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人(ren)骨(gu)肉瘤(liu)細(xi)胞,U-2OS 簡介(jie):
細(xi)胞名(ming)稱:U-2 OS人(ren)骨(gu)肉瘤(liu)細(xi)胞
性別:女
組織來(lai)源:骨(gu);骨(gu)肉瘤
細胞形(xing)態:上(shang)皮細胞
細(xi)胞(bao)背景:J. Ponten and E. 這株細(xi)胞(bao)(原(yuan)(yuan)名(ming)2T)源(yuan)自15歲女孩的(de)脛骨中等(deng)分(fen)化的(de)肉(rou)瘤(liu)。 與WI-38共培(pei)養(yang)或CF檢(jian)(jian)測(ce)SV40,RSV或腺(xian)病毒(du)時未檢(jian)(jian)測(ce)到病毒(du)。 1972年發(fa)現支原(yuan)(yuan)體污(wu)染并去(qu)除。 在本庫通過支原(yuan)(yuan)體檢(jian)(jian)測(ce)。 在本庫通過STR檢(jian)(jian)測(ce)。
培養(yang)條件:RPMI-1640(GIBCO,貨號(hao)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),85%;熱滅活馬血清,10%;優質胎牛(niu)血清,5%。 氣相:空氣,95%;二氧(yang)化碳(tan),5%。 溫度(du):37攝氏度(du)。
人骨肉(rou)瘤細胞,U-2OS 細(xi)胞處理(li):
1)復蘇細胞(bao):將(jiang)含有(you)1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)(ye)的凍存管在37℃水(shui)浴中迅(xun)速搖(yao)晃解凍,加(jia)入4mL培(pei)養(yang)基混合均勻。在1000RPM條(tiao)件下離心4分(fen)鐘,棄去上清(qing)液(ye)(ye),補加(jia)1-2mL培(pei)養(yang)基后吹(chui)勻。然后將(jiang)所有(you)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)(ye)加(jia)入培(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)隔(ge)(ge)夜(ye)(或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)(ye)加(jia)入10cm皿中,加(jia)入約8ml培(pei)養(yang)基,培(pei)養(yang)隔(ge)(ge)夜(ye))。第二天換液(ye)(ye)并檢查(cha)細胞(bao)密度。
2)細胞(bao)傳代:如(ru)果(guo)細胞(bao)密度(du)達80%-90%,即可進行(xing)傳代培(pei)養。
對于貼壁細(xi)胞(bao),傳代可參考以(yi)下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣(gai)、鎂離子的PBS潤洗細(xi)胞1-2次。
2. 加2ml消(xiao)化(hua)(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)(yu)培(pei)(pei)養(yang)瓶中,置于(yu)(yu)37℃培(pei)(pei)養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化(hua)(hua)1-2分(fen)鐘,然后在顯微鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)(hua)情況,若(ruo)細(xi)胞(bao)大部(bu)分(fen)變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培(pei)(pei)養(yang)瓶后加少量培(pei)(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)(hua)。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yang)(yang)基,輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)打勻后吸出(chu),在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清(qing)液(ye),補加1-2mL培養(yang)(yang)液(ye)后吹勻。
4. 將(jiang)細胞懸液按1:2到1:5的比例分(fen)到新(xin)的含8ml培養(yang)基的新(xin)皿中或者瓶中。
3)細胞(bao)(bao)(bao)凍(dong)(dong)存(cun)(cun):待細胞(bao)(bao)(bao)生長(chang)狀態良好(hao)時,可進(jin)行(xing)細胞(bao)(bao)(bao)凍(dong)(dong)存(cun)(cun)。貼(tie)壁(bi)細胞(bao)(bao)(bao)凍(dong)(dong)存(cun)(cun)時,棄去培養(yang)基后加入少量(liang)胰酶(mei),細胞(bao)(bao)(bao)變(bian)圓脫落(luo)后,加入約(yue)1ml含血清的培養(yang)基后加入凍(dong)(dong)存(cun)(cun)管中,再添(tian)加10%DMSO后進(jin)行(xing)凍(dong)(dong)存(cun)(cun)。
注(zhu)意事項(xiang):
1)收到細胞(bao)后,若發(fa)(fa)現干冰已揮發(fa)(fa)干凈、凍存(cun)管瓶(ping)蓋(gai)脫(tuo)落、破(po)損(sun)及細胞(bao)有污染,請(qing)立(li)即與我們。
2) 所有(you)動物(wu)細胞(bao)均視為有(you)潛在的生物(wu)危害性,必須在二(er)級(ji)生物(wu)安全(quan)臺內操作,并請注意防(fang)護,所有(you)廢液及接觸過(guo)此細胞(bao)的器皿需要滅菌后(hou)方能丟棄。
相(xiang)關主要細胞株(zhu)細胞系(xi):
產品名稱 簡稱 分類
人骨肉(rou)瘤細(xi)胞 HOS 骨,軟骨,肌肉(rou)
人骨(gu)肉(rou)瘤細胞 U-2OS 骨(gu),軟骨(gu),肌肉(rou)
人成(cheng)骨肉瘤細胞 MG-63 骨,軟骨,肌肉
人骨(gu)肉瘤細(xi)胞 SW1353 骨(gu),軟骨(gu),肌肉
熒光(guang)素酶(mei)轉(zhuan)染人成骨(gu)肉瘤細胞(bao) U2OS-LucteT-on 骨(gu),軟(ruan)骨(gu),肌肉
人(ren)骨肉(rou)瘤細胞 U2OSE6Tet6 骨,軟骨,肌肉(rou)
人骨(gu)肉(rou)瘤細胞 SF-86 骨(gu),軟骨(gu),肌肉(rou)
人成骨肉(rou)瘤(liu)細胞(bao) well2 骨,軟骨,肌肉(rou)
人成骨肉瘤細(xi)胞 LZJ 骨,軟骨,肌(ji)肉
人成(cheng)骨肉瘤細胞 well5 骨,軟骨,肌(ji)肉
人(ren)成骨(gu)肉瘤細胞 Saos-2 骨(gu),軟(ruan)骨(gu),肌(ji)肉
小(xiao)鼠骨肉(rou)瘤(liu)成骨細胞 K7M2wt[K7M2-WT] 骨,軟骨,肌肉(rou)
大鼠骨(gu)肉瘤細胞(bao) UMR-106 骨(gu),軟骨(gu),肌肉
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