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公司提供2種形式的C6細胞,大鼠腦膠質瘤細胞株:
一種是(shi)凍(dong)存產品(pin),由(you)液氮(dan)直接拿出,干(gan)冰運輸(shu)給客戶。一般不(bu)(bu)推薦這種,也較少使(shi)用這種方式(shi),因(yin)為復蘇手法對于細(xi)(xi)胞狀(zhuang)態影(ying)響(xiang)較大,一旦細(xi)(xi)胞狀(zhuang)態不(bu)(bu)好,很(hen)難說是(shi)細(xi)(xi)胞自(zi)身不(bu)(bu)行,還是(shi)復蘇沒操(cao)作好;另(ling)外溫度對細(xi)(xi)胞、基(ji)因(yin)功能狀(zhuang)態影(ying)響(xiang)很(hen)大,-80C也不(bu)(bu)是(shi)細(xi)(xi)胞儲存的(de)方式(shi),快(kuai)遞時間也很(hen)難控制,多(duo)種因(yin)素(su)影(ying)響(xiang)產品(pin)的(de)質(zhi)量(liang);再者干(gan)冰運輸(shu)需要額外添加運費(fei)(順(shun)豐)。
另(ling)一種是我(wo)們(men)復蘇(su)好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養基常溫運輸(shu)給客戶(hu),排(pai)除復蘇(su)造(zao)成影響(xiang)(xiang),常溫運輸(shu)也(ye)對細胞影響(xiang)(xiang)也(ye)不大,運費較低(聯邦(bang)或順豐)。
上海慧(hui)穎生物科技有限公司坐落于美(mei)麗(li)的嘉定南翔(xiang)鎮(zhen),2014年(nian)獲(huo)得澳洲(zhou)BOVOGEN產品(pin)(pin)(pin)代理權,2015年(nian)獲(huo)得德(de)國SERANA產品(pin)(pin)(pin)總銷(xiao)售(shou)權,為國內(nei)科研機構提供高(gao)品(pin)(pin)(pin)質動物血清(qing)和蛋白產品(pin)(pin)(pin)。
慧穎生物為完善的產品供應渠道(dao)和售(shou)后服(fu)務。我們力求(qiu)工作*,在(zai)處理客戶的咨詢(xun)、訂購(gou)、到貨(huo)、售(shou)后服(fu)務、等方面追求(qiu)更(geng)(geng)專(zhuan)業、更(geng)(geng)快捷、更(geng)(geng)及時(shi)。
上海慧穎生物的(de)經營原(yuan)則(ze)是“質(zhi)量(liang)*,誠信(xin)*”,以(yi)“質(zhi)量(liang)是企業(ye)的(de)生命,誠信(xin)是經營的(de)資本”為警醒,嚴把(ba)所售出商品(pin)的(de)質(zhi)量(liang)關,不做任(ren)何有(you)損顧客(ke)利益的(de)事情。
一直以來慧穎生(sheng)物(wu)都為(wei)(wei)廣(guang)大(da)科(ke)研工作(zuo)(zuo)者(zhe)的工作(zuo)(zuo)提(ti)供(gong)材料或者(zhe)是研究(jiu)條件,我們(men)是依(yi)托廣(guang)大(da)科(ke)研工作(zuo)(zuo)者(zhe)的信任才(cai)能(neng)發展至今(jin),并且(qie)與廣(guang)大(da)科(ke)研者(zhe)的科(ke)研工作(zuo)(zuo)一直成長,我們