NS-1細胞(bao)，小鼠骨髓瘤細胞(bao)  簡介：

細胞名稱：NS-1細胞

中文名稱：小鼠骨(gu)髓瘤(liu)細胞

生長(chang)狀態：貼壁生長(chang)

來源(yuan)：[ATCC: TIB-18]

NS-1細胞，小鼠(shu)骨(gu)髓瘤細胞  相關熱賣骨髓瘤細胞株有：

IR983F細(xi)胞(bao)(bao)，大鼠(shu)骨(gu)髓瘤細(xi)胞(bao)(bao)

YB2/0[YB2-0]細胞，大鼠骨髓瘤細胞[ATCC: CRL-1581]

LOX細胞，人骨髓瘤細胞

FO細胞，小鼠骨髓瘤細胞 [ATCC: CRL-1646]

J558細胞，小鼠骨髓瘤細胞[ATCC: TIB-6]

Y3-Ag 1.2.3，大鼠骨髓瘤細胞

1.試(shi)劑和溶(rong)液

1）轉印緩沖液(ye)：0.025M Tris base , 0.187 M甘氨酸 , 25%甲醇

2）氨基黑溶液：0.1% 酸(suan)性(xing)黑10B

3）1×TBST：25mM Tris-HCl ( pH 8.0 ) , 0.2 M NaCl ,0.1%Tween 20

4）封閉液：TBST配制(zhi)的(de)5%牛奶

5）抗體稀釋液：TBST配制的(de)5%牛奶

6）顯(xian)色系統(tong)：ECL顯(xian)色

2.實(shi)驗步(bu)驟(zou)

1電泳：將裂解液進(jin)行SDS-PAGE電泳，80v，30分鐘(zhong)，120v，90分鐘(zhong)；

2轉(zhuan)膜：PVDF膜在甲醇中(zhong)浸(jin)泡約30秒左(zuo)右，濾紙浸(jin)泡在轉(zhuan)印(yin)緩沖液預(yu)濕(shi)，半干法轉(zhuan)印(yin)到PVDF膜上(shang)，10v，150分鐘；

3染(ran)色：氨基黑(hei)染(ran)色5分鐘(zhong)，甲(jia)醇褪去背景色，觀察條帶；

4膜活(huo)(huo)化(hua)(hua)：將PVDF膜置于(yu)甲醇活(huo)(huo)化(hua)(hua)1min，用純水洗膜2次后再(zai)用TBST洗滌3次；

5封閉：將膜條置(zhi)于5%牛奶或2% BSA中(zhong)，室溫混(hun)搖2h；

6一(yi)抗(kang)孵育：將(jiang)待檢(jian)抗(kang)體(ti)用3%牛奶或2% BSA稀釋(shi)到合適濃度(du)（參照抗(kang)體(ti)說明書(shu)，根據客戶(hu)預(yu)實驗結(jie)果，稀釋(shi)度(du)上(shang)下(xia)浮(fu)動一(yi)個數(shu)量級都為正常），將(jiang)膜(mo)放入對(dui)應(ying)的已稀釋(shi)待檢(jian)樣品中，置4℃混搖孵育隔夜；

7洗(xi)滌：取出(chu)膜放在TBST中洗(xi)滌3×5min；

8二(er)(er)抗(kang)孵(fu)育(yu)：將(jiang)膜取出放入稀釋好的HRP標(biao)記的二(er)(er)抗(kang)（參(can)照(zhao)二(er)(er)抗(kang)說(shuo)明書進行稀釋）中，室溫混搖(yao)2h；

9洗(xi)滌(di)：取出膜放在TBST中洗(xi)滌(di)3×5min；

10ECL顯色(se)：將膜(mo)取出(chu)放(fang)入混勻的ECL顯色(se)液中，孵(fu)育(yu)3min，將膜(mo)取出(chu)貼在有熒光角標的膠(jiao)片上，迅速用(yong)保鮮膜(mo)包好；

11曝(pu)光(guang)(guang)(guang)：把底(di)片(pian)放在暗盒中，根據熒光(guang)(guang)(guang)強度分別對X光(guang)(guang)(guang)膠片(pian)作(zuo)不(bu)同時間段的曝(pu)光(guang)(guang)(guang)，曝(pu)光(guang)(guang)(guang)結束后(hou)，將底(di)片(pian)取出，1min顯影(ying)，30s清洗，1min定影(ying)，30s清洗，晾(liang)干(gan)；

12結果(guo)分(fen)析：用掃描儀將曝光(guang)(guang)后(hou)的(de)X光(guang)(guang)膠片掃描，做后(hou)續結果(guo)分(fen)析。

