IPTG異丙(bing)基-β-D-硫代半(ban)乳(ru)糖苷（Sigma/Merck），訂購： 56980388！

中文名稱: 異丙基-β-D-硫代吡喃半乳(ru)糖苷

中文(wen)別名：異丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷,異丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖甙

商品名稱: Isopropyl β-D-1-Thiogalactopyranoside

英文簡稱: IPTG

產品別(bie)名(ming): Isopropyl β-D-Thiogalactoside

CAS : 367-93-1

產品純度(du): Sigma ≥99%, Merck ≥98% 

產品性狀(zhuang): 白色或白色粉末,溶于水后呈清亮無色液體

分 子 式: C9H18O5S

分(fen) 子 量(liang): 238.30

保存(cun)溫度: 2-8°C冷藏(zang)保存(cun) ,配制好后保存(cun)于-20°C，室溫可放置一個月

主要作用：異丙基硫代(dai)半乳(ru)糖苷（IPTG）是一種作用*的誘(you)導劑,不被(bei)細菌代(dai)謝而十分穩定,因此被(bei)實驗(yan)室廣泛(fan)應用

IPTG是(shi)β–半(ban)乳糖(tang)苷(gan)(gan)酶的(de)(de)活(huo)性(xing)(xing)誘導物(wu)質(zhi)。基于這個(ge)特性(xing)(xing)，當pUC系列的(de)(de)載體(ti)(ti)DNA（或(huo)(huo)(huo)其(qi)他帶有lacZ 基因(yin)載體(ti)(ti)DNA）以lacZ 缺失細(xi)胞(bao)為宿(su)主進行轉化時、或(huo)(huo)(huo)用M13噬菌體(ti)(ti)的(de)(de)載體(ti)(ti)DNA進行轉染時，如果(guo)在平(ping)板(ban)培養(yang)基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半(ban)乳糖(tang)苷(gan)(gan)酶的(de)(de)α–互補性(xing)(xing)，可以根據是(shi)否呈(cheng)現白色菌落（或(huo)(huo)(huo)噬菌斑(ban)）而(er)方便地挑選出基因(yin)重(zhong)組體(ti)(ti)。此外，它(ta)還可以作(zuo)為具有lac或(huo)(huo)(huo)tac等啟動子的(de)(de)表達(da)載體(ti)(ti)的(de)(de)表達(da)誘導物(wu)使用。

誘導(dao)原理

首先(xian)

    E.coli的乳(ru)糖操縱子（元）含Z、Y及A三(san)個(ge)結構(gou)基因，分別(bie)編碼半乳(ru)糖苷酶、透酶和乙酰基轉移(yi)酶，此外還有一(yi)(yi)(yi)個(ge)操縱序列(lie)O、一(yi)(yi)(yi)個(ge)啟動(dong)序列(lie)P及一(yi)(yi)(yi)個(ge)調(diao)節 基因I。I基因編碼一(yi)(yi)(yi)種(zhong)阻遏蛋(dan)白，后者與O序列(lie)結合，使(shi)操縱子（元）受阻遏而處于關閉狀態。在(zai)啟動(dong)序列(lie)P上(shang)游(you)還有一(yi)(yi)(yi)個(ge)分解（代謝）物基因激(ji) 活蛋(dan)白（CAP）結合位點(dian)。由(you)P序列(lie)、O序列(lie)和CAP結合位點(dian)共同構(gou)成lac操縱子的調(diao)控區，三(san)個(ge)酶的編碼基因即由(you)同一(yi)(yi)(yi)調(diao)控區調(diao)節，實現基因產物的協調(diao)表達 。

其次

   在(zai)沒有乳(ru)(ru)(ru)糖(tang)存在(zai)時，lac操(cao)縱(zong)子（元(yuan)）處于(yu)阻(zu)遏(e)狀態。此時，I序(xu)列在(zai)PI啟動序(xu)列操(cao)縱(zong)下(xia)表達的(de)Lac阻(zu)遏(e)蛋(dan)白與(yu)O序(xu)列結合(he)，阻(zu)礙(ai)RNA聚合(he)酶與(yu)P序(xu)列結 合(he)，抑制轉錄起動。當(dang)有乳(ru)(ru)(ru)糖(tang)存在(zai)時，lac操(cao)縱(zong)子（元(yuan)）即(ji)可(ke)被(bei)(bei)誘導(dao)。在(zai)這個操(cao)縱(zong)子（元(yuan)）體系(xi)中，真正(zheng)的(de)誘導(dao)劑并非乳(ru)(ru)(ru)糖(tang)本身。乳(ru)(ru)(ru)糖(tang)進(jin)入細胞，經(jing)β-半(ban)乳(ru)(ru)(ru)糖(tang)苷(gan)酶催化(hua)，轉變為半(ban)乳(ru)(ru)(ru)糖(tang)。后者(zhe)作(zuo)為一種誘導(dao)劑分子結合(he)阻(zu)遏(e)蛋(dan)白，使(shi)蛋(dan)白構象變化(hua)，導(dao)致阻(zu)遏(e)蛋(dan)白與(yu)O序(xu)列解(jie)離、發生轉錄。異丙(bing)基硫代半(ban)乳(ru)(ru)(ru)糖(tang)苷(gan)（IPTG）的(de)作(zuo)用(yong)與(yu)半(ban)乳(ru)(ru)(ru)糖(tang)相同，是一 種作(zuo)用(yong)*的(de)誘導(dao)劑，不被(bei)(bei)細菌代謝而十分穩定，因此被(bei)(bei)實驗室(shi)廣泛應用(yong)。

使用方法

    首先把IPTG配制成24 mg/ml（100 μM）的(de)(de)水溶(rong)液，并進行過(guo)濾除(chu)菌(jun)后(hou)(hou)保存。然(ran)后(hou)(hou)在100 ml的(de)(de)瓊脂培養基(ji)中(zhong)，加入100 μl的(de)(de)上(shang)述(shu)溶(rong)液、200 μl的(de)(de)X-Gal（20 mg/ml的(de)(de)二甲(jia)(jia)基(ji)甲(jia)(jia)酰胺（DMF）溶(rong)液）和100 μl的(de)(de)Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養基(ji)。當DNA段(duan)(duan)插入至pUC系列載體(ti)（或(huo)其他帶有(you)lacZ、Amp基(ji)因載體(ti)），然(ran)后(hou)(hou)轉化至lacZ缺失細胞中(zhong)后(hou)(hou)，涂布(bu)上(shang)述(shu)的(de)(de)IPTG、X–Gal、Amp平板培養基(ji)，可根據長出(chu)菌(jun)體(ti)的(de)(de)藍白色(se)，而方便地(di)挑(tiao)選(xuan)出(chu)基(ji)因重組體(ti)（白色(se)為(wei)具有(you)DNA插入片(pian)段(duan)(duan)的(de)(de)基(ji)因重組體(ti)）。

作用

誘導(dao)外(wai)源(yuan)基因的(de)表(biao)達，普遍應(ying)用于原核(he)表(biao)達系統(tong)，使(shi)其表(biao)達量(liang)增高，產物穩定，具有易(yi)鑒(jian)定，易(yi)純化的(de)優點(dian)。

注意事項 ：

   ◆培養噬菌體時(shi)，Top agar中(zhong)的(de)添加量(liang)為：25 μl/3 ml（24 mg/ml）

   ◆含(han)有IPTG的培養(yang)基4℃避光保存，須在1~2周內使用。

包裝(zhuang)報價： 產品來自(zi)Sigma/Merck公司

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