(yi)般(ban)(ban)為2天左(zuo)右就需要(yao)傳(chuan)代,并(bing)且一(yi)般(ban)(ban)為一(yi)傳(chuan)三,或(huo)一(yi)傳(chuan)四(si)。
4.培(pei)養(yang)(yang)液:1640|DMEM|MEM|IMDM|a-MEM培(pei)養(yang)(yang)液,1L一(yi)般加碳酸氫鈉2g,并(bing)加雙抗,胎牛血(xue)清濃度*為12%,zui低不低于(yu)10%,有些細(xi)胞(bao)對胎牛血(xue)清高度依賴,比如(ru)WRO細(xi)胞(bao),HT-22細(xi)胞(bao),HA-VSMC細胞(bao),NK-92細胞(bao)等。培(pei)養液PH應(ying)調為(wei)7.20-7.40之間。
5.防污(wu)染。L-02細胞生長迅(xun)速,較少發生污(wu)染,但常(chang)規措(cuo)施應(ying)該做好(hao)。比如無菌操作(zuo),酒精 消毒等,培養瓶口建(jian)議過(guo)火,包括瓶蓋,應(ying)過(guo)火4秒左(zuo)右。
6.凍存。-20一小時,-80次夜,液氮(dan)長(chang)期(qi)保(bao)存。強烈建議液氮(dan)長(chang)期(qi)保(bao)存,盡量不要在-80長(chang)期(qi) 保(bao)存,死亡率很高(gao)。
7.復(fu)蘇。調節水浴箱(xiang)溫(wen)度為42℃,并提前在(zai)試(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)內(nei)放置10倍培(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye),使(shi)培(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)溫(wen)度與室溫(wen)一 致。1分(fen)鐘內(nei)融化細胞(bao)(禁(jin)止(zhi)搖晃凍(dong)存管(guan)(guan)(guan)(guan)),移取(qu)至試(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)內(nei),動(dong)作要輕,從試(shi)管(guan)(guan)(guan)(guan)管(guan)(guan)(guan)(guan)底開始(shi)慢(man)慢(man)上提 移液(ye)(ye)管(guan)(guan)(guan)(guan),使(shi)細胞(bao)在(zai)培(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)內(nei)分(fen)布均(jun)勻,離心,洗(xi)2次。
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其(qi)它(ta)經驗概括:
細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)類型(xing)(xing)(xing)(xing) 編輯(ji) 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)類型(xing)(xing)(xing)(xing)根據是否(fou)附(fu)(fu)(fu)于支(zhi)持物(wu)上(shang)生(sheng)長(chang)的特性(xing),分為 貼(tie)(tie)(tie)附(fu)(fu)(fu)型(xing)(xing)(xing)(xing)、懸(xuan)(xuan)浮(fu)型(xing)(xing)(xing)(xing)。 貼(tie)(tie)(tie)附(fu)(fu)(fu)型(xing)(xing)(xing)(xing) 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)貼(tie)(tie)(tie)附(fu)(fu)(fu)在(zai)支(zhi)持物(wu)表面生(sheng)長(chang),只依賴貼(tie)(tie)(tie)附(fu)(fu)(fu)才能(neng)生(sheng)長(chang)的細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)叫做貼(tie)(tie)(tie)附(fu)(fu)(fu)型(xing)(xing)(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(Anchorrage-dependent cells)這(zhe)種現象與細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)分化有關。 貼(tie)(tie)(tie)附(fu)(fu)(fu)型(xing)(xing)(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的分型(xing)(xing)(xing)(xing) 1.成(cheng)(cheng)(cheng)纖(xian)維型(xing)(xing)(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao):(fibroblast) 來(lai)(lai)(lai)自中(zhong)胚(pei)(pei)層 特點:與體(ti)內成(cheng)(cheng)(cheng)纖(xian)維細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)形(xing)態(tai)(tai)相(xiang)似,胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)體(ti)梭型(xing)(xing)(xing)(xing)或(huo)不(bu)規則(ze)三角形(xing),中(zhong)央有圓形(xing)核,胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)質(zhi)向(xiang)外(wai)伸出2~3個長(chang)短不(bu)同(tong)的突起(qi)(qi)。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)生(sheng)長(chang)時(shi)(shi)(shi)呈放(fang)射狀(zhuang),漩渦或(huo)火(huo)焰(yan)狀(zhuang)走(zou)行。 起(qi)(qi)源:細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)來(lai)(lai)(lai)自中(zhong)胚(pei)(pei)層間(jian)充質(zhi)組(zu)(zu)織。 除真正的成(cheng)(cheng)(cheng)纖(xian)維細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、心(xin)肌(ji)、平滑肌(ji)、成(cheng)(cheng)(cheng)骨細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、血(xue)管內皮(pi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。 