CCRF CEM[人急性淋巴細胞白(bai)血病細胞T淋巴細胞]簡介：

產品名稱：CCRF-CEM細胞

中文名稱：人急性(xing)淋(lin)巴(ba)細胞白血病細胞T淋(lin)巴(ba)細胞

簡稱：CCRF-CEM

用途：僅供科學研究使用

代(dai)數：第四代(dai)

特惠價格：致(zhi)電(dian)

復(fu)蘇周(zhou)期：10個工作日內

細(xi)胞(bao)(bao)背景：G.E. Foley 等(deng)人建立了類淋巴(ba)母(mu)細(xi)胞(bao)(bao)細(xi)胞(bao)(bao)株CCRF-CEM。細(xi)胞(bao)(bao)是1964年11月(yue)從一位(wei)四歲白(bai)人女性急性淋巴(ba)細(xi)胞(bao)(bao)白(bai)血病患(huan)者的外周血白(bai)血球衣(yi)中得到。

CCRF CEM[人急性(xing)淋巴(ba)細(xi)(xi)胞白血病細(xi)(xi)胞T淋巴(ba)細(xi)(xi)胞]特性

1）  來源：白血病, 急性淋巴細胞白血病, 外(wai)周血, T淋巴母細胞

2）  形態(tai)：淋(lin)巴(ba)母細胞

3）  含(han)量(liang)：>1x106 個/mL

4）  污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢(jian)測為(wei)陰性(xing)

5）  規格：T75瓶或者1mL凍存管包裝

CCRF CEM[人急(ji)性淋巴細(xi)胞(bao)白血病細(xi)胞(bao)T淋巴細(xi)胞(bao)]運(yun)輸(shu)和(he)保存(cun)：

使(shi)用含有優質胎(tai)牛(niu)血清(qing)的2ml凍存(cun)管發送(song)存(cun)活細(xi)(xi)胞(bao)。收到細(xi)(xi)胞(bao)后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作(zuo)臺(tai)棄去上清(qing)，加入推薦使(shi)用的培(pei)養基后轉移至10cm培(pei)養皿(min)或(huo)者T75培(pei)養瓶中培(pei)養，傳代達到細(xi)(xi)胞(bao)生長(chang)狀態良好時，再進行凍存(cun)。具(ju)體操作(zuo)見(jian)細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養步驟。

CCRF CEM[人急性淋巴細胞(bao)白血病(bing)細胞(bao)T淋巴細胞(bao)]培養(yang)步驟(zou)

一．培(pei)養基(ji)及(ji)培(pei)養凍存條件(jian)準(zhun)備：

1） 準備RPMI-1640培養基(ji)(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hao)31800022, 添加(jia)NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖(tang)2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血(xue)清，10%。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫(wen)度(du)：37攝氏度(du)，培養箱濕度(du)為(wei)70%-80%。

3） 凍存液：90%*培(pei)養基，10%DMSO，現用(yong)現配。液氮儲存。

二．細(xi)胞(bao)處理：

1）復蘇(su)細胞(bao)(bao)：將(jiang)含有1mL細胞(bao)(bao)懸液的凍存管在(zai)37℃水浴(yu)中(zhong)迅速搖(yao)晃解凍，加(jia)入4mL培(pei)養(yang)基混(hun)合均勻。在(zai)1000RPM條件下離心(xin)4分(fen)鐘，棄去上清液，補加(jia)1-2mL培(pei)養(yang)基后(hou)吹勻。然后(hou)將(jiang)所有細胞(bao)(bao)懸液加(jia)入培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)隔(ge)(ge)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞(bao)(bao)懸液加(jia)入10cm皿中(zhong)，加(jia)入約8ml培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)隔(ge)(ge)夜(ye)）。第二(er)天換液并檢查(cha)細胞(bao)(bao)密度。

2）細胞(bao)傳代(dai)：如果細胞(bao)密度達(da)80%-90%，即可進行傳代(dai)培養。

對于(yu)懸浮(fu)細胞，傳(chuan)代可參考(kao)以下方法(fa)：

方(fang)法一：收集細胞，1000RPM條(tiao)件(jian)下離心4分鐘，棄去(qu)上清液(ye)，補加(jia)1-2mL培養液(ye)后吹勻，將細胞懸液(ye)按1：2到(dao)1：5的(de)比例分到(dao)新的(de)含(han)8ml培養基的(de)新皿中或者(zhe)瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞(bao)懸(xuan)起，將細胞(bao)懸(xuan)液按1：2到1：3的(de)(de)(de)比例分到新(xin)的(de)(de)(de)含(han)8ml培養基的(de)(de)(de)新(xin)皿(min)中或者瓶(ping)中。

3）細胞(bao)凍存(cun)：待細胞(bao)生長狀態良好時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞(bao)凍存(cun)。懸浮細胞(bao)凍存(cun)時(shi)，應將細胞(bao)收集(ji)，1000RPM條件下離心4分鐘，少量(liang)保存(cun)上清液（防止細胞(bao)吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存(cun)管中(zhong)，在凍存(cun)管中(zhong)加入10%DMSO后進(jin)行凍存(cun)。

CCRF CEM[人急性淋(lin)巴(ba)細胞(bao)白血病細胞(bao)T淋(lin)巴(ba)細胞(bao)]注意事(shi)項：

1. 收到細(xi)胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損(sun)及細(xi)胞有污染，請立(li)即(ji)與我們。

2. 所(suo)有動(dong)物(wu)細胞(bao)均視為有潛在的生物(wu)危害性(xing)，必須(xu)在二級(ji)生物(wu)安全(quan)臺內操作，并請注(zhu)意防護，所(suo)有廢液及(ji)接觸過(guo)此細胞(bao)的器皿需(xu)要(yao)滅菌后方能丟棄。