大鼠胰島β細胞瘤細胞，ATCC RIN-m5F細胞 簡(jian)介：

產品名稱：RIN-m5F細胞

中(zhong)文(wen)名稱：大鼠β胰(yi)島素瘤細胞

來(lai)源：美國ATCC

形態特(te)性：上(shang)皮細胞樣

生長特性：貼壁生長

特(te)征特(te)性：該細(xi)胞(bao)是大鼠胰島細(xi)胞(bao)RIN-m的(de)克隆(long)，分(fen)泌胰島素(su)及(ji)L型多巴脫羧酶，不產生(sheng)生(sheng)長激素(su)抑制激素(su)。

培養(yang)條件：RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS

傳代(dai)方法(fa)：1:3～1:6傳代(dai)，每周換液2～3次

復蘇周期：10個工作日(ri)

代(dai)數：3-5代(dai)

運送方(fang)式：聯邦快遞

安全性：所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物(wu)(wu)危(wei)害性，必須(xu)在二級生物(wu)(wu)安全臺內操(cao)作，并請注意防護，所有廢液及(ji)接觸過此細胞的器(qi)皿需(xu)高(gao)壓滅菌后方(fang)能(neng)丟棄。

大鼠胰島β細胞瘤細胞，ATCC RIN-m5F細胞接收后的操作流(liu)程與注意事(shi)項

1.如(ru)果細(xi)胞(bao)(bao)為貼壁細(xi)胞(bao)(bao)，，而收到時呈懸(xuan)浮(fu)或(huo)者(zhe)部分懸(xuan)浮(fu)的(de)(de)(de)(de)狀態，請將(jiang)懸(xuan)浮(fu)的(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)即(ji)時離心，加15%血(xue)清的(de)(de)(de)(de)*培(pei)(pei)養(yang)(yang)基到新的(de)(de)(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)皿/瓶繼續培(pei)(pei)養(yang)(yang)3天；同時原(yuan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶中(zhong)剩下(xia)的(de)(de)(de)(de)貼壁細(xi)胞(bao)(bao)更換(huan)為15%血(xue)清的(de)(de)(de)(de)*培(pei)(pei)養(yang)(yang)基，培(pei)(pei)養(yang)(yang)3天。3天后若原(yuan)瓶或(huo)者(zhe)新瓶中(zhong)的(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)都沒有出現(xian)增殖而是(shi)繼續脫落死亡，請及時實驗(yan)室(shi)，技(ji)術人員會(hui)跟進解決。

2.貼壁細胞(bao)生(sheng)長(chang)緩慢：適當提高血清濃(nong)度(du)（zui高不(bu)能超過20%），或可根據該細胞(bao)生(sheng)長(chang)密度(du)，考慮胰酶消化(hua)后(hou)，轉移到新的培養(yang)瓶繼續培養(yang)

3.生(sheng)長(chang)不均：貼壁細胞(bao)若出現分布不均，成島狀(zhuang)生(sheng)長(chang)，可將細胞(bao)進行消化，重懸打散細胞(bao)，加入新鮮培養基進行培養

  常規(gui)培(pei)養傳(chuan)代流程（請嚴格遵照(zhao)無菌(jun)操作）：

1.吸(xi)出原培(pei)養(yang)瓶中的培(pei)養(yang)基，PBS緩沖液潤洗細胞(bao)兩次，加2~3 ml  0.25%胰(yi)酶進行消化(hua)細胞(bao)（注意把握(wo)消化(hua)時間，通常控制(zhi)在1-2min）

2.鏡下觀察消化(hua)情況，在細(xi)胞(bao)邊緣縮(suo)小，貼壁(bi)松動時（不建議消化(hua)到細(xi)胞(bao)漂浮）去掉胰酶，加6~8ml *培養基，輕輕吹打細(xi)胞(bao)層(ceng)，盡量把細(xi)胞(bao)層(ceng)吹落，吹散

3.取部分(fen)細胞懸(xuan)液轉移(yi)到新的培(pei)養皿/瓶中(zhong)，添(tian)加適當的*培(pei)養基，，把細胞懸(xuan)液打勻，于(yu)培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養

4.注(zhu)意培養基(ji)PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存

 特別注意：（如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養，建議添加雙抗培養）

1.收到細胞(bao)后(hou)請盡快更換為含15%血(xue)清(qing)的(de)新鮮培(pei)養基(ji)，如因特殊情(qing)況需要繼續使用原瓶(ping)培(pei)養基(ji)，請在原瓶(ping)培(pei)養基(ji)中額外添加10%的(de)血(xue)清(qing)（原瓶(ping)培(pei)養基(ji)的(de)繼續使用時間zui長不(bu)宜(yi)超過72小時）

2.貼壁細胞收(shou)到當天切忌立(li)刻消(xiao)化，請(qing)(qing)將細胞換(huan)液后放置培養箱孵(fu)育隔(ge)夜(ye)到第二(er)天再(zai)做消(xiao)化傳(chuan)代，請(qing)(qing)優先選擇直(zhi)徑6cm的培養皿進行傳(chuan)代培養

3.如(ru)簽收時出現培養瓶(ping)壁破裂，漏液等(deng)情(qing)況請及時做好照片(pian)記錄并實(shi)驗室。