鼠尾膠原蛋白(bai) I型Rat tail tendon collagen type I

產品名(ming)稱：鼠(shu)尾膠原(yuan)蛋白 I型(xing)

英文(wen)名稱：Rat tail tendon collagen type I

CAS號：C20-200110

規格：10mg/2ml

價格：360元/支

鼠尾膠原蛋白 I型Rat tail tendon collagen type I 簡介：慧穎生物鼠尾膠原蛋白 I型(rat tail tendon collagen type I)是通過 Birkedal-Hansen1 的方法，通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。 本公司鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養器皿，培養一些在普通細胞培養器皿中不易貼壁的細胞。也可用于制備三維膠，模擬真實的生長環境，使細胞在三維環境中生長。

1、使用Birkedal-Hansen1的方(fang)法，通過醋酸(suan)抽提、氯(lv)化鈉沉淀、磷酸(suan)氫二鈉沉淀等(deng)步(bu)驟制備(bei)。

2、在(zai) 1mg/ml 濃度(du)以上(shang)可形成具有(you)一(yi)定(ding)強度(du)的三(san)維膠(jiao)，可用于(yu)細胞(bao)的三(san)維空(kong)間(jian)培養 。

3、通過在(zai)包被的培(pei)養(yang)器皿中培(pei)養(yang) PC-12 細胞(bao)、在(zai)三維膠原中培(pei)養(yang) NIH-3T3 細胞(bao)實現質量控制 。

4、電泳結果(guo)和 Sigma 的同類產品(pin)無顯(xian)著區別 。

5、產品為無菌的溶液，省(sheng)去從干粉配制的麻煩 。

6、在無塵車間(jian)中生產，保證(zheng)潔凈度 。

1、細胞培(pei)養器皿的表(biao)面包(bao)被 推薦(jian)濃度(du)： 1-5ug/cm2

以包被濃度為 2 ug/cm2 為例：用(yong)無菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸(suan)將膠(jiao)原(yuan)蛋白(bai)稀(xi)釋到0.012mg/ml確保膠(jiao)原(yuan)蛋白(bai)溶液鋪(pu)滿器(qi)皿的(de)表面，開(kai)蓋在(zai)(zai)超凈(jing)臺上(shang)隔夜晾干。 也可以在(zai)(zai)室溫(wen)放置 1小時后，用(yong)PBS洗(xi)3-4次(ci)后直接使用(yong)。包被好的(de)器(qi)皿在(zai)(zai) 4-25℃至少(shao)可保存3個月以上(shang)的(de)時間。

2、三(san)維膠(jiao)原的制備 慧(hui)穎鼠尾膠(jiao)原蛋(dan)白(bai)I型在(zai)(zai)濃度1mg/ml以上，pH 7左右時可形成具有一(yi)定強度三(san)維膠(jiao),建(jian)議(yi)成膠(jiao)濃度1-2mg/ml。創賽膠(jiao)原蛋(dan)白(bai)溶解于0.006mol/L 乙(yi)酸中(zhong)，在(zai)(zai)成膠(jiao)過程中(zhong)需要加(jia)入0.06X 體(ti)積的 0.1mol/L NaOH 來中(zhong)和。

需要(yao)的溶液 ( 均需要(yao) 無菌(jun) 、 預冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般(ban)不用), 雙蒸水(shui)

A．不(bu)(bu)含細胞的(de)(de)三維(wei)膠(jiao)(jiao)原(yuan)的(de)(de)制備（以配(pei)制1毫升，1mg/ml三維(wei)膠(jiao)(jiao)為例(li)）：將200ul創賽鼠尾膠(jiao)(jiao)原(yuan)蛋白I型(xing)(5mg/ml)加(jia)到(dao)(dao)置于冰浴的(de)(de)離心管中(zhong)，加(jia)入690ul H2O。然(ran)后加(jia)到(dao)(dao)12ul 0.1mol/L NaOH中(zhong)（如果(guo)反過(guo)來把(ba)12ul 0.1mol/L NaOH加(jia)到(dao)(dao)膠(jiao)(jiao)原(yuan)溶液中(zhong)，會(hui)由于NaOH不(bu)(bu)能(neng)迅速(su)混勻而產(chan)生局部的(de)(de)膠(jiao)(jiao)原(yuan)凝結(jie)），立即混勻。再(zai)加(jia)入100ul 10xPBS或(huo)10x培(pei)(pei)養(yang)液，混勻后立即加(jia)到(dao)(dao)培(pei)(pei)養(yang)器皿(min)中(zhong)(混勻后pH為7左(zuo)右，如果(guo)PBS或(huo)培(pei)(pei)養(yang)液中(zhong)沒有加(jia)酚紅，初次使(shi)用(yong)(yong)(yong)時需要用(yong)(yong)(yong)pH試紙測試)。將培(pei)(pei)養(yang)器皿(min)在室溫(25度左(zuo)右)下放置20分鐘待(dai)膠(jiao)(jiao)凝固后，轉移到(dao)(dao)培(pei)(pei)養(yang)箱內。如果(guo)配(pei)制中(zhong)使(shi)用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)是(shi)10xPBS，使(shi)用(yong)(yong)(yong)前需要加(jia)入適(shi)當體積的(de)(de)細胞培(pei)(pei)養(yang)液預平衡。

B．含細胞(bao)的(de)三維膠(jiao)(jiao)原(yuan)的(de)制備(bei)（以配制1毫(hao)升，1mg/ml三維膠(jiao)(jiao)為例）：準(zhun)備(bei)好(hao)懸浮于培(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)的(de)細胞(bao)，并放置于冰浴中。將(jiang)200ul創賽鼠尾(wei)膠(jiao)(jiao)原(yuan)蛋白I型(xing)(5mg/ml)加到(dao)12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反(fan)過來(lai)把12ul 0.1mol/L NaOH加到(dao)膠(jiao)(jiao)原(yuan)溶液(ye)(ye)中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的(de)膠(jiao)(jiao)原(yuan)凝(ning)結），立即混勻。再加入23ul 10xPBS或10x培(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)，混勻(混勻后(hou)pH為7左右(you)，如果PBS或培(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)中沒有加酚紅，初(chu)次使用時需要(yao)用pH試紙測試)。加入760ul的(de)細胞(bao)懸浮液(ye)(ye)，混勻后(hou)立即加到(dao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)器皿中。將(jiang)培(pei)(pei)養(yang)(yang)器皿在室溫下放置20分鐘待(dai)膠(jiao)(jiao)凝(ning)固后(hou)，加入適當(dang)體積的(de)細胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)，轉移(yi)到(dao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱(xiang)中培(pei)(pei)養(yang)(yang)。

注：鼠(shu)尾膠原蛋(dan)白I型在室溫下pH中性時可迅速成(cheng)膠，在操(cao)作過程中要盡量(liang)保持低(di)溫

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