HaCaT細胞，人(ren)永(yong)生(sheng)化(hua)表皮細胞形(xing)態

產品名(ming)稱：HaCaT細(xi)胞

中文名稱：人永生化表皮(pi)細胞(bao)

來源：人皮膚

類(lei)別：類(lei)屬于正常細胞

細胞形態(tai)：上皮樣

生(sheng)長(chang)狀態：貼壁(bi)生(sheng)長(chang)

培(pei)養基(ji)：DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養條(tiao)件：37℃，5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶液，消化 5-10min

主營細胞(bao)(bao)(bao)：DC2.4細胞(bao)(bao)(bao)，HOS細胞(bao)(bao)(bao)，3D4/21細胞(bao)(bao)(bao)，HCAEC細胞(bao)(bao)(bao)，Tca-8113細胞(bao)(bao)(bao)，NCI-H460細胞(bao)(bao)(bao)，MCF-7細胞(bao)(bao)(bao)，U251細胞(bao)(bao)(bao)

消化比例：1：4-1：10

換(huan)(huan)液(ye)時(shi)間：2-3 天換(huan)(huan)液(ye)一次

凍存液比例(li)：85%培養基，10%FBS，5% (v/v) DMSO

凍存密度(du)：1-3 ×10^6/管，液氮保存

主營細(xi)胞(bao)(bao)(bao)：CNE細(xi)胞(bao)(bao)(bao)，MADB-106細(xi)胞(bao)(bao)(bao)，Sf9細(xi)胞(bao)(bao)(bao)，HOC細(xi)胞(bao)(bao)(bao)，3T3-L1細(xi)胞(bao)(bao)(bao)，THP-1細(xi)胞(bao)(bao)(bao)。

若客戶收到2ml小管HaCaT細胞，人永生化表皮細胞形態

收(shou)到細胞(bao)以后，用75%酒精(jing)噴灑整個管(guan)子消毒后放到超(chao)菌臺內，嚴格無菌操作(zuo)；然后將小管(guan)細胞(bao)轉(zhuan)移(yi)至T25培(pei)養(yang)瓶，加(jia)入(ru)5ml左(zuo)右(you)含(han)FBS的(de)培(pei)養(yang)基混勻(yun)，放入(ru)培(pei)養(yang)箱隔夜培(pei)養(yang)后查看(kan)細胞(bao)匯合(he)度：若未超(chao)過80%匯合(he)度，換液繼續培(pei)養(yang)，根據情況傳代(dai)或者凍存。若超(chao)過80%匯合(he)度，可直接進(jin)行(xing)傳代(dai)（細胞(bao)貼壁處理方(fang)法(fa)）。

1、細(xi)胞(bao)在培養(yang)瓶中培養(yang)至(zhi)良(liang)好狀(zhuang)態后(hou)灌滿*培養(yang)液(ye)并(bing)封好瓶口是細(xi)胞(bao)運輸的(de)辦法。從細(xi)胞(bao)資源中心(xin)獲(huo)得細(xi)胞(bao)回到自己的(de)實驗(yan)室后(hou)，先打(da)開外包裝，用75%酒精(jing)噴(pen)灑整個瓶消毒后(hou)放到超凈臺內(nei)，嚴格無菌操作。

2、鏡下觀察：將(jiang)瓶(ping)(ping)裝的*培(pei)養(yang)液(ye)移入無菌瓶(ping)(ping)中，留待(dai)日后培(pei)養(yang)用(yong)，原(yuan)瓶(ping)(ping)（T25瓶(ping)(ping)）保留6-8ml*培(pei)養(yang)液(ye)，放入37℃、5%CO2孵箱培(pei)養(yang)；超(chao)過80%匯合度時，按要求比例消(xiao)化傳代(dai)。（收到細胞，建議棄去(qu)原基培養(yang)，使用(yong)新(xin)鮮(xian)*培養(yang)基培養(yang)）

3、消化方法：

1、將瓶裝的*培養液移入無菌瓶中，留待日后培養用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。（收到細胞，建議棄去原基培養，使用新鮮*培養基培養）

2、T25瓶(ping)(ping)加3ml PBS，洗一次，棄上清，再加1ml消化液消化，顯(xian)微鏡下(xia)觀察，等細胞*脫離(li)(li)瓶(ping)(ping)壁分離(li)(li)成單個(ge)后(hou)，加培養基(ji)混勻，離(li)(li)心(xin)收(shou)集，按要求分瓶(ping)(ping)（視(shi)細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶(ping)(ping)加培養基(ji)至(zhi)6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培養。

慧穎生物購買HaCaT細胞，人永生化表皮細胞形態注意事項：

1、客(ke)戶在(zai)收到細(xi)胞時，請首先觀察培(pei)養(yang)瓶是(shi)(shi)否(fou)完好，培(pei)養(yang)液是(shi)(shi)否(fou)外滲(shen)，培(pei)養(yang)液是(shi)(shi)否(fou)混(hun)濁。如發現(xian)有瓶破(po)、滲(shen)漏、培(pei)養(yang)液混(hun)濁等問題，請在(zai)收到細(xi)胞后立即(ji)與我們 王。

2、由于(yu)運輸過程(cheng)中的問題，細胞(bao)培養瓶(ping)中的貼(tie)壁(bi)(bi)細胞(bao)有可(ke)能從瓶(ping)壁(bi)(bi)中脫(tuo)落下(xia)來，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察會(hui)出現細胞(bao)懸浮的情況，出現此狀態時，請(qing)離心收集，重(zhong)懸細胞(bao)，置培養箱培養，細胞(bao)會(hui)重(zhong)新貼(tie)附于(yu)瓶(ping)壁(bi)(bi)。如果細胞(bao)仍(reng)不(bu)能貼(tie)壁(bi)(bi)，請(qing)用(yong)臺盼藍染色(se)法鑒定細胞(bao)活力。

3、收(shou)到細胞(bao)時如無異常情況(kuang)，請按(an)照細胞(bao)處理方(fang)法(fa)處理細胞(bao)。