CACo-2人結腸癌細胞 詳細說明：

生(sheng)(sheng)長(chang)狀態：貼壁生(sheng)(sheng)長(chang)

培(pei)養(yang)基類(lei)型：DMEM（Hyclone SH30243.01)培(pei)養(yang)基

FBS（SCL澳洲(zhou)胎(tai)牛血清(貨號:S20100A)): 10%

抗(kang)生素：雙抗(kang)

培(pei)養條件：37℃，CO2: 5%

CACo-2人結腸癌細胞 傳代方法：

到(dao)細(xi)胞(bao)后，在倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)生長狀態(tai)：

如(ru)果(guo)沒(mei)長(chang)滿，將培養(yang)瓶用(yong)75%酒精消毒(du)后在超凈臺(tai)內(nei)更換新鮮培養(yang)液，繼續(xu)培養(yang)。

如(ru)果(guo)細胞已經長滿(man)（約80%-90%）則傳代后繼續培(pei)養。

貼壁細胞(bao)傳代方法：

1 棄去培養基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗(xi)1-2次(ci)。

2 加(jia)1ml 0.25%的胰酶(mei)（含(han)0.02%EDTA），讓胰酶(mei)與大部分(fen)細胞接觸后放(fang)入37℃培(pei)養(yang)箱內，隨時觀察細胞狀態變化，待細胞大部分(fen)變圓后加(jia)*培(pei)養(yang)基終止消化。

懸(xuan)浮細胞傳代方法(fa)：可以(yi)(yi)直接(jie)傳代也可以(yi)(yi)離心法(fa)傳代。

1 直接(jie)傳(chuan)代是讓懸(xuan)(xuan)浮(fu)細胞(bao)慢(man)慢(man)沉淀(dian)在瓶(ping)(ping)底(di)后，將上清吸(xi)掉1/2-2/3，吹打細胞(bao)形成(cheng)細胞(bao)懸(xuan)(xuan)液(ye)后，分別接(jie)種到其他培(pei)(pei)養皿(min)或培(pei)(pei)養瓶(ping)(ping)中繼續(xu)培(pei)(pei)養。

2離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心(xin)管內， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養液到離心管內，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。

 一(yi)般沒有特殊說(shuo)明，細胞(bao)一(yi)般是一(yi)傳二。

凍存方法：70% *培養基，20%FBS，10%DMSO，現用現配(pei)。

儲存(cun)：液氮中長期保存(cun)。

 注意：

1 觀察(cha)細(xi)胞在低倍鏡下觀察(cha)，便于整(zheng)體估計細(xi)胞密度(du)。

2 在運輸過(guo)程中(zhong)可能會(hui)導致一些貼(tie)壁不牢的細胞發生(sheng)部分脫(tuo)落(luo)，可離心吹(chui)打后重新種(zhong)入(ru)瓶中(zhong)培養。

3 收到細胞后若發現培養瓶破損、細胞污染等，請拍照并在三天內與我(wo)們。

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