(men)對此一直非常感(gan)(gan)謝眾多的新(xin)老顧客,如今(jin)又是一年的試劑購(gou)買(mai)旺季(ji),我們(men)素(su)爾生(sheng)物(wu)也是為(wei)(wei)了感(gan)(gan)謝并且(qie)回(hui)饋廣(guang)大(da)新(xin)老顧客,特推出素(su)爾熱賣動物(wu)血清,確(que)保正(zheng)品,確(que)保質量穩定,爭取(qu)批(pi)次間差異降到(dao)zui小,真正(zheng)的讓您感(gan)(gan)到(dao)物(wu)有所值。素(su)爾生(sheng)物(wu)在(zai)此希(xi)望廣(guang)大(da)科(ke)研工作(zuo)(zuo)的工作(zuo)(zuo)可以步(bu)步(bu)皆(jie)高,生(sheng)活如意幸福。
慧穎細(xi)(xi)(xi)胞庫400種類細(xi)(xi)(xi)胞株(zhu)(zhu)細(xi)(xi)(xi)胞系(xi),20多株(zhu)(zhu)耐藥株(zhu)(zhu),超低折扣,種類涵(han)蓋:成纖維細(xi)(xi)(xi)胞 長(chang)尾綠(lv)猴胚胎(tai)細(xi)(xi)(xi)胞 長(chang)尾綠(lv)猴腎(shen)細(xi)(xi)(xi)胞 小鼠乳腺癌細(xi)(xi)(xi)胞 人(ren)膀胱(guang)癌細(xi)(xi)(xi)胞 人(ren)T細(xi)(xi)(xi)胞白血病細(xi)(xi)(xi)胞 人(ren)腎(shen)細(xi)(xi)(xi)胞腺癌細(xi)(xi)(xi)胞 人(ren)腎(shen)透(tou)明細(xi)(xi)(xi)胞腺癌細(xi)(xi)(xi)胞 人(ren)甲狀腺癌細(xi)(xi)(xi)胞 卵巢癌細(xi)(xi)(xi)胞 干細(xi)(xi)(xi)胞 結腸(chang)癌細(xi)(xi)(xi)胞 胃(wei)癌細(xi)(xi)(xi)胞 乳腺類細(xi)(xi)(xi)胞 等
以下為購買細(xi)胞系(xi)后(hou)的售后(hou)小知識(shi):
1、CO2 培養箱之水盤如何(he)保持清(qing)潔(jie)?
定期(至少(shao)每兩(liang)周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。
2、為何培養(yang)基保存于4 ℃ 冰箱中(zhong), 顏色會(hui)偏(pian)暗(an)紅色, 且(qie)pH值會(hui)越(yue)來(lai)越(yue)偏(pian)堿性?
培(pei)養(yang)(yang)(yang)基保存于(yu)4 ℃ 冰箱中, 培(pei)養(yang)(yang)(yang)基內(nei)之CO2 會逐漸溢出(chu),造成(cheng)(cheng)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基越來越偏堿性。而培(pei)養(yang)(yang)(yang)基中之酸堿指(zhi)示劑(ji)(通常(chang)為(wei)phenol red) 的顏色(se)也會隨堿性增加而更偏暗紅。培(pei)養(yang)(yang)(yang)基偏堿之結果, 將造成(cheng)(cheng)細胞生長(chang)停滯或(huo)死亡(wang)。若培(pei)養(yang)(yang)(yang)基偏堿時, 可以(yi)通入無菌過濾(lv)之CO2, 以(yi)調整pH 值。
3、各(ge)種細胞培(pei)養用的dish,flask是否均相同?
