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現貨供應:PANC1 細(xi)胞,人胰(yi)腺(xian)癌細(xi)胞 價格/說明(ming)書(shu),詳細信息如下:
細胞生(sheng)長:貼壁(bi)生(sheng)長
細胞形態(tai):上皮(pi)樣
細(xi)(xi)胞(bao)數量:1×106個(ge)細(xi)(xi)胞(bao)數
細胞傳代:1:3~1:6傳代每周換液2~3次(ci)
細胞純度:94%
細(xi)胞活力(li):90%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)
細胞檢測(ce):細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
PANC1 細胞,人胰腺(xian)癌細胞 價格/說明書 @慧穎細胞庫多年專業細胞服務提供優質的產品,完善的客戶服務以幫助客戶快速找到的ATCC細胞細胞產品。本產品質量保證,選購!
操作臺的滅菌處理:
1)無菌室及無菌操(cao)作(zuo)臺(tai)(laminarflow)用紫(zi)外燈(deng)照射30-60分(fen)鐘(zhong)滅(mie)菌,70%ethanol擦拭無菌操(cao)作(zuo)抬面,并(bing)開啟無菌操(cao)作(zuo)臺(tai)風(feng)扇運轉10分(fen)鐘(zhong)。
2)細(xi)胞用的培(pei)養基如有相同切記不可共享培(pei)養基,以避免(mian)失誤混淆或細(xi)胞間污(wu)染。 (注(zhu):實驗操作應在抬(tai)面之(zhi)中央無(wu)菌(jun)區(qu)域(yu),勿(wu)在邊(bian)緣之(zhi)非(fei)無(wu)菌(jun)區(qu)域(yu)操作。)
培(pei)養(yang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)將復合細(xi)(xi)(xi)胞(bao)計(ji)數要求(qiu)的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)懸液(ye)(ye)分裝入(ru)培(pei)養(yang)瓶(ping)內,將培(pei)養(yang)瓶(ping)放入(ru)37℃和(he)5%CO2的(de)培(pei)養(yang)箱(xiang)內2-4小(xiao)時(shi)(或者24-48小(xiao)時(shi))后換液(ye)(ye)繼(ji)續培(pei)養(yang)培(pei)養(yang),換液(ye)(ye)的(de)時(shi)間由細(xi)(xi)(xi)胞(bao)情況而定。
PANC1 細胞,人胰腺癌細胞 價格/說(shuo)明(ming)書 簡單信息:
細胞(bao)來源: 人胰(yi)腺癌細胞(bao)
細胞(bao)(bao)簡介: PANC-1人(ren)胰(yi)腺癌細胞(bao)(bao),來源于(yu)人(ren)胰(yi)腺癌,中文名(ming)為人(ren)胰(yi)腺癌細胞(bao)(bao),正(zheng)常的細胞(bao)(bao)形態為上皮樣(yang),貼壁生長。
培養基: DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%
培養條件: 37℃ 5% CO2
消化(hua)條件: 0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液,消化(hua)3-5min
傳化(hua)比例: 1:2-1:4
換液(ye)時間: 2-3天換液(ye)一次
凍存(cun)液比例: 85%培養基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO
凍存(cun)(cun)密(mi)度: 1-3 ×10^6/管,液氮(dan)保(bao)存(cun)(cun)
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人堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)EELISA現貨試劑(ji)盒,96T
人酸性成纖維細胞生長(chang)因子1(aFGF-1)EELISA現(xian)貨試劑盒,96T
人凋(diao)亡(wang)相(xiang)關因(yin)子(zi)配體(FASL)EELISA現貨試劑盒,96T
PANC1 細胞(bao),人胰腺(xian)癌細胞(bao) 價格(ge)/說(shuo)明書(shu)的(de)培養(yang)
【初代(dai)培(pei)養原理】
