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大鼠血清D-乳酸Elisa試劑盒
實驗方法(fa)(fa): 酶(mei)聯免(mian)疫法(fa)(fa)/酶(mei)免(mian)法(fa)(fa)(ELISA)
檢測原(yuan)理: 采(cai)用雙抗(kang)體夾(jia)心ABC-ELISA法
保存:2-8℃
樣(yang)品(pin)類(lei)型(SAMPLETYPES): 標本必(bi)須為液(ye)(ye)體(ti),不含沉淀。包括血(xue)(xue)清、血(xue)(xue)漿(jiang)、尿液(ye)(ye)、胸腹水、腦脊液(ye)(ye)、細胞培(pei)養上清、組織勻漿(jiang)等。
大鼠血清D-乳酸Elisa試劑盒 樣本處理及要求:
1.血(xue)清(qing):室(shi)溫(wen)血(xue)液自然凝固(gu)10-20分鐘,離心(xin)20分鐘左右(you)(2000-3000轉/分)。仔(zi)細收(shou)集上清(qing),保存過程(cheng)中如出現沉淀(dian),應再次離心(xin)。
2.血漿:應根據標本(ben)的要求選擇EDTA、者檸檬酸(suan)鈉(na)或肝素作為抗凝(ning)劑,混(hun)合10-20分(fen)(fen)鐘(zhong)后,離心20分(fen)(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉/分(fen)(fen))。仔(zi)細收集上清,保存過程中如有沉淀(dian)形成(cheng),應該再次離心。
3.尿液:用無菌管(guan)收(shou)集,離心(xin)20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉/分)。仔細收(shou)集上清,保存過程中如(ru)有沉淀形成,應再次(ci)離心(xin)。胸腹水、腦脊液參(can)照實行。
4.細(xi)胞(bao)培養上(shang)清(qing):檢(jian)測(ce)分泌性(xing)的成(cheng)(cheng)(cheng)份時,用無菌管收集(ji)(ji)。離(li)心20分鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分)。仔(zi)細(xi)收集(ji)(ji)上(shang)清(qing)。檢(jian)測(ce)細(xi)胞(bao)內的成(cheng)(cheng)(cheng)份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xi)胞(bao)懸液(ye),細(xi)胞(bao)濃度達到100萬/ml左(zuo)右(you)。通過反復凍融(rong),以(yi)使細(xi)胞(bao)破壞并放(fang)出細(xi)胞(bao)內成(cheng)(cheng)(cheng)份。離(li)心20分鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分)。仔(zi)細(xi)收集(ji)(ji)上(shang)清(qing)。保存(cun)過程中如有(you)沉(chen)淀(dian)形成(cheng)(cheng)(cheng),應再(zai)次離(li)心。
5.組織標(biao)本(ben):切割標(biao)本(ben)后(hou),稱取重量(liang)。加(jia)入一定(ding)量(liang)的(de)PBS,PH7.4。用(yong)(yong)液(ye)氮迅速冷凍(dong)保(bao)存備用(yong)(yong)。標(biao)本(ben)融(rong)化(hua)后(hou)仍(reng)然保(bao)持2-8℃的(de)溫度。加(jia)入一定(ding)量(liang)的(de)PBS(PH7.4),用(yong)(yong)手(shou)工或勻漿器(qi)將標(biao)本(ben)勻漿充分。離心20分鐘左右(you)(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后(hou)一份(fen)待檢(jian)測,其余冷凍(dong)備用(yong)(yong)。
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