不同廠牌的dish 或(huo)flask, 其(qi)所coating 的polymer 不同, 制造程序(xu)亦不同, 雖對大部分(fen)細胞沒有(you)太大之(zhi)(zhi)影響, 惟少數細胞則可能因(yin)使用廠牌不同之(zhi)(zhi)dish 或(huo)flask 而有(you)顯著(zhu)之(zhi)(zhi)生(sheng)長差異。
4、購買之(zhi)細胞冷凍(dong)管經解凍(dong)后,為何會發生細胞數目太少之(zhi)情形? 購買之(zhi)細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研(yan)究(jiu)人員(yuan)在細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養時出(chu)現存活率(lv)不佳, 常見原因可歸納為:培(pei)養基使(shi)用(yong)錯誤(wu)或培(pei)養基品(pin)(pin)質不佳。血清使(shi)用(yong)錯誤(wu)或血清的品(pin)(pin)質不佳。解凍過程(cheng)錯誤(wu)。冷(leng)凍細(xi)(xi)胞(bao)(bao)解凍后, 加以洗滌細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和離(li)心。懸浮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)誤(wu)認為死(si)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)。培(pei)養溫度使(shi)用(yong)錯誤(wu)。細(xi)(xi)胞(bao)(bao)置于–80℃太久。
我公(gong)司出售Elisa試劑盒,一抗,二抗,動(dong)物(wu)血(xue)清,細胞株(zhu)細胞系,標(biao)準品(pin),生化試劑,日(ri)本三菱厭氧(yang)罐及安寧包系列,GE填(tian)料以及凝膠系列產品(pin),質(zhi)粒以及質(zhi)粒搭建。
一(yi)個合格的質粒含(han)有以下組成部分:
復(fu)(fu)制(zhi)(zhi)起始(shi)(shi)位(wei)點(dian)Ori:即(ji)控制(zhi)(zhi)復(fu)(fu)制(zhi)(zhi)起始(shi)(shi)的位(wei)點(dian)。原核生物DNA分(fen)子中只有(you)一個復(fu)(fu)制(zhi)(zhi)起始(shi)(shi)點(dian),而真核生物DNA分(fen)子有(you)多個復(fu)(fu)制(zhi)(zhi)起始(shi)(shi)位(wei)點(dian)。
抗生素抗性基因:可以(yi)便(bian)于篩選或(huo)檢測,如(ru)Amp+ 、Kan+。
多(duo)克(ke)隆(long)位點(dian)MCS:克(ke)隆(long)攜帶外源(yuan)基因片段。
P/E:啟(qi)動子(zi)/增(zeng)強子(zi)。
Terms:終止信號。
加poly(A)信號:可(ke)以起到(dao)穩定 mRNA 作用。
如(ru)何(he)閱讀質粒圖譜:
*步:首(shou)先看 Ori 的位置,了解質粒(li)的類型(xing)(原(yuan)核/真核/穿梭質粒(li))。
第二步:再看篩選標(biao)記,如抗(kang)性,決定(ding)使用什么篩選標(biao)記。
--Ampr 水解(jie)β-內酰胺環,解(jie)除氨芐的毒性;
--tetr 可以阻止(zhi)四環(huan)素(su)進(jin)入細(xi)胞(bao);
--camr 生(sheng)成氯霉素羥乙酰基衍生(sheng)物,使之(zhi)失去毒(du)性;
--neor(kanr) 氨基糖苷磷酸(suan)轉(zhuan)移酶 使G418(長那(nei)霉素衍生物(wu))失活;
--hygr 使潮(chao)霉素(su)β失活。
第(di)三步:看多克隆(long)位點(MCS)。它具有多個限制酶(mei)的(de)(de)(de)單一切點,便于(yu)外(wai)(wai)源基(ji)因(yin)(yin)的(de)(de)(de)插入。如果在這些(xie)位點外(wai)(wai)有外(wai)(wai)源基(ji)因(yin)(yin)的(de)(de)(de)插入,會導致某(mou)種標志基(ji)因(yin)(yin)的(de)(de)(de)失活,從(cong)而便于(yu)篩(shai)選。MCS決定了能不(bu)能放置(zhi)(zhi)目的(de)(de)(de)基(ji)因(yin)(yin)以及如何放置(zhi)(zhi)目的(de)(de)(de)基(ji)因(yin)(yin)。