將動(dong)物機(ji)體的各(ge)種組織從機(ji)體中取(qu)出,經各(ge)種酶(常用胰(yi)蛋(dan)白酶)、螯合劑(ji)(常用EDTA)或機(ji)械方法(fa)處(chu)理,分散成(cheng)單細胞,置合適(shi)的培養(yang)基中培養(yang),使細胞得以(yi)生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yang)。
儀器(qi):培養箱(調整至37℃),培養瓶(ping)、青霉素瓶(ping)、小玻(bo)璃漏(lou)斗、平(ping)皿、吸管、移液(ye)管、紗(sha)布、手術器(qi)械(xie)、血(xue)球計數板、離心機、水浴箱(37℃)
材料:動物組織塊
試(shi)劑:1640培養基(含20%小牛血清),0.25%胰酶,Hank′s液(ye),碘酒
【初代消化培養法】
(1)準(zhun)備:取各種(zhong)已消(xiao)毒的(de)培養用品置(zhi)于凈化臺面,紫外線消(xiao)毒20分(fen)鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部(bu)。
(2)布局(ju):點(dian)燃酒(jiu)精燈,安裝吸管帽。
(3)處理組(zu)織:把(ba)組(zu)織塊置(zhi)(zhi)于(yu)燒杯(bei)中,用Hanks液(ye)漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組(zu)織可能污染,可先置(zhi)(zhi)于(yu)含有青鏈(lian)霉素的混合(he)液(ye)中30~60分鐘(zhong)。
(4)剪(jian)切:用眼科剪(jian)把(ba)組織(zhi)切成2~3毫米大小(xiao)的塊,以(yi)便(bian)于消(xiao)化(hua)。加入比組織(zhi)塊總(zong)量多30~50倍的胰(yi)蛋白(bai)酶液,然(ran)后一并倒(dao)入三角燒(shao)瓶中(zhong),結(jie)扎瓶口(kou)或塞(sai)以(yi)膠塞(sai)。
(5)消化:或(huo)用(yong)恒(heng)溫水浴,或(huo)置于37℃溫箱消化均可,消化中(zhong)每(mei)隔20分鐘(zhong)應搖動一次,如用(yong)電磁恒(heng)溫攪拌器消化更好。消化時間依組(zu)織(zhi)塊(kuai)的(de)大小(xiao)和組(zu)織(zhi)的(de)硬度而定。
(6)分離:在消(xiao)化(hua)過程中見消(xiao)化(hua)液(ye)(ye)(ye)發混濁時,可用吸管吸出少許消(xiao)化(hua)液(ye)(ye)(ye)在鏡(jing)下(xia)觀(guan)察,如組(zu)織已分散成(cheng)細(xi)(xi)胞團或單個細(xi)(xi)胞,立即(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua),隨即(ji)通過適宜不銹鋼篩(shai),濾掉尚未充分消(xiao)化(hua)開的組(zu)織塊。低速(500~1000轉/分)離心(xin)消(xiao)化(hua)液(ye)(ye)(ye)5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培(pei)養液(ye)(ye)(ye)。
(7)計(ji)數:用計(ji)數板計(ji)數,如(ru)細胞懸液細胞密度過大,再補加培(pei)養液調整(zheng)后,分(fen)裝入培(pei)養瓶(ping)中(zhong)。對大多數細胞來說(shuo)(shuo),pH要求(qiu)在7.2~7.4范圍,培(pei)養液呈微紅色,如(ru)顏色偏(pian)黃(huang),說(shuo)(shuo)明液體(ti)變酸,可用NaHCO23調整(zheng)。
(8)培(pei)養(yang):置于36.5℃溫(wen)箱培(pei)養(yang),如用CO2溫(wen)箱培(pei)養(yang),瓶口需(xu)用紗布(bu)棉(mian)塞(sai)或螺旋帽堵塞(sai),紗布(bu)塞(sai)易生霉菌(jun),每次換(huan)液時需(xu)要換(huan)新塞(sai)。
【初(chu)代組織(zhi)塊(kuai)培養法】
《1》剪(jian)切:把組(zu)織小(xiao)塊(kuai)置(zhi)于小(xiao)燒(shao)杯或青霉素小(xiao)瓶中,用Hanks液(ye)漂(piao)洗二(er)三次以去掉表面血污(wu),吸靜Hanks液(ye),用眼(yan)科剪(jian)反復(fu)剪(jian)切1mm3塊(kuai)為止。
《2》擺布:用(yong)彎(wan)頭吸(xi)管吸(xi)取若干小(xiao)塊(kuai),置于培養瓶中,用(yong)吸(xi)管彎(wan)頭把組織小(xiao)塊(kuai)擺布在培養瓶底部,小(xiao)塊(kuai)相互(hu)距離以0.5cm為(wei)宜,每(mei)一25ml培養瓶底可(ke)擺布20~30塊(kuai)。
