BALL-1細(xi)胞，人B淋巴細(xi)胞白血病細(xi)胞簡介：

細胞(bao)株名稱：BALL-1，人B淋巴(ba)細胞(bao)白(bai)血病細胞(bao)

種屬：人

生(sheng)長特性：懸浮(fu)生(sheng)長

形態特征：淋巴細胞樣

微生物及支原體(ti)檢測：陰性

細胞(bao)背(bei)景：該細胞(bao)系來源于(yu)一典型(xing)的(de)人(ren)B淋巴細胞(bao)白血病病人(ren)。

來源(yuan)：日本INKEN中心

安(an)全性(xing)：所(suo)有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害(hai)性(xing)，必須在二級生物安(an)全臺(tai)內操作，并(bing)請注意防(fang)護，所(suo)有廢液(ye)及接觸過此細胞的器皿需高壓(ya)滅菌(jun)后方(fang)能丟(diu)棄。

BALL-1細胞(bao)，人B淋(lin)巴細胞(bao)白血病細胞(bao)培養(yang)條件：

*培養(yang)基：90%1640+10%胎(tai)牛血清

血清我(wo)們推薦用:

BOVOGEN 胎牛血清 貨號：SFBS。

培養條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%

BALL-1細胞，人B淋(lin)巴細胞白血(xue)病細胞傳代方法：

1、收到(dao)細胞，請(qing)查看瓶(ping)子是(shi)否(fou)有(you)破裂，培(pei)養基是(shi)否(fou)漏出，是(shi)否(fou)渾濁，如有(you)請(qing)盡快。

2、收到(dao)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，如包裝完好，請在顯微鏡下(xia)(xia)觀(guan)察細(xi)(xi)胞(bao)(bao)。,由于(yu)(yu)運輸過程中(zhong)的(de)問(wen)題，細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)貼壁(bi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)有可能從瓶(ping)壁(bi)中(zhong)脫(tuo)落下(xia)(xia)來(lai)，顯微鏡下(xia)(xia)觀(guan)察會(hui)出(chu)現細(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)浮的(de)情況，出(chu)現此狀態時(shi)，請不(bu)要(yao)打開細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養瓶(ping)，先(xian)不(bu)要(yao)把培(pei)養基吸出(chu)來(lai)。應立(li)即將培(pei)養瓶(ping)置(zhi)于(yu)(yu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養箱里靜(jing)止3-5小時(shi)左(zuo)右(you)，讓細(xi)(xi)胞(bao)(bao)先(xian)穩(wen)定(ding)下(xia)(xia)，再于(yu)(yu)顯微鏡下(xia)(xia)觀(guan)察，此時(shi)多數細(xi)(xi)胞(bao)(bao)會(hui)重新貼附于(yu)(yu)瓶(ping)壁(bi)。如細(xi)(xi)胞(bao)(bao)仍不(bu)能貼壁(bi)，請用臺(tai)盼(pan)藍染(ran)色(se)法鑒定(ding)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)活(huo)(huo)力，如臺(tai)盼(pan)藍染(ran)色(se)證實(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)活(huo)(huo)力正常請按懸(xuan)浮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)方法處理(li)

3. 收到(dao)細(xi)胞時(shi)如無(wu)異常情(qing)況 ，請在顯微鏡下觀察細(xi)胞密度(du)(du)，如為貼壁細(xi)胞，未超過80%匯合度(du)(du)時(shi)，用(yong)75%酒精（建(jian)議配置75%酒精的水也是滅菌(jun)超純(chun)水。噴灑整個瓶(ping)消毒后放(fang)到(dao)超菌(jun)臺內(nei)，嚴格(ge)無(wu)菌(jun)操作：然后打開(kai)蓋(gai)子，先用(yong)槍頭把培(pei)養(yang)基吸(xi)出10ML左(zuo)右，放(fang)在離心(xin)管里(li)，然后瓶(ping)口過火，（嚴禁直接(jie)傾倒），這樣可(ke)以保證不污染，再用(yong)10ML的移(yi)液管，將(jiang)剩余(yu)的培(pei)養(yang)基全(quan)部吸(xi)出，放(fang)于離心(xin)管中，培(pei)養(yang)瓶(ping)中只(zhi)剩余(yu)5-10ML左(zuo)右培(pei)養(yang)液繼續培(pei)養(yang)就可(ke)以了）：超過80%匯合度(du)(du)時(shi)，請按(an)細(xi)胞培(pei)養(yang)條件(jian)傳代培(pei)養(yang)。

如(ru)為懸浮細(xi)胞，吸出培(pei)養液，1000轉/分鐘離心3-5分鐘，吸出上清，管底細(xi)胞用新鮮培(pei)養基懸浮細(xi)胞后移(yi)回培(pei)養瓶。

