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S-180細胞,小鼠肛門肉瘤細胞 培養需注意:
細胞培養(yang)實驗所(suo)需的(de)(de)物(wu)品(pin)、器材應(ying)進(jin)(jin)行(xing)(xing)嚴格的(de)(de)滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)菌(jun)或(huo)購買(mai)無菌(jun)的(de)(de)一次性物(wu)品(pin)。玻璃瓶可擰松瓶蓋滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)菌(jun)(指高壓(ya)蒸汽(qi)滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)菌(jun),以下同)或(huo)用(yong)鋁(lv)箔(bo)紙(zhi)包住瓶口,和瓶蓋分別滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)菌(jun)。其(qi)它玻璃和金屬器材用(yong)鋁(lv)箔(bo)紙(zhi)包裹進(jin)(jin)行(xing)(xing)滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)菌(jun)。玻璃吸管應(ying)塞上棉(mian)花球滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)菌(jun),然后置于(yu)烘箱中烘干。不適(shi)于(yu)進(jin)(jin)行(xing)(xing)高壓(ya)滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)菌(jun)的(de)(de)瓶塞等其(qi)它物(wu)品(pin),可浸泡在70%酒精(jing)中進(jin)(jin)行(xing)(xing)滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)菌(jun),然后在超凈工作(zuo)臺(tai)上吹干。細胞培養(yang)液(ye)和其(qi)它不適(shi)于(yu)高壓(ya)滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)菌(jun)的(de)(de)溶液(ye),應(ying)通過過濾(lv)(采用(yong)0.22μm的(de)(de)孔徑(jing)的(de)(de)濾(lv)膜)滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)菌(jun)。無菌(jun)培養(yang)室每天都要用(yong)0.2%的(de)(de)新(xin)潔(jie)爾(er)滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)拖地面一次,并用(yong)紫(zi)外線(xian)照射(she)滅(mie)(mie)(mie)(mie)(mie)菌(jun)30分鐘。超凈工作(zuo)臺(tai)每次使用(yong)前(qian)用(yong)70%酒精(jing)擦(ca)拭,然后紫(zi)外線(xian)照射(she)30分鐘。
進(jin)(jin)(jin)入(ru)無菌(jun)(jun)操(cao)作(zuo)(zuo)室(shi)要(yao)求穿著無菌(jun)(jun)工(gong)(gong)(gong)作(zuo)(zuo)服、工(gong)(gong)(gong)作(zuo)(zuo)帽、口(kou)(kou)罩。開(kai)始工(gong)(gong)(gong)作(zuo)(zuo)前用(yong)70%酒(jiu)精對手、前臂及(ji)乳膠手套進(jin)(jin)(jin)行消(xiao)毒。細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)等操(cao)作(zuo)(zuo)應在(zai)超凈(jing)(jing)工(gong)(gong)(gong)作(zuo)(zuo)臺或(huo)有(you)(you)空(kong)氣過(guo)(guo)濾器(qi)的(de)(de)空(kong)間(jian)內進(jin)(jin)(jin)行。操(cao)作(zuo)(zuo)前點燃酒(jiu)精燈,細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)的(de)(de)所有(you)(you)操(cao)作(zuo)(zuo),如打開(kai)或(huo)關(guan)上試管或(huo)培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)蓋(gai)等,都(dou)要(yao)靠(kao)近(jin)酒(jiu)精燈并經過(guo)(guo)短時間(jian)的(de)(de)灼燒(shao)。燒(shao)過(guo)(guo)的(de)(de)實驗器(qi)械(xie),冷卻后(hou)才能(neng)使(shi)用(yong)。已吸(xi)過(guo)(guo)培(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)或(huo)其(qi)它有(you)(you)機液(ye)體(ti)的(de)(de)吸(xi)管不(bu)得再用(yong)火焰燒(shao)灼。不(bu)同液(ye)體(ti)分別用(yong)不(bu)同的(de)(de)吸(xi)管吸(xi)取,不(bu)能(neng)混用(yong)。