《3》輕(qing)輕(qing)翻(fan)轉培養瓶,另(ling)瓶底(di)向上,注意(yi)翻(fan)瓶時(shi)(shi)勿另(ling)組(zu)織小塊(kuai)流動,塞(sai)好瓶塞(sai),置36.5℃溫(wen)箱培養2小時(shi)(shi)左右(勿超過4小時(shi)(shi)),使小塊(kuai)微干(gan)涸。
《培(pei)(pei)(pei)養(yang)》從微箱中取出(chu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping),開(kai)塞,46度斜(xie)持(chi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping),箱瓶(ping)底腳部輕輕注入培(pei)(pei)(pei)養(yang)液少許,然后(hou)緩緩再(zai)把(ba)培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)翻轉過來,讓培(pei)(pei)(pei)養(yang)液慢慢覆蓋附(fu)于瓶(ping)地(di)上(shang)的(de)組織(zhi)(zhi)小(xiao)塊(kuai)。置溫箱中靜(jing)止培(pei)(pei)(pei)養(yang)。待細胞從組織(zhi)(zhi)塊(kuai)游出(chu)數量增多后(hou)。再(zai)補加培(pei)(pei)(pei)養(yang)液。
【傳代培養法原理】
細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)在培養(yang)瓶長(chang)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)能繼續生(sheng)長(chang),同時(shi)也將(jiang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)數量擴大,就(jiu)必須進行傳代(再培養(yang))。 傳代培養(yang)也是一種將(jiang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)種保存下去的方法(fa)。同時(shi)也是利用培養(yang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)進行各種實驗的必經過程。懸浮型細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)直接(jie)分(fen)瓶就(jiu)可以(yi),而貼壁細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)需經消化后才能分(fen)瓶。
【材料和試劑】
1)細(xi)胞(bao):貼壁細(xi)胞(bao)株
2)試劑:0.25%胰酶(mei)、1640培養(yang)基(含10%小(xiao)牛血清(qing))
3)儀器和器材:倒置顯微鏡,培養箱、培養瓶、吸(xi)管、廢(fei)液缸等
【操作步(bu)驟】
1)吸除培養(yang)瓶內舊培養(yang)液(ye)。
2)向瓶內加入胰蛋白酶和EDTA混合液少(shao)許(xu),以(yi)能覆滿(man)瓶底(di)為限。
3)置溫箱中(zhong)2~5分鐘,當(dang)發現細(xi)胞質(zhi)回縮,細(xi)胞間(jian)隙增大后,立即終(zhong)止(zhi)消化。
4)吸除消(xiao)(xiao)化液(ye),向瓶(ping)內(nei)注入Hanks液(ye)數毫升,輕輕轉動(dong)培(pei)養(yang)瓶(ping),把殘余消(xiao)(xiao)化液(ye)沖掉。注意加(jia)Hanks液(ye)沖洗細胞時,動(dong)作要(yao)輕,以免把已(yi)松動(dong)的細胞沖掉流失,如用(yong)胰蛋白酶液(ye)單獨消(xiao)(xiao)化,吸除胰蛋白酶液(ye)后,可不(bu)用(yong)Hanks液(ye)沖洗,直接(jie)加(jia)入培(pei)養(yang)液(ye)。
5)用吸管吸取營(ying)養液輕輕反復吹打瓶壁細胞(bao),使之(zhi)從瓶壁脫(tuo)離形成(cheng)細胞(bao)懸液。
6)計數(shu)板(ban)計數(shu)后,把(ba)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)分(fen)成等份(fen)分(fen)裝入(ru)數(shu)個培養瓶中(zhong),置溫箱中(zhong)培養。
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