YB2/0[YB2-0]細胞，大鼠骨髓瘤細胞 簡介：

細胞名(ming)稱(cheng)：YB2/0[YB2-0]細胞(bao)

中文名稱(cheng)：大鼠骨髓瘤細胞

生長(chang)狀態：貼(tie)壁(bi)生長(chang)

來源：美國ATCC

YB2/0[YB2-0]細(xi)胞，大(da)鼠(shu)骨髓(sui)瘤(liu)細(xi)胞 相關熱賣骨髓瘤細胞株(zhu)有：

NS-1細胞，小(xiao)鼠(shu)骨髓瘤細胞 [ATCC: TIB-18]

IR983F細胞，大(da)鼠骨髓瘤細胞

LOX細胞，人骨髓瘤細胞

FO細(xi)(xi)胞(bao)，小鼠骨髓瘤細(xi)(xi)胞(bao) [ATCC: CRL-1646]

J558細胞(bao)，小鼠骨髓瘤細胞(bao)[ATCC: TIB-6]

Y3-Ag 1.2.3，大鼠骨髓瘤細胞

1.試劑和溶液

1）轉印緩(huan)沖液：0.025M Tris base , 0.187 M甘氨酸 , 25%甲醇

2）氨(an)基黑(hei)溶液：0.1% 酸性(xing)黑10B

3）1×TBST：25mM Tris-HCl ( pH 8.0 ) , 0.2 M NaCl ,0.1%Tween 20

4）封閉液(ye)：TBST配制的5%牛(niu)奶

5）抗體稀釋液(ye)：TBST配制的5%牛(niu)奶

6）顯色(se)系統：ECL顯色

2.實驗步驟

1電(dian)泳：將裂解液進行SDS-PAGE電泳，80v，30分鐘，120v，90分鐘(zhong)；

2轉膜(mo)：PVDF膜(mo)在甲醇中浸泡約30秒左右(you)，濾紙(zhi)浸泡在(zai)轉印緩沖液預濕(shi)，半干法轉印到PVDF膜上，10v，150分鐘(zhong)；

3染(ran)色：氨基黑染(ran)色5分鐘，甲醇(chun)褪去背景(jing)色，觀察條帶(dai)；

4膜活化：將PVDF膜(mo)置于甲(jia)醇活化(hua)1min，用純水洗(xi)膜2次(ci)后再(zai)用TBST洗滌3次；

5封(feng)閉：將膜條置于5%牛奶或2% BSA中(zhong)，室(shi)溫混搖2h；

6一抗孵育：將待檢抗體用(yong)3%牛奶或2% BSA稀釋到合適濃度（參照(zhao)抗體(ti)說明書，根據客(ke)戶預實驗(yan)結(jie)果，稀釋度上下浮(fu)動一個數量級都(dou)為正常），將膜放入對應的已稀釋待檢樣品中，置4℃混搖孵育隔(ge)夜；

7洗滌(di)：取出(chu)膜放(fang)在TBST中洗滌3×5min；

8二抗孵育：將(jiang)膜取出(chu)放入(ru)稀(xi)釋好的HRP標記的(de)二(er)抗（參照二(er)抗說明(ming)書進行稀(xi)釋）中，室溫混搖(yao)2h；

9洗滌(di)：取出膜放在(zai)TBST中(zhong)洗滌(di)3×5min；

10ECL顯色(se)：將(jiang)膜(mo)取(qu)出(chu)放(fang)入混勻的ECL顯色(se)液中(zhong)，孵(fu)育3min，將膜(mo)(mo)取出(chu)貼在(zai)有熒(ying)光角標的膠片(pian)上，迅速用保鮮膜(mo)(mo)包好(hao)；

11曝(pu)光：把底片放在(zai)暗盒中，根據熒(ying)光強度(du)分別對X光膠片(pian)作不同時間段的曝(pu)(pu)光，曝(pu)(pu)光結束后，將底片(pian)取出，1min顯影，30s清洗(xi)，1min定影，30s清洗，晾干；

12結果分析：用掃描儀將曝光(guang)后的X光膠片掃描，做后續(xu)結果(guo)分析。

選擇(ze)適當的細胞接種濃(nong)度。一般情(qing)況下，96孔培養板的(de)一內貼(tie)壁細胞長滿時約有(you)105個細(xi)胞(bao)。但由于不同細(xi)胞(bao)貼壁后面積(ji)差異很(hen)大，因此，在進行MTT試驗(yan)前，要(yao)進行(xing)預實驗(yan)檢測其貼壁率、倍增時(shi)間以(yi)及不同接(jie)種細(xi)胞數條(tiao)件下的生長曲線，確(que)定(ding)試驗(yan)中每孔的接(jie)種細(xi)胞數和培(pei)養(yang)(yang)時(shi)間，以(yi)保(bao)證培(pei)養(yang)(yang)終(zhong)止(zhi)致(zhi)細(xi)胞過(guo)滿(man)。這樣，才(cai)能保(bao)證MTT結(jie)晶(jing)形成酌量與細胞數(shu)呈的線性關(guan)系(xi)。否則細胞數(shu)太(tai)多敏感性降低(di)，太(tai)少觀察不(bu)到差異。