開(kai)蓋(gai)后(hou)的(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)盡量(liang)避(bi)免(mian)垂直放(fang)置,同時瓶(ping)蓋(gai)應扣放(fang)在(zai)超凈(jing)(jing)工(gong)(gong)(gong)作(zuo)(zuo)臺上,以減(jian)少落入(ru)細(xi)菌(jun)(jun)的(de)(de)機會。細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)物在(zai)處理和使(shi)用(yong)前,不(bu)要(yao)過(guo)(guo)早暴露于(yu)空(kong)氣中(zhong)。在(zai)進(jin)(jin)(jin)行轉移液(ye)體(ti)操(cao)作(zuo)(zuo)時,移液(ye)器(qi)不(bu)能(neng)觸及(ji)瓶(ping)口(kou)(kou)以避(bi)免(mian)細(xi)菌(jun)(jun)污(wu)(wu)染或(huo)交叉污(wu)(wu)染。放(fang)置吸(xi)管時管口(kou)(kou)向下傾斜(xie),以防止液(ye)體(ti)倒流引(yin)起污(wu)(wu)染。培(pei)(pei)養(yang)(yang)細(xi)胞(bao)的(de)(de)廢棄用(yong)品,應放(fang)入(ru)可封(feng)裝的(de)(de)容(rong)器(qi)內。
S-180細胞,小鼠肛門肉瘤細胞 的凍存
細胞凍存的原則是要逐步緩慢降溫,以避免細胞內部形成冰晶對細胞造成傷害。
1) 貼壁細胞經消化、離心收集,懸浮細胞經離心收集;
2) 大約106個細胞加入1ml凍存液(細胞培養液和10%DMSO),用吸管吹打,使細胞分散成單細胞懸液;
3) 加入到凍存管中。如用1.8ml的凍存管,每管不要加入超過1.5ml的細胞懸液;
4) 在凍存管上標明細胞名稱及凍存日期;
5) 用厚布或衛生紙包裹凍存管,置于4℃半小時,然后置于-20℃兩小時,再置于-40℃兩小時,然后置于液氮上方置夜;第二天將細胞置于液氮中;如果僅想提取細胞內的東西可以直接放在-20度的冰箱中。
6) 記下凍存管存放的位置,作好凍存記錄。
其他細胞:
MA-h細胞(bao) BHK-21細胞 HBF細胞BHK-21細胞(bao) MM細胞(bao) HDF-a細(xi)胞 HSkMC細(xi)胞(bao)HBMEC細胞 MLF細胞 HHDPC細胞(bao) HSk95D細胞HBVSMC細胞(bao) MREpiC細胞 HHZMC細胞(bao) HSkMM細胞HBVAF細胞 MCM細胞 HHorSC細胞(bao) HACC細胞HBVP細胞 MMSC-bm細胞 HHirSC細(xi)胞 HRGEC細胞HCPEC細(xi)胞 MEF細(xi)胞 HHFK細(xi)胞(bao) HRPTEpiC細胞(bao)BHK-21細胞 MEF-mt細胞 HLEC細胞HRCEpiC細胞HCPF細胞 RPC細胞 HLF細胞 HREpiC細胞HMC細胞 RMC細胞(bao)HOK細胞 HRMC細(xi)胞HN細(xi)胞(bao) RNr細胞 HGF細胞 HBdMEC細胞HCGC細(xi)胞 RNsn細胞 HPDLF細胞(bao) HBdSMC細胞HN-h細胞 RGC細胞 HEEC細(xi)胞 HUC細胞(bao)
HOPC細胞 RHh細胞(bao) HESMC細(xi)胞 HBdSF細(xi)胞HOPC-os細胞 BHK-21細胞HGSMC細胞 HPEpiC細胞HO細胞 RNs細胞 HIMEC細胞 BHK-21細胞HSC細胞 RSCMN細胞 HISMC細胞 HPSMC細胞(bao)HPNC細(xi)胞 RDSCI細胞 HCMEC細胞HCO細胞HA細胞 RVSCI細胞 HCSMC細胞 HS細胞Hac細胞 ROPC細胞 HPMEC細胞(bao) HNPC細胞HA-sp細胞 RSC細胞 HPAEC細胞 HAFC細(xi)胞HA-h細(xi)胞RPNF細(xi)胞 HPASMC細胞 HHSEC細胞HM細胞(bao) RA細胞 HPAF細胞 HH細胞
95D細胞 RAc細(xi)胞 HPAEpiC細胞 HHSteC細胞HDLEC細(xi)胞 RAh細胞(bao)HBEpiC細(xi)胞 HCAEC細胞(bao)HDSMC細胞 RM細胞 HTEpiC細胞 HAEC細胞HEK-n細(xi)胞 RLF細胞 HSAEpiC細胞(bao) HASMC細胞HEK-a細胞 RRTEpiC細胞HPF細(xi)胞 HAF細胞HEM細胞 RCM細(xi)胞(bao) HBSMC細胞 HCM細胞HDF-f細胞RMSC-bm細胞 HTSMC細(xi)胞 HCMa細(xi)胞MH-h細胞 HTMC細(xi)胞 HMSC-bm細胞(bao)HCF細胞BHK-21細胞 HConEpiC細胞 HMSC-ad細胞 HCFav細胞MGC細(xi)胞HAEpic細胞 HMSC-HE細胞 HCFaa細胞MN-vsc細胞 HVMF細(xi)胞 HU95D細胞HcorF細胞MN-dsc細胞 HA95D細胞 HP95D細胞 HREC細胞(bao)MOPC細胞 HPA-v細胞 HVMSC cDNA細(xi)胞 HRPEpiC細胞95D細胞 HPA-s細胞 HMMEC細胞HLEpiC細胞MPNF細胞 HOMEC細胞 HMEpiC細胞 HIPEpiC細(xi)胞(bao)MA細胞HOSEpiC細胞 HMF細胞 HConF細胞MA-c細胞(bao) HOF細胞(bao) HVVEC細胞(bao)HNPCEpiC細胞HUAEC細胞(bao) MPC細胞(bao) MN-sn細胞 HDMEC細胞BHK-21細(xi)胞MMC細胞 BHK-21細胞 HUVSMC細胞HUASMC細胞 MN-r細胞 HCPEpiC細胞(bao)BHK-21細胞MN-c細(xi)胞 HPrF細(xi)胞 HDF-n細胞 RNc細(xi)胞(bao)