人骨肉(rou)瘤細胞，U-2OS 簡(jian)介：

細胞(bao)名稱：U-2 OS人骨肉瘤細胞(bao)

性別：女

組織來源：骨；骨肉(rou)瘤

細胞形態：上皮細胞

細(xi)胞(bao)背景：J. Ponten and E. 這株細(xi)胞(bao)(原(yuan)名2T)源自15歲女(nv)孩的脛骨(gu)中等分(fen)化的肉(rou)瘤。 與WI-38共(gong)培(pei)養或CF檢測(ce)SV40，RSV或腺(xian)病毒時未檢測(ce)到病毒。 1972年發現支原(yuan)體(ti)污染并去(qu)除。 在(zai)本庫(ku)通過(guo)支原(yuan)體(ti)檢測(ce)。 在(zai)本庫(ku)通過(guo)STR檢測(ce)。

培養條件：RPMI-1640(GIBCO,貨(huo)號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，85%；熱(re)滅活馬血清，10%；優(you)質胎牛血清，5%。 氣(qi)相：空氣(qi)，95%；二氧(yang)化(hua)碳，5%。 溫(wen)度：37攝氏度。

人骨肉瘤細胞，U-2OS 細胞處理(li)：

1）復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：將含有(you)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的(de)凍(dong)存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍(dong)，加(jia)(jia)(jia)入4mL培(pei)養(yang)基(ji)混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清(qing)液(ye)，補加(jia)(jia)(jia)1-2mL培(pei)養(yang)基(ji)后吹(chui)勻。然后將所有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)(jia)(jia)入培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)隔夜（或將細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)(jia)(jia)入10cm皿中，加(jia)(jia)(jia)入約8ml培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)隔夜）。第二天換液(ye)并檢查細(xi)胞(bao)密度。

2）細(xi)胞傳代：如果(guo)細(xi)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yang)。

對(dui)于(yu)貼(tie)壁細胞，傳代(dai)可(ke)參考以下方(fang)法：

1. 棄去培(pei)養上(shang)清(qing)，用不含(han)鈣、鎂離子的(de)PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

2. 加2ml消(xiao)(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培(pei)(pei)養(yang)瓶中(zhong)，置于(yu)37℃培(pei)(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)(xiao)化1-2分(fen)鐘，然(ran)后(hou)(hou)在顯微鏡下(xia)觀察細胞(bao)消(xiao)(xiao)化情(qing)況，若細胞(bao)大(da)部分(fen)變圓(yuan)并脫落(luo)，迅速拿(na)回(hui)操作(zuo)臺，輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)(pei)養(yang)瓶后(hou)(hou)加少量(liang)培(pei)(pei)養(yang)基終(zhong)止消(xiao)(xiao)化。

3. 按(an)6-8ml/瓶補(bu)加培(pei)(pei)養基，輕(qing)輕(qing)打勻后吸出，在1000RPM條(tiao)件下(xia)離心4分鐘，棄去上清(qing)液，補(bu)加1-2mL培(pei)(pei)養液后吹勻。

4. 將細胞懸(xuan)液(ye)按1：2到(dao)1：5的比(bi)例(li)分到(dao)新(xin)的含8ml培養基(ji)的新(xin)皿中或者瓶中。

3）細胞(bao)(bao)凍(dong)存：待細胞(bao)(bao)生長狀態良好(hao)時(shi)，可進行細胞(bao)(bao)凍(dong)存。貼壁細胞(bao)(bao)凍(dong)存時(shi)，棄去(qu)培養基后加(jia)入少(shao)量胰(yi)酶(mei)，細胞(bao)(bao)變圓脫落后，加(jia)入約1ml含(han)血清的培養基后加(jia)入凍(dong)存管中，再添加(jia)10%DMSO后進行凍(dong)存。

注意(yi)事項：

1)收到細(xi)胞(bao)后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管(guan)瓶(ping)蓋脫落、破損及細(xi)胞(bao)有污染，請立即(ji)與(yu)我(wo)們。

2) 所有動物細胞均視為有潛在的(de)生物危害性(xing)，必須在二(er)級生物安全臺(tai)內操(cao)作，并(bing)請注意防護，所有廢液及(ji)接觸(chu)過此細胞的(de)器皿需要滅菌后方(fang)能丟棄。

相關主要細胞株細胞系(xi)：

產品名稱    簡稱    分類(lei)   

人骨肉瘤細胞(bao)    HOS 骨，軟骨，肌(ji)肉 

人骨(gu)肉(rou)瘤細胞    U-2OS   骨(gu)，軟骨(gu)，肌肉(rou)

人成骨(gu)(gu)肉(rou)瘤細(xi)胞  MG-63   骨(gu)(gu)，軟骨(gu)(gu)，肌肉(rou) 

人骨(gu)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao)    SW1353  骨(gu)，軟骨(gu)，肌(ji)肉(rou) 

熒光素(su)酶轉染人成骨(gu)(gu)肉(rou)瘤細胞  U2OS-LucteT-on  骨(gu)(gu)，軟骨(gu)(gu)，肌肉(rou)

人骨(gu)肉瘤(liu)細胞   ; U2OSE6Tet6  骨(gu)，軟骨(gu)，肌肉 

人骨肉(rou)瘤(liu)細胞(bao)    SF-86   骨，軟骨，肌(ji)肉(rou)

人成(cheng)骨(gu)肉瘤細胞  well2   骨(gu)，軟骨(gu)，肌肉 

人成骨(gu)肉瘤(liu)細胞  LZJ 骨(gu)，軟骨(gu)，肌肉 

人成骨肉瘤細胞  well5   骨，軟骨，肌(ji)肉 

人成骨(gu)(gu)肉瘤細(xi)胞  Saos-2  骨(gu)(gu)，軟骨(gu)(gu)，肌肉

小鼠骨(gu)肉瘤成(cheng)骨(gu)細胞  K7M2wt[K7M2-WT] 骨(gu)，軟骨(gu)，肌肉 

大鼠骨(gu)肉瘤細胞  UMR-106 骨(gu)，軟骨(gu)，肌肉