U-2 OS細胞，人骨肉(rou)瘤細胞形(xing)態

產品名稱：U-2 OS細胞

中文名稱：人骨肉瘤細胞

來源(yuan)：人骨肉瘤(liu)

類別：類屬(shu)于正常(chang)細胞

細(xi)胞形態：上皮樣(yang)

生長狀態：貼壁生長

培養基：McCoy's 5a 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養條件：37℃，5% CO2

消(xiao)化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶(rong)液，消(xiao)化 5-10min

主營(ying)細(xi)胞(bao)(bao)：HT-22細(xi)胞(bao)(bao)，HUVEC細(xi)胞(bao)(bao)，A549-luc-puro細(xi)胞(bao)(bao)，U87-MG細(xi)胞(bao)(bao)，SNU-739細(xi)胞(bao)(bao)

消化(hua)比例：1：3-1：6

換液時間(jian)：2-3 天換液一次

凍存(cun)液比例(li)：85%培養基，10%FBS，5% (v/v) DMSO

凍存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存

主(zhu)營細(xi)(xi)(xi)胞(bao)：BEL-7404細(xi)(xi)(xi)胞(bao)，HCT-116細(xi)(xi)(xi)胞(bao)，SK-OV-3細(xi)(xi)(xi)胞(bao)，IOSE80細(xi)(xi)(xi)胞(bao)，HL-7702細(xi)(xi)(xi)胞(bao)

若客戶收到2ml小管U-2 OS細胞，人骨肉瘤細胞形態

收到(dao)細胞(bao)以后(hou)，用75%酒精(jing)噴灑整個管子消毒后(hou)放到(dao)超菌(jun)臺內，嚴(yan)格無菌(jun)操(cao)作；然后(hou)將小管細胞(bao)轉移至T25培養(yang)(yang)(yang)瓶，加入5ml左右含(han)FBS的培養(yang)(yang)(yang)基混勻，放入培養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)隔夜培養(yang)(yang)(yang)后(hou)查看細胞(bao)匯合度(du)(du)：若未超過80%匯合度(du)(du)，換液繼(ji)續培養(yang)(yang)(yang)，根據情況(kuang)傳代(dai)或者(zhe)凍存(cun)。若超過80%匯合度(du)(du)，可(ke)直接進(jin)行傳代(dai)（細胞(bao)貼壁處理(li)方(fang)法）。

1、細胞(bao)(bao)在(zai)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)(yang)至良好(hao)狀態(tai)后灌(guan)滿*培(pei)養(yang)(yang)液(ye)并封好(hao)瓶(ping)口是細胞(bao)(bao)運輸的(de)辦法。從細胞(bao)(bao)資源中心(xin)獲得細胞(bao)(bao)回到(dao)自己的(de)實驗(yan)室后，先打(da)開(kai)外(wai)包裝，用(yong)75%酒精噴灑整個(ge)瓶(ping)消(xiao)毒后放(fang)到(dao)超凈臺內，嚴格無菌操(cao)作。

2、鏡下(xia)觀察：將(jiang)瓶(ping)裝的*培養液(ye)移入無菌(jun)瓶(ping)中，留(liu)待日后培養用，原瓶(ping)（T25瓶(ping)）保留(liu)6-8ml*培養液(ye)，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時(shi)，按要求比(bi)例(li)消(xiao)化傳(chuan)代。（收到細(xi)胞(bao)，建議棄(qi)去原基培養(yang)，使用新(xin)鮮*培養(yang)基培養(yang)）

3、消(xiao)化方(fang)法：

1、將瓶裝的*培養液移入無菌瓶中，留待日后培養用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。（收到細胞，建議棄去原基培養，使用新鮮*培養基培養）

2、T25瓶(ping)加(jia)3ml PBS，洗一次，棄上清，再加(jia)1ml消化(hua)液(ye)消化(hua)，顯微鏡(jing)下觀察，等細胞*脫離(li)瓶(ping)壁分離(li)成單個(ge)后，加(jia)培(pei)養基(ji)混勻，離(li)心收集(ji)，按(an)要求分瓶(ping)（視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶(ping)加(jia)培(pei)養基(ji)至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培(pei)養。

慧穎生物購買U-2 OS細胞，人骨肉瘤細胞形態注意事項：

1. 客戶在收(shou)到細胞時，請首先觀察培養(yang)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好，培養(yang)液(ye)是否(fou)外(wai)滲(shen)，培養(yang)液(ye)是否(fou)混濁(zhuo)。如發現有瓶(ping)破、滲(shen)漏、培養(yang)液(ye)混濁(zhuo)等問題，請在收(shou)到細胞后立即與(yu)我們(men)。
2. 由于運(yun)輸過程中(zhong)的(de)問(wen)題(ti)，細(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養瓶中(zhong)的(de)貼壁(bi)細(xi)胞(bao)(bao)有可能從(cong)瓶壁(bi)中(zhong)脫落(luo)下(xia)來(lai)，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察會(hui)(hui)出現細(xi)胞(bao)(bao)懸浮(fu)的(de)情況，出現此狀態時，請(qing)離心收集，重(zhong)懸細(xi)胞(bao)(bao)，置培(pei)養箱培(pei)養，細(xi)胞(bao)(bao)會(hui)(hui)重(zhong)新貼附于瓶壁(bi)。如果(guo)細(xi)胞(bao)(bao)仍不能貼壁(bi)，請(qing)用臺(tai)盼(pan)藍染色法鑒定細(xi)胞(bao)(bao)活力(li)。
3. 收到細胞時(shi)如(ru)無異常情況，請按照細胞處理方(fang)法處理細胞。