注意(yi):細(xi)胞(bao)株的(de)生物等級，由于有些(xie)細(xi)胞(bao)株及菌(jun)株屬于管制品，所以(yi)從國(guo)外購(gou)貨比較麻煩(fan)。

形(xing)態學(xue)改變:細胞體(ti)積明顯增大,為(wei)成熟淋巴細胞3-4倍。核膜清晰,核(he)染色(se)質疏松呈網狀。核(he)內見明顯(xian)核(he)仁1-4個(ge)。胞漿豐富,嗜堿(jian)性,有偽足樣突出。胞漿內有時可見小空(kong)泡。

細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養是(shi)一種無菌操(cao)(cao)作(zuo)技術，要(yao)求(qiu)工(gong)作(zuo)環境和(he)條件必須保證無微生物(wu)污染和(he)不受其(qi)它有(you)害(hai)因(yin)(yin)素(su)的(de)影響(xiang)。細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養室(shi)(shi)(shi)和(he)設(she)(she)計原則(ze)是(shi)防止微生物(wu)污染和(he)有(you)害(hai)因(yin)(yin)素(su)影響(xiang)，要(yao)求(qiu)工(gong)作(zuo)環境清潔、空氣(qi)清新(xin)，干燥和(he)無煙塵。細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養室(shi)(shi)(shi)的(de)設(she)(she)計原則(ze)一般是(shi)無菌操(cao)(cao)作(zuo)區設(she)(she)在室(shi)(shi)(shi)內較少走動的(de)內側，常(chang)規操(cao)(cao)作(zuo)和(he)封閉培(pei)(pei)養于(yu)一室(shi)(shi)(shi)，而洗刷(shua)消毒在另一室(shi)(shi)(shi)。

慧穎細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)庫 ATCC/ScienCell細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)技術|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)基(ji) *的ATCC細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，ATCC傳代細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，sciencell細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，sciencell原(yuan)代細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)，細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)技術，原(yuan)代細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)，動物(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)，植物(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)提(ti)供者(zhe)。 細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 主要經營品牌(pai)有ATCC，ScienCell，DSMZ，ALLCELLS，DV Biologics，Stemgent等(deng)，其中ATCC/ScienCell細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)zui為，傳代細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，復蘇細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，第二代細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)等(deng)，*，買的放心(xin)，做實驗(yan)也放心(xin)，歡(huan)迎訂購！

YB2/0[YB2-0]細胞，大鼠骨髓瘤(liu)細胞 價格\說明(ming)書(shu)\培養(yang)技術\來源

KG-1a細胞，人急性(xing)骨髓白(bai)血病細胞    25T

MV4-11細胞，人急性白血病細胞   25T

HL-60細(xi)胞(bao)，人(ren)急(ji)性早幼粒白(bai)血病(bing)細(xi)胞(bao)  25T

U937細胞，人急性早(zao)幼粒白血病細胞   25T

MOLM-13細(xi)胞，人(ren)急性髓系白血病(bing)細(xi)胞  25T

MOLM-14細(xi)胞，人(ren)急性(xing)髓系(xi)白血病(bing)細(xi)胞  25T

K562細胞，人慢性髓系白血病細胞 25T

HL-60細胞，人急性早幼粒白(bai)血病細胞  25T

CCRF-CEM細胞(bao)，人急性淋(lin)巴細胞(bao)白血病(bing)T淋(lin)巴細胞(bao) 25T

HS 505.T細胞，慢性淋巴細胞白血病（CLL）細胞  25T

invitrogen PHC9484    LIF Recombinant Human Protein   10 µg

invitrogen 13256029   bFGF Recombinant Human Protein  10 µg

invitrogen PHG0311    EGF Recombinant Human Protein   100 µg

invitrogen PHG0313    EGF Recombinant Human Protein   1 mg

invitrogen PHG0314    EGF Recombinant Human Protein   10 µg

invitrogen PHG0315    EGF Recombinant Human Protein   25 µg

invitrogen 17504044   B-27® Supplement (50X), serum free 10 mL

invitrogen 12585014   Insulin, human recombinant, zinc solution 5 mL

選(xuan)擇慧穎生物YB2/0[YB2-0]細胞(bao)，大鼠骨髓瘤(liu)細胞(bao)的(de)理由(you)：

高質量ATCC·ScienCell·DSMZ等產(chan)品(pin)對您的研究非常重要

所有(you)細胞入庫之前均經過嚴格的細胞質量檢(jian)測和鑒定

所有細(xi)胞在出庫之前均(jun)經過一(yi)次嚴(yan)格的質檢認證

確保細胞到(dao)每(mei)一位用戶(hu)手里都(dou)是狀(zhuang)態(tai)