注意(yi):細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)培養(yang)(yang)(yang)時(shi)(shi)(shi)成(cheng)(cheng)(cheng)為成(cheng)(cheng)(cheng)纖(xian)維型(xing)(xing)(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)是一種慣稱,與體(ti)內細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)不(bu)同(tong)。 2.上(shang)皮(pi)型(xing)(xing)(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(epithlium cell type) 來(lai)(lai)(lai)自外(wai)胚(pei)(pei)層。 特點:扁平不(bu)規則(ze)多角型(xing)(xing)(xing)(xing)、圓形(xing)核、細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)緊密(mi)相(xiang)連成(cheng)(cheng)(cheng)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)增殖(zhi)數目(mu)增多時(shi)(shi)(shi),整個上(shang)皮(pi)膜隨之移動。邊緣細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)很(hen)少(shao)脫離細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)群而單獨活動“ 拉(la)網”現象與起(qi)(qi)源內外(wai)胚(pei)(pei)層組(zu)(zu)織有關。 組(zu)(zu)織: 皮(pi)膚(fu)表皮(pi)及其衍生(sheng)物(wu)(汗腺(xian)、皮(pi)脂腺(xian))消化道分上(shang)皮(pi)、肝、胰、肺泡上(shang)皮(pi)。 3. 游走(zou)型(xing)(xing)(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(wandering cell type) 特點:在(zai)支(zhi)持物(wu)上(shang)散在(zai)生(sheng)長(chang),不(bu)連接(jie)成(cheng)(cheng)(cheng)片,胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)質(zhi)伸出偽足或(huo)突起(qi)(qi)呈活躍的游走(zou)或(huo)變形(xing)運動,速度(du)(du)快不(bu)規則(ze), 密(mi)度(du)(du)大連接(jie)成(cheng)(cheng)(cheng)片呈多角形(xing)不(bu)易與其他類型(xing)(xing)(xing)(xing)的細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao) 區(qu)別。 4. 多形(xing)型(xing)(xing)(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(polymorphic cell type) 特點: 無(wu)規律的形(xing)態(tai)(tai),如(ru)(ru)神(shen)經細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。 懸(xuan)(xuan)浮(fu)型(xing)(xing)(xing)(xing) 特點: 不(bu)貼(tie)(tie)(tie)附(fu)(fu)(fu)在(zai)支(zhi)持物(wu)生(sheng)長(chang),胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)體(ti)圓形(xing),在(zai)培養(yang)(yang)(yang)液中(zhong)生(sheng)長(chang)空(kong)間(jian)大,可(ke)長(chang)時(shi)(shi)(shi)間(jian)的生(sheng)長(chang),繁殖(zhi)旺盛便于做細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)代謝研究。S180肉瘤(liu)、血(xue)液里的白細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、K562、 HL-60。 分型(xing)(xing)(xing)(xing)的目(mu)的: 方便描述細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)培養(yang)(yang)(yang)過程中(zhong)的形(xing)態(tai)(tai)變化。培養(yang)(yang)(yang)條件好時(shi)(shi)(shi),細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)相(xiang)對穩(wen)定(ding),可(ke)反映(ying)出起(qi)(qi)源、正常(chang)異常(chang)的區(qu)別,作為判定(ding)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)生(sheng)物(wu)學性(xing)狀(zhuang)指(zhi)標。 強調:一般形(xing)態(tai)(tai)并(bing)不(bu)是一項可(ke)靠(kao)指(zhi)標要(yao)受各方面影響(xiang)。 如(ru)(ru):反復(fu)開關溫箱、溫度(du)(du)、C02的濃度(du)(du)、培養(yang)(yang)(yang)基變堿、支(zhi)原體(ti)、pH值。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)接(jie)種時(shi)(shi)(shi)呈三角型(xing)(xing)(xing)(xing)狀(zhuang)態(tai)(tai),經培養(yang)(yang)(yang)一定(ding)時(shi)(shi)(shi)間(jian)后,細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)傳代前(qian)已(yi)形(xing)成(cheng)(cheng)(cheng)上(shang)皮(pi)型(xing)(xing)(xing)(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。
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