選擇適當的(de)(de)細(xi)胞接(jie)種濃度。一(yi)(yi)般(ban)情(qing)況下，96孔培(pei)養板的(de)(de)一(yi)(yi)內(nei)貼壁(bi)細(xi)胞長(chang)(chang)滿(man)時約(yue)有105個細(xi)胞。但由于不同細(xi)胞貼壁(bi)后面積(ji)差異很(hen)大，因此，在進(jin)行MTT試(shi)(shi)驗前(qian)，要進(jin)行預實驗檢測其貼壁(bi)率(lv)、倍(bei)增時間以(yi)(yi)及不同接(jie)種細(xi)胞數條件下的(de)(de)生長(chang)(chang)曲線，確(que)定試(shi)(shi)驗中每孔的(de)(de)接(jie)種細(xi)胞數和培(pei)養時間，以(yi)(yi)保(bao)證培(pei)養終止(zhi)致細(xi)胞過滿(man)。這樣，才能(neng)保(bao)證MTT結晶形(xing)成(cheng)酌量(liang)與細(xi)胞數呈的(de)(de)線性關(guan)系。否則(ze)細(xi)胞數太多敏感性降低，太少觀察不到差異。

注意:細胞株的生物等級，由于(yu)有些細胞株及菌(jun)株屬于(yu)管制品，所(suo)以從國外購貨比較麻煩。

形態(tai)學改(gai)變:細胞體積(ji)明顯增(zeng)大,為成熟淋巴細胞3-4倍。核(he)膜清(qing)晰,核(he)染色質疏松(song)呈(cheng)網狀。核(he)內(nei)見(jian)明顯核(he)仁1-4個。胞漿(jiang)豐(feng)富,嗜堿性,有偽(wei)足樣突(tu)出(chu)。胞漿(jiang)內(nei)有時可見(jian)小空(kong)泡。

細胞(bao)培(pei)養(yang)是(shi)一(yi)(yi)種無菌操作技術，要求工作環境和(he)條件必(bi)須保證無微生物污(wu)染和(he)不受其(qi)它有害(hai)因素的影響。細胞(bao)培(pei)養(yang)室(shi)(shi)和(he)設計(ji)原則是(shi)防(fang)止微生物污(wu)染和(he)有害(hai)因素影響，要求工作環境清(qing)潔、空氣清(qing)新，干燥和(he)無煙塵。細胞(bao)培(pei)養(yang)室(shi)(shi)的設計(ji)原則一(yi)(yi)般(ban)是(shi)無菌操作區設在室(shi)(shi)內(nei)較少走動的內(nei)側(ce)，常規操作和(he)封閉(bi)培(pei)養(yang)于一(yi)(yi)室(shi)(shi)，而洗刷消毒(du)在另一(yi)(yi)室(shi)(shi)。

慧穎細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)庫 ATCC/ScienCell細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)技術(shu)|細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基 *的(de)ATCC細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，ATCC傳代細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，sciencell細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，sciencell原(yuan)代細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)，細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)技術(shu)，原(yuan)代細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)，動物細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)，植物細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)提供者。 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基 主要經營品牌(pai)有ATCC，ScienCell，DSMZ，ALLCELLS，DV Biologics，Stemgent等，其中ATCC/ScienCell細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)zui為，傳代細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，復蘇細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，第(di)二代細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)等，*，買的(de)放心(xin)，做實驗也放心(xin)，歡迎訂購！

價格\說明書\培養技術\來源

KG-1a細(xi)胞，人急性骨(gu)髓(sui)白血病細(xi)胞    25T

MV4-11細胞，人(ren)急性(xing)白血病細胞   25T

HL-60細胞，人急性早(zao)幼(you)粒白血病細胞  25T

U937細(xi)胞(bao)，人急性早幼粒(li)白血病(bing)細(xi)胞(bao)   25T

MOLM-13細胞，人急(ji)性髓系白血病細胞  25T

MOLM-14細胞，人急性髓系白血病細胞  25T

K562細(xi)胞，人慢性(xing)髓(sui)系白血(xue)病細(xi)胞 25T

HL-60細(xi)胞，人(ren)急性早幼粒(li)白血病細(xi)胞  25T

CCRF-CEM細胞，人急性淋(lin)巴細胞白血病T淋(lin)巴細胞 25T

HS 505.T細胞(bao)(bao)，慢(man)性淋巴細胞(bao)(bao)白血(xue)病（CLL）細胞(bao)(bao)  25T

invitrogen PHC9484    LIF Recombinant Human Protein   10 µg

invitrogen 13256029   bFGF Recombinant Human Protein  10 µg

invitrogen PHG0311    EGF Recombinant Human Protein   100 µg

invitrogen PHG0313    EGF Recombinant Human Protein   1 mg

invitrogen PHG0314    EGF Recombinant Human Protein   10 µg

invitrogen PHG0315    EGF Recombinant Human Protein   25 µg

invitrogen 17504044   B-27® Supplement (50X), serum free 10 mL

invitrogen 12585014   Insulin, human recombinant, zinc solution 5 mL

選(xuan)擇(ze)慧(hui)穎生物的理由：

高(gao)質量ATCC·ScienCell·DSMZ等產品對您的研究非常重要

所有細胞(bao)入庫之前均經過(guo)嚴格的細胞(bao)質量檢測和(he)鑒定

所(suo)有細胞(bao)在出庫(ku)之(zhi)前均(jun)經過(guo)一次嚴格的(de)質(zhi)檢認(ren)證

確保細(xi)胞到每一位用(yong)戶(hu)手里都是狀態