第四步:再看外源DNA插(cha)入(ru)片段(duan)(duan)大小(xiao)。質粒一(yi)般只(zhi)能(neng)容納小(xiao)于10Kb的(de)外源DNA片段(duan)(duan)。一(yi)般來(lai)說,外源DNA片段(duan)(duan)越(yue)(yue)(yue)長(chang),越(yue)(yue)(yue)難插(cha)入(ru),越(yue)(yue)(yue)不穩定,轉化效率越(yue)(yue)(yue)低。
第(di)五(wu)步:是否含(han)有表(biao)達(da)(da)系(xi)統元(yuan)件,即(ji)啟動子-核糖(tang)體結合(he)位(wei)點-克隆(long)位(wei)點-轉錄終止信號,這是用來(lai)區(qu)別(bie)克隆(long)載體與表(biao)達(da)(da)載體。在克隆(long)載體中加入一些與表(biao)達(da)(da)調控有關的(de)元(yuan)件即(ji)成為表(biao)達(da)(da)載體。選用哪(na)種(zhong)載體,要以實驗(yan)目的(de)為依據。
啟(qi)(qi)動(dong)子:促進DNA轉錄(lu)的DNA序列,這(zhe)個(ge)DNA區域常在(zai)基(ji)因(yin)或操縱(zong)子編碼順(shun)序的上游,是(shi)DNA分子上可(ke)以與RNApol特(te)異性結合(he)并使之開始轉錄(lu)的部位,但啟(qi)(qi)動(dong)子本身不被轉錄(lu)。
增(zeng)強子(zi)/沉(chen)默(mo)子(zi):增(zeng)強子(zi)為真核(he)基因(yin)組(包括真核(he)病毒基因(yin)組)中的一(yi)種具有增(zeng)強鄰近基因(yin)轉錄過程的調控(kong)序列,其作(zuo)用與增(zeng)強子(zi)所(suo)在(zai)的位置或(huo)方向(xiang)無(wu)關(即在(zai)所(suo)調控(kong)基因(yin)上游或(huo)下游均可發揮作(zuo)用)。/沉(chen)默(mo)子(zi):負(fu)增(zeng)強子(zi),負(fu)調控(kong)序列。
核(he)(he)糖體結合(he)位點(dian)/起始密(mi)碼/SD序列(Rbs/AGU/SDs):mRNA有核(he)(he)糖體的兩個結合(he)位點(dian),對于原核(he)(he)而言是AUG(起始密(mi)碼)和 SD序列。
轉錄終(zhong)止(zhi)順序(xu)(終(zhong)止(zhi)子)/翻譯終(zhong)止(zhi)密(mi)碼子:結構(gou)基因的(de)zui后(hou)一(yi)個外顯子中有一(yi)個 AATAAA的(de)保守序(xu)列,此位點down-stream有一(yi)段GT或T富(fu)豐區,這2部分共(gong)同構(gou)成poly(A)加(jia)尾信(xin)號。
為什么質(zhi)粒(li)圖譜上有的(de)箭(jian)頭順時(shi)針(zhen)有的(de)箭(jian)頭逆時(shi)針(zhen)?那其實是代表兩條(tiao)DNA鏈(lian),即質(zhi)粒(li)是環狀雙鏈(lian) DNA,它的(de)啟動子等在(zai)其中一(yi)(yi)條(tiao)鏈(lian)上,而它的(de)抗性(xing)基因在(zai)另一(yi)(yi)條(tiao)鏈(lian)上。
如(ru)何選擇載體(ti)
把目(mu)(mu)的基因通(tong)過基因工(gong)程手段送(song)到生(sheng)物細胞(受體(ti)細胞),需要運(yun)載工(gong)具(ju)(交通(tong)工(gong)具(ju))攜帶外源基因進入受體(ti)細胞,這種運(yun)載工(gong)具(ju)就叫做(zuo)載體(ti)(vector)。基因工(gong)程所用(yong)的vector實際上(shang)是用(yong)來攜帶目(mu)(mu)的基因片段進入受體(ti)細胞的 DNA。