4，將培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)置于37℃培(pei)養(yang)(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)(yang)，蓋子微微擰(ning)松(song)。吸出的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)基可以保存(cun)在(zai)滅菌過(guo)的(de)(de)瓶(ping)子里，存(cun)放于4℃冰(bing)箱(xiang)，以備(bei)不(bu)時(shi)之需。第二天換液(ye)時(shi)，要配制新鮮的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)基和(he)進口(kou)胎牛血清(qing)。這樣對細(xi)胞生長更好。不(bu)要再(zai)用我(wo)們原瓶(ping)的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)基了。

5 、24小時后，細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)形(xing)態已恢(hui)復并貼(tie)滿瓶(ping)壁(bi)(bi)，就可(ke)以(yi)(yi)(yi)傳代了。（貼(tie)壁(bi)(bi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)）將培(pei)(pei)養瓶(ping)里(li)的(de)培(pei)(pei)養基(ji)倒去(qu)，加(jia)(jia)3-5ml（以(yi)(yi)(yi)能覆蓋細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)生長(chang)面(mian)為(wei)準）PBS或Hanks’液洗滌(di)后棄去(qu)。加(jia)(jia)0.5-1ml  0.25%含EDTA的(de)胰酶消(xiao)化(hua)(hua)，消(xiao)化(hua)(hua)時間以(yi)(yi)(yi)具體(ti)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)為(wei)準，一(yi)般(ban)1-3分(fen)鐘(zhong)，不超過5分(fen)鐘(zhong)。可(ke)以(yi)(yi)(yi)放入(ru)37℃培(pei)(pei)養箱消(xiao)化(hua)(hua)。輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)晃動瓶(ping)壁(bi)(bi)，見細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)脫(tuo)落(luo)下來，加(jia)(jia)入(ru)3-5ml培(pei)(pei)養基(ji)終止消(xiao)化(hua)(hua)。用(yong)(yong)移液管(guan)輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹(chui)打(da)瓶(ping)壁(bi)(bi)上的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，使之*脫(tuo)落(luo)，然(ran)后將溶液吸(xi)入(ru)離(li)心(xin)管(guan)內離(li)心(xin)，1000rpm/5min。棄上清，視細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)數(shu)量決(jue)定(ding)分(fen)瓶(ping)數(shu)，一(yi)般(ban)一(yi)傳二，如(ru)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)量多(duo)(duo)可(ke)一(yi)傳三，有些(xie)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)不易傳得過稀，有些(xie)生長(chang)較快的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)則(ze)可(ke)以(yi)(yi)(yi)多(duo)(duo)傳幾瓶(ping)，以(yi)(yi)(yi)具體(ti)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)和(he)經驗為(wei)準。（懸(xuan)浮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)）用(yong)(yong)移液管(guan)輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹(chui)打(da)瓶(ping)壁(bi)(bi)，直接將溶液吸(xi)入(ru)離(li)心(xin)管(guan)離(li)心(xin)即(ji)可(ke)。

6，貼(tie)壁(bi)細(xi)胞 ，懸浮細(xi)胞。嚴格無菌操(cao)作(zuo)。換(huan)液時(shi)，換(huan)新(xin)的(de)細(xi)胞培養(yang)(yang)(yang)瓶和換(huan)新(xin)鮮的(de)培養(yang)(yang)(yang)液和進口胎牛血清(qing)，37度    5%CO2 培養(yang)(yang)(yang)

7.  收到(dao)細(xi)胞(bao)后，請鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)，用(yong)恰當方式處(chu)理(li)細(xi)胞(bao)。若懸浮的(de)細(xi)胞(bao)較(jiao)多，請離(li)心收集細(xi)胞(bao)，接種到(dao)一個新(xin)的(de)培(pei)養瓶中。棄掉原液，使(shi)用(yong)新(xin)鮮(xian)配制的(de)培(pei)養基，使(shi)用(yong)進口胎(tai)牛血清(qing)(qing). 剛(gang)接到(dao)細(xi)胞(bao)，若細(xi)胞(bao)不多時 血清(qing)(qing)濃(nong)度(du)可以加(jia)到(dao)15％去培(pei)養。若細(xi)胞(bao)迏(ti)到(dao)80%左右 ，血清(qing)(qing)濃(nong)度(du)還是(shi)在10％。

BALL-1細胞，人B淋巴細胞白(bai)血病細胞凍存方法:

凍存液：90%胎牛血(xue)清，10%DMSO

儲(chu)存：液(ye)氮(dan)儲(chu)存