RWPE-1細(xi)胞株RWPE-1細(xi)胞價格 慧穎細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)庫(ku)提(ti)供傳代 凍存(cun)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，存(cun)活率高，*，復(fu)蘇周期短！慧穎提(ti)供400多(duo)種類(lei)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)株細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)系、耐藥株、原代細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、熱賣種類(lei)有：卵巢癌(ai)(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、乳腺(xian)癌(ai)(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、胃癌(ai)(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、肺癌(ai)(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、前列(lie)腺(xian)、舌鱗癌(ai)(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、結(jie)腸癌(ai)(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)等，： ！

細(xi)(xi)胞(bao)介紹(shao)：RWPE-1細(xi)(xi)胞(bao)為(wei)(wei)人(ren)正(zheng)常(chang)(chang)前列(lie)腺上皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)，來源于人(ren)正(zheng)常(chang)(chang)前列(lie)腺，中文名為(wei)(wei)人(ren)正(zheng)常(chang)(chang)前列(lie)腺上皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)，正(zheng)常(chang)(chang)的細(xi)(xi)胞(bao)形(xing)(xing)態為(wei)(wei)上皮(pi)樣(yang)，貼壁生(sheng)長。腫瘤抑制基因： p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一(yi)位正(zheng)常(chang)(chang)男性前列(lie)腺組(zu)織切片的周圍區(qu)域(yu)的上皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)用(yong)(yong)單拷貝的人(ren)乳(ru)頭瘤病毒的18(HPV-18)進行轉化，建(jian)立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 細(xi)(xi)胞(bao)株 [PubMed: 9214605]. 在三維Matrigel培養時(shi)，在雄(xiong)激(ji)素作用(yong)(yong)下，RWPE-1細(xi)(xi)胞(bao)形(xing)(xing)成腺胞(bao)并向培養基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 當與Matrigel或基質細(xi)(xi)胞(bao)混合注射雄(xiong)性裸鼠時(shi)，RWPE。

培養(yang)基(ji)(ji)：這株(zhu)細胞的(de)基(ji)(ji)本培養(yang)基(ji)(ji)作為Invitrogen (GIBCO)提(ti)(ti)供(gong)的(de)kit的(de)部(bu)分(fen)： 角化細胞無血清培養(yang)基(ji)(ji)K-SFM，kit目(mu)錄號17005-042。隨kit提(ti)(ti)供(gong)這株(zhu)細胞生(sheng)長所(suo)需的(de)兩種(zhong)添加劑（牛垂體(ti)提(ti)(ti)取(qu)物BPE及人重組表皮生(sheng)長因子EGF）。 配制*生(sheng)長培養(yang)基(ji)(ji)，需添加以下成分(fen)： 0.05 mg/ml BPE – 隨K-SFM提(ti)(ti)供(gong) 5 ng/ml EGF -隨K-SFM提(ti)(ti)供(gong)。K-SFM，BPE 0.05mg/ml，EGF 5ng/ml（Gibco試劑盒17005-042）。

培養(yang)條件：37℃ 5% CO2

消化條件：洗滌：不(bu)含(han)Ca++/Mg++離子(zi)的D-PBS；消化：溶(rong)于D-PBS的0.05% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA溶(rong)液，消化5-10min，不(bu)能拍打培(pei)養(yang)皿, 需要靜(jing)止(zhi)自(zi)然消化；中和：0.1% 大豆胰蛋(dan)白酶(mei)抑制(zhi)子(zi)或含(han)2%FBS的D-PBS；離心(xin)125×g, 5~7min

傳化比(bi)例：1：3-1：5

換液時間：2天換液一次

凍存(cun)液比(bi)例：85%培養(yang)基(ji)，10%FBS, 10% (v/v) DMSO

凍存(cun)密度：1-3 ×10^6/管(guan)，液(ye)氮(dan)保存(cun)

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慧穎運輸(shu)(shu)：短途運輸(shu)(shu)問題不(bu)大。可(ke)是長(chang)途天(tian)熱時，我們要做好相應(ying)的(de)運輸(shu)(shu)安全(quan)措施(shi)。活細(xi)胞(bao)(bao)的(de)運輸(shu)(shu)方法相對比較簡單(dan)，a)將該(gai)瓶細(xi)胞(bao)(bao)裝滿(man)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)，這樣做的(de)目的(de)是讓所有細(xi)胞(bao)(bao)都始(shi)終有營(ying)養(yang)(yang)(yang)供給(gei)。b)用(yong)酒精擦(ca)拭(shi)培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶，瓶口(kou)用(yong)封口(kou)膜(mo)包好。c)細(xi)胞(bao)(bao)取(qu)回后(hou)，半(ban)量換(huan)液(ye)。冬天(tian)則是采用(yong)全(quan)血清包被細(xi)胞(bao)(bao)運輸(shu)(shu)，細(xi)胞(bao)(bao)運輸(shu)(shu)中(zhong)處于休(xiu)眠狀態，收到(dao)細(xi)胞(bao)(bao)以后(hou)，用(yong)75%酒精噴灑(sa)整個(ge)管(guan)子(zi)消毒后(hou)放(fang)到(dao)超(chao)菌(jun)臺內，嚴格無(wu)菌(jun)操(cao)作；然(ran)后(hou)將小管(guan)細(xi)胞(bao)(bao)轉移至T25培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶，加入(ru)5ml左右含FBS的(de)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)混勻(yun)，放(fang)入(ru)培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱隔(ge)夜培(pei)養(yang)(yang)(yang)后(hou)查看細(xi)胞(bao)(bao)匯合度：若未超(chao)過80%匯合度，換(huan)液(ye)繼(ji)續培(pei)養(yang)(yang)(yang)，根(gen)據情況傳代或者凍存。若超(chao)過80%匯合度，可(ke)直接進行(xing)傳代。

對于RWPE-1細胞株RWPE-1細胞價格貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據經驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養瓶內，加入*培養基后繼續培養或實驗。