選(xuan)擇載體(ti)主要(yao)(yao)(yao)(yao)依據構建的(de)(de)目的(de)(de),同時要(yao)(yao)(yao)(yao)考慮載體(ti)中應有合(he)適的(de)(de)限制(zhi)酶切位點。如果構建的(de)(de)目的(de)(de)是要(yao)(yao)(yao)(yao)表達一個特定的(de)(de)基因,則(ze)要(yao)(yao)(yao)(yao)選(xuan)擇合(he)適的(de)(de)表達載體(ti)。
產品名(ming)稱:C6細胞
中文名稱:大鼠腦膠質瘤細胞株
種屬:大鼠
生(sheng)長(chang)狀態:貼(tie)壁(bi)生(sheng)長(chang)|懸浮生(sheng)長(chang)|半貼(tie)壁(bi)
細胞形(xing)態:上(shang)皮樣|成纖維樣|圓形(xing)|球(qiu)形(xing)|梭形(xing)|不(bu)規則形(xing)態
周(zhou)期:凍存細胞3-4個工作日(ri)發(fa)貨(huo),復蘇細胞1-2周(zhou)發(fa)貨(huo)
質量(liang)保(bao)證(zheng):我們的細(xi)胞(bao)株(zhu)來源于ATCC、ECACC、DSMZ等,購買到(dao)貨后,由我們實驗室擴增(zeng)、凍(dong)存(cun)(cun),凍(dong)存(cun)(cun)的產品(pin)全(quan)部經過(guo)QC檢測,100%進口來源,100%保(bao)證(zheng)5代以內(nei),活力(li)>95%,超低(di)折扣價格,無(wu)細(xi)菌(jun)(jun)、真(zhen)菌(jun)(jun)、支原體污染。
細胞(bao)到達客戶手中(zhong),出現任何問題(人(ren)為或(huo)者非人(ren)為),導致細胞(bao)在凍存前死亡,我們(men)公司都可以免費再向客戶提供一(yi)次。
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C6細胞,大鼠腦膠質瘤細胞株 細胞吹打經驗之談:
急(ji)速的反復(fu)吹(chui)打肯定(ding)容易產生泡沫(mo),這對細胞(bao)不利,所以我們要盡量避免。在操作時盡量選用(yong)較大(da)(da)口的吸(xi)管(guan),吸(xi)液(ye)時先將吸(xi)管(guan)內空氣排空,再深入(ru)液(ye)面以下吸(xi)液(ye),吹(chui)打細胞(bao)時,盡量沿著壁(bi)吹(chui)出液(ye)體,操作輕(qing)柔,就可(ke)zui大(da)(da)程(cheng)度(du)避免泡沫(mo)的產生!
1.有一(yi)些(xie)細胞可以不用(yong)消化(hua)液(ye)就能夠吹打下來(lai)。個人認為能不用(yong)消化(hua)液(ye)是的(de)。譬如(ru)巨(ju)噬(shi)細胞。一(yi)直維持巨(ju)噬(shi)細胞,每次傳代都不用(yong)消化(hua)液(ye),吹打的(de)時候一(yi)般會用(yong)瓶內未(wei)換的(de)剩(sheng)余舊培(pei)養(yang)液(ye),這(zhe)(zhe)樣比用(yong)新的(de)培(pei)養(yang)基可以減少點泡沫的(de)生成。當(dang)然(ran)這(zhe)(zhe)個一(yi)定要求原培(pei)養(yang)基未(wei)被污(wu)染。
2. 吹(chui)(chui)(chui)打的時候我們都知道要(yao)一(yi)點挨著一(yi)點吹(chui)(chui)(chui),這樣不會漏掉地方(fang)。而每次都會首(shou)先(xian)沿著兩條(tiao)對(dui)角線的方(fang)向吹(chui)(chui)(chui)打,然后再按照橫著或者是豎著吹(chui)(chui)(chui)打。這樣就(jiu)可(ke)以比較(jiao)(jiao)容易把(ba)細(xi)胞(bao)吹(chui)(chui)(chui)下來,因為首(shou)先(xian)細(xi)胞(bao)的各個方(fang)向都受力(li)了,而且比較(jiao)(jiao)均勻(yun),細(xi)胞(bao)比較(jiao)(jiao)容易下來,而且對(dui)細(xi)胞(bao)形態的維護比較(jiao)(jiao)好(hao)。
