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AGS細胞(bao)培養,人胃癌細胞(bao)株
細胞名稱 | 胃癌(ai)細胞株AGS |
種屬 | 人 |
組織來源 | 胃(wei) |
生長(chang)狀態 | 貼壁生長 |
細胞(bao)形態 | 上皮樣 |
培養條件(jian) | 培養基類型:RPMI1640(Hyclone SH30809.01B)培養基 FBS(BOVOGEN胎牛血(xue)清貨號:SFBS-B): 10% 抗生素:雙抗 培養(yang)條件(jian):37℃,CO2: 5% |
傳代(dai)方法(fa) | 收(shou)到細(xi)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xi)胞生長(chang)狀態(tai): 如果沒長(chang)滿,將培養瓶用(yong)75%酒精消毒(du)后在(zai)超凈臺內更換新鮮培養液,繼(ji)續(xu)培養。 如果細胞已經長滿(man)(約80%-90%)則(ze)傳代(dai)后繼續培(pei)養。 貼壁細(xi)胞傳代(dai)方(fang)法: 1 棄去培(pei)養基,用不含鈣、鎂離(li)子的PBS洗1-2次。 2 加1ml 0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分(fen)細(xi)(xi)(xi)胞接觸(chu)后放入37℃培養箱(xiang)內,隨時觀察細(xi)(xi)(xi)胞狀(zhuang)態(tai)變化(hua),待細(xi)(xi)(xi)胞大部分(fen)變圓(yuan)后加*培養基終(zhong)止消化(hua)。 懸浮細胞傳代(dai)方法:可(ke)以直接傳代(dai)也可(ke)以離心法傳代(dai)。 1 直接傳代是讓懸浮細胞(bao)慢慢沉淀(dian)在(zai)瓶底后(hou),將上清吸掉1/2-2/3,吹打(da)細胞(bao)形成細胞(bao)懸液后(hou),分別接種到其他培養皿或培養瓶中(zhong)繼續培養。 2離心法(fa)傳代是將(jiang)細胞連(lian)同培養液一并轉移到離心管內(nei), 1000rpm,5分鐘(zhong),去除上清,加新的培養液到(dao)離心管內(nei),吹打(da)細胞(bao)形成細胞(bao)懸液(ye)后,分別(bie)接(jie)種到其他培養(yang)皿(min)或培養(yang)瓶中繼(ji)續培養(yang)。 一(yi)般(ban)沒有特殊說明,細胞(bao)一(yi)般(ban)是一(yi)傳二(er)。 |
凍存方法 | 70% *培養基,20%FBS,10%DMSO,現用現配。 儲存:液(ye)氮中(zhong)長期保存。 |
注 | 1 觀察細胞在低倍鏡下觀察,便(bian)于整(zheng)體估計細胞密度。 2 在運(yun)輸過程中可能會(hui)導致(zhi)一些貼(tie)壁不牢的細胞(bao)發生部(bu)分脫(tuo)落,可離心吹打(da)后(hou)重新種入(ru)瓶中培養。 3 收到細(xi)胞后(hou)若發現培養瓶破(po)損、細(xi)胞污(wu)染等,請拍(pai)照并在三天內與我們。 |