MHCC97-H細胞*高轉(zhuan)移(yi)人肝癌(ai)細胞(bao) 慧穎(ying)推薦熱賣細胞：

MHCC97-L細胞(bao)，低(di)轉移人肝癌(ai)細胞(bao)

MHCC97-H細胞*高(gao)轉(zhuan)移人肝癌細(xi)胞

SK-HEP-1細(xi)(xi)胞，人肝(gan)腹水腺癌(ai)細(xi)(xi)胞

BEL-7404細胞，人肝癌(ai)細胞

BEL-7402細(xi)(xi)胞，人肝癌細(xi)(xi)胞

SMMC-7721人肝癌細胞(bao)

MHCC97-H細(xi)胞*高轉移人(ren)肝癌細胞 介(jie)紹

細胞特性

1） 來(lai)源：肝癌(ai)

2） 形態：上皮細胞樣

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支(zhi)原體(ti)、細(xi)菌、酵母(mu)和真(zhen)菌檢測為陰(yin)性

5） 規(gui)格：T75瓶或者1mL凍存管包裝

運輸(shu)和(he)保存(cun)：可選擇干冰運輸(shu)及發送復蘇(su)存(cun)活細胞(bao)方式：（1）干(gan)冰(bing)運輸(shu)，收到(dao)后立(li)即轉入液氮凍(dong)存或直接復蘇；（2）存活細(xi)(xi)胞，收到后應繼續生長，傳代達到細(xi)(xi)胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體(ti)操作見細(xi)(xi)胞培養步驟。

細胞培養步驟：

一．培(pei)(pei)養基及培(pei)(pei)養凍(dong)存條件準備：

1） 準備DMEM培(pei)養基(DMEM/F-12，GIBCO，貨號12400024，添加NaHCO3 2.0g/L)，85%；馬血(xue)清(qing)，10%；胎牛血(xue)清，5%。

2） 培養條件(jian)： 氣(qi)相：空(kong)氣(qi)，95%；二(er)氧化碳，5%。 溫(wen)度：37攝氏度，培養(yang)箱濕度為70%-80%。

3） 凍(dong)存液：90%*培養(yang)基，10%DMSO，現用(yong)現配。液氮儲(chu)存。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細(xi)胞：將含有1mL細胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍(dong)，加入4mL培養(yang)基混(hun)合(he)均勻。在1000RPM條件(jian)下離心4分鐘，棄去上(shang)清液，補加1-2mL培養(yang)基后吹(chui)勻。然后將(jiang)所有細(xi)胞懸(xuan)液加入(ru)培養(yang)瓶中培養(yang)隔(ge)夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液加入(ru)10cm皿(min)中，加(jia)入約(yue)8ml培養(yang)基，培養(yang)隔(ge)夜）。第二(er)天換液并檢(jian)查細胞密度。

2） 細(xi)胞(bao)(bao)傳(chuan)代：如果細(xi)胞(bao)(bao)密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yang)。

對于貼壁細胞，傳代(dai)可參考以下(xia)方法：

1. 棄(qi)去培養上清，用(yong)不含鈣、鎂離(li)子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加(jia)2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分(fen)鐘，然后(hou)在顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分(fen)變(bian)圓并脫落，迅速(su)拿回操(cao)作臺，輕敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶后(hou)加少量培(pei)養(yang)基終止消(xiao)化。

3. 按6-8ml/瓶(ping)補加(jia)培養基，輕輕打勻后吸(xi)出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去(qu)上(shang)清液，補(bu)加1-2mL培(pei)養液后吹勻。

4. 將細胞懸(xuan)液按1：2到1：5的(de)比例(li)分(fen)到新的(de)含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

對(dui)于(yu)懸浮細胞，傳代可(ke)參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離(li)心4分(fen)鐘，棄去上清液，補(bu)加(jia)1-2mL培養(yang)液(ye)后(hou)吹勻，將(jiang)細胞懸液(ye)按1：2到1：5的比例分到新的含(han)8ml培養(yang)基的新皿中或(huo)者瓶中。

方法二：可選(xuan)擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到(dao)新的含8ml培養基的新(xin)皿中(zhong)(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)(zhong)。

3）細(xi)胞(bao)(bao)(bao)凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)生長狀態(tai)良好時(shi)，可(ke)進行(xing)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)凍(dong)存。貼壁細(xi)胞(bao)(bao)(bao)凍(dong)存時(shi)，棄去培(pei)養基后加入(ru)(ru)少量胰(yi)酶，細(xi)胞(bao)(bao)(bao)變圓脫落后，加入(ru)(ru)約1ml含血清的培養基后(hou)加入凍存管中，再(zai)添加10%DMSO后進(jin)行凍存(cun)。懸浮細(xi)(xi)胞(bao)凍存(cun)時(shi)，應將細(xi)(xi)胞(bao)收集，1000RPM條件下離(li)心4分(fen)鐘，少(shao)量保(bao)存上清液(ye)（防止(zhi)細胞吸走），加(jia)入(ru)(ru)部分(fen)新鮮培養(yang)基，加(jia)入(ru)(ru)到凍(dong)存管中，在凍(dong)存管中加(jia)入(ru)(ru)10%DMSO后進行(xing)凍存。

MHCC97-H細(xi)胞*高轉移人肝癌細(xi)胞(bao) 慧穎細胞庫全(quan)(quan)國各(ge)地均(jun)可發(fa)貨，全(quan)(quan)國統(tong)一價格，本(ben)公司出售的所有細胞僅(jin)供科研使用。

注意事項：

1. 收到細胞(bao)后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞(bao)有(you)污染，請立即與我們 ！

2. 所(suo)有(you)動物(wu)細胞(bao)均視為有(you)潛在(zai)的生物(wu)危害性，必須在(zai)二級生物(wu)安全臺內操作，并請注意(yi)防護(hu)，所(suo)有(you)廢(fei)液及(ji)接觸過此細胞(bao)的器皿(min)需要滅(mie)菌(jun)后方能丟棄。

MHCC97-H細胞*高轉移(yi)人肝(gan)癌細胞(bao)來源(yuan)：來源(yuan)于中(zhong)山(shan)醫院(yuan)，用人(ren)肝癌細胞(bao)株MHCC97-H接種(zhong)裸鼠，進行3次肺轉(zhuan)移(yi)篩選，取肺轉(zhuan)移(yi)瘤(liu)建成(cheng)皮(pi)下接(jie)種后高度自(zi)發性肺轉(zhuan)移(yi)的肝癌細(xi)胞系。