3.對膠頭(tou)滴(di)管的(de)要(yao)求(qiu)。膠頭(tou)滴(di)管頭(tou)部(bu)是做(zuo)成(cheng)彎曲45度(du)角的(de)形狀,一般都是自(zi)己用止血鉗夾住頭(tou)部(bu)在酒精燈上(shang)燒彎。發(fa)現,如果吹(chui)(chui)打的(de)時候,滴(di)管的(de)頭(tou)部(bu)邊緣(yuan)如果是和吹(chui)(chui)打平面平行(xing)的(de)話,反(fan)而容易產(chan)生泡(pao)沫(mo),貼在底部(bu)吹(chui)(chui),也容易產(chan)生泡(pao)沫(mo),是能(neng)夠有(you)一個角度(du)順(shun)著你吹(chui)(chui)打的(de)方向和滴(di)管*。并且稍微(wei)遠離(li)吹(chui)(chui)打面,這樣滴(di)管內的(de)液體容易流(liu)出(chu),阻(zu)力會(hui)減小,就不(bu)會(hui)產(chan)生那么多的(de)泡(pao)沫(mo)了。
4.控(kong)制吹(chui)打的(de)(de)(de)節(jie)奏(zou)(zou),急速地吹(chui)打會(hui)很(hen)快地產生(sheng)泡沫,用力(li)越(yue)大(da),越(yue)容易產生(sheng)。是能夠(gou)把握住自(zi)己的(de)(de)(de)力(li)度(du)(du)和節(jie)奏(zou)(zou),有條不紊的(de)(de)(de)吹(chui)打。是以自(zi)己拿滴(di)管用手的(de)(de)(de)輕(qing)松(song)程度(du)(du)為準,如果剛吹(chui)幾下很(hen)快就累的(de)(de)(de)話(hua),那就證(zheng)明(ming)是節(jie)奏(zou)(zou)過快。吹(chui)完(wan)都(dou)不累的(de)(de)(de)話(hua)那就是太慢力(li)度(du)(du)也不夠(gou)。一般在吹(chui)完(wan)一遍時指(zhi)頭發困會(hui)比(bi)較好。這樣的(de)(de)(de)節(jie)奏(zou)(zou)能夠(gou)比(bi)較快速而且(qie)有效地完(wan)成。
覺得zui關鍵的操作是不要吹打到底。
培養細胞多年,避免氣泡(pao)產生要注意(yi)以下(xia)兩點:
1 吹打(da)用的培養基不(bu)能(neng)太少,如(ru)果只有1-2mL,氣泡難以避(bi)免;
2 吸管每(mei)次打(da)出液體后立刻(ke)深入液面下吸取液體。
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A-375細胞(bao)株(zhu) F skin 皮膚;外(wai)皮 NS 不明確
A4/Fuk細胞株 F haematopoietic_and_lymphoid_tissue 血液(ye)、淋(lin)巴組織(zhi) diffuse_large_B_cell_lymphoma 彌漫大B細胞淋(lin)巴瘤
A-498細(xi)胞株 F kidney 腎臟 renal_cell_carcinoma 腎細(xi)胞癌
A549細(xi)胞株 M lung 肺(fei) non_small_cell_carcinoma 非小細(xi)胞癌
A-673細胞(bao)株 F bone 骨骼 NS 不明確
A-704細(xi)(xi)胞株 M kidney 腎臟 renal_cell_carcinoma 腎細(xi)(xi)胞癌
ABC-1細(xi)胞(bao)株 M lung 肺(fei) non_small_cell_carcinoma 非小(xiao)細(xi)胞(bao)癌
ACC-MESO-1細胞株 pleura 胸(xiong)膜(mo); 肋膜(mo) NS 不明(ming)確
ACHN細胞株(zhu) M kidney 腎臟 renal_cell_carcinoma 腎細胞癌
AGS細胞株 F stomach 胃;腹部 adenocarcinoma 腺(xian)癌(ai);惡性(xing)腺(xian)瘤(liu)
Alexander cells細胞株 M liver 肝(gan) hepatocellular_carcinoma 肝(gan)癌
697 細胞株M haematopoietic_and_lymphoid_tissue 血(xue)液、淋巴組織(zhi) acute_lymphoblastic_B_cell_leukaemia 急(ji)性淋巴細胞B細胞白血(xue)病23132/87
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