LOX細胞(bao)，人骨髓瘤(liu)細胞(bao) 簡介：

細胞名稱：LOX細胞

中文名稱：人(ren)骨髓瘤細(xi)胞

生(sheng)長狀態：貼(tie)壁生(sheng)長

來源(yuan)：ATCC

LOX細胞，人骨(gu)髓瘤細胞 相關熱賣骨髓瘤細胞株有：

NS-1細胞，小鼠骨髓瘤細胞 [ATCC: TIB-18]

IR983F細(xi)胞(bao)，大鼠骨髓瘤細(xi)胞(bao)

YB2/0[YB2-0]細胞(bao)(bao)，大鼠骨髓瘤(liu)細胞(bao)(bao)[ATCC: CRL-1581]

FO細胞(bao)，小鼠骨髓瘤細胞(bao) [ATCC: CRL-1646]

J558細(xi)胞，小鼠(shu)骨髓(sui)瘤細(xi)胞[ATCC: TIB-6]

Y3-Ag 1.2.3，大(da)鼠骨髓瘤細胞

1.試劑(ji)和溶液(ye)

1）轉印緩(huan)沖液：0.025M Tris base , 0.187 M甘氨(an)酸 , 25%甲醇

2）氨基黑溶液：0.1% 酸(suan)性黑10B

3）1×TBST：25mM Tris-HCl ( pH 8.0 ) , 0.2 M NaCl ,0.1%Tween 20

4）封(feng)閉液(ye)：TBST配制的(de)5%牛奶

5）抗體(ti)稀釋液(ye)：TBST配(pei)制的5%牛奶

6）顯(xian)色(se)系統：ECL顯(xian)色(se)

2.實(shi)驗步驟

1電泳(yong)：將裂解液進行SDS-PAGE電泳(yong)，80v，30分鐘(zhong)，120v，90分鐘(zhong)；

2轉膜(mo)：PVDF膜(mo)在甲醇中浸(jin)泡(pao)(pao)約(yue)30秒左右(you)，濾紙浸(jin)泡(pao)(pao)在轉印緩沖液(ye)預濕，半干法(fa)轉印到PVDF膜(mo)上，10v，150分鐘；

3染(ran)色(se)：氨基(ji)黑染(ran)色(se)5分鐘，甲醇褪去(qu)背景(jing)色(se)，觀察(cha)條帶；

4膜(mo)(mo)活化(hua)：將PVDF膜(mo)(mo)置(zhi)于(yu)甲醇(chun)活化(hua)1min，用(yong)純水洗膜(mo)(mo)2次后再(zai)用(yong)TBST洗滌3次；

5封閉：將膜條置于5%牛奶或2% BSA中(zhong)，室溫混(hun)搖2h；

6一抗孵育(yu)：將(jiang)待檢抗體(ti)用3%牛(niu)奶或2% BSA稀釋到合適(shi)濃度（參照抗體(ti)說明書，根據客戶預實(shi)驗結果(guo)，稀釋度上(shang)下(xia)浮動一個數量級(ji)都為正常），將(jiang)膜(mo)放入對應的已(yi)稀釋待檢樣品中，置(zhi)4℃混搖孵育(yu)隔夜；

7洗滌(di)：取出膜放在TBST中洗滌(di)3×5min；

8二(er)(er)抗孵育：將膜取出(chu)放入稀(xi)釋(shi)好的HRP標記的二(er)(er)抗（參照二(er)(er)抗說明書進行稀(xi)釋(shi)）中，室溫混搖(yao)2h；

9洗滌：取出膜放在TBST中洗滌3×5min；

10ECL顯色：將膜取出放入混勻的(de)ECL顯色液中，孵育3min，將膜取出貼(tie)在有熒光角(jiao)標的(de)膠片(pian)上，迅速用保鮮膜包好；

11曝光：把(ba)底片(pian)放在(zai)暗盒中，根據熒光強(qiang)度分別對X光膠(jiao)片(pian)作(zuo)不同時間(jian)段的曝光，曝光結(jie)束(shu)后，將(jiang)底片(pian)取(qu)出，1min顯影(ying)，30s清洗，1min定(ding)影(ying)，30s清洗，晾干(gan)；

12結(jie)果分(fen)析：用掃描儀將曝光后(hou)的(de)X光膠片掃描，做后(hou)續結(jie)果分(fen)析。

選擇適當的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)接種濃度(du)。一般情況下，96孔培(pei)(pei)養板的(de)(de)一內(nei)貼(tie)壁(bi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)長滿(man)時約(yue)有105個細(xi)(xi)胞(bao)(bao)。但由于不同細(xi)(xi)胞(bao)(bao)貼(tie)壁(bi)后面積(ji)差異很大(da)，因此(ci)，在進(jin)行MTT試驗(yan)前，要進(jin)行預實驗(yan)檢(jian)測(ce)其(qi)貼(tie)壁(bi)率、倍(bei)增時間(jian)以及不同接種細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)條件(jian)下的(de)(de)生(sheng)長曲(qu)線，確定試驗(yan)中每孔的(de)(de)接種細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)和培(pei)(pei)養時間(jian)，以保(bao)(bao)證培(pei)(pei)養終止致細(xi)(xi)胞(bao)(bao)過滿(man)。這(zhe)樣，才能保(bao)(bao)證MTT結晶形成酌量與(yu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)呈的(de)(de)線性關系。否(fou)則細(xi)(xi)胞(bao)(bao)數(shu)太多敏感性降低，太少觀察不到差異。

注意:細(xi)胞株(zhu)(zhu)的生物(wu)等(deng)級，由于有些細(xi)胞株(zhu)(zhu)及菌株(zhu)(zhu)屬于管(guan)制品，所(suo)以從國外購貨比較麻煩。

形態學改(gai)變(bian):細胞(bao)體(ti)積明(ming)顯增大,為(wei)成熟淋巴細胞(bao)3-4倍。核(he)膜清晰,核(he)染色(se)質疏松呈網狀。核(he)內見明(ming)顯核(he)仁1-4個。胞(bao)漿豐富,嗜堿性,有偽(wei)足樣突出(chu)。胞(bao)漿內有時可見小空(kong)泡。

細胞(bao)培(pei)養(yang)是(shi)一種(zhong)無(wu)菌(jun)操作(zuo)技術(shu)，要(yao)(yao)求(qiu)工作(zuo)環(huan)境和(he)條件(jian)必須保證(zheng)無(wu)微生(sheng)物(wu)污染和(he)不(bu)受其它有害(hai)因(yin)素的影(ying)響。細胞(bao)培(pei)養(yang)室(shi)和(he)設計(ji)原(yuan)(yuan)則(ze)是(shi)防止微生(sheng)物(wu)污染和(he)有害(hai)因(yin)素影(ying)響，要(yao)(yao)求(qiu)工作(zuo)環(huan)境清潔、空氣清新，干(gan)燥和(he)無(wu)煙(yan)塵。細胞(bao)培(pei)養(yang)室(shi)的設計(ji)原(yuan)(yuan)則(ze)一般是(shi)無(wu)菌(jun)操作(zuo)區設在室(shi)內(nei)較少走(zou)動(dong)的內(nei)側，常規(gui)操作(zuo)和(he)封閉(bi)培(pei)養(yang)于一室(shi)，而洗(xi)刷消毒在另一室(shi)。

慧穎細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)庫 ATCC/ScienCell細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)技術|細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基 *的ATCC細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，ATCC傳(chuan)代(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，sciencell細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，sciencell原代(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)，細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)技術，原代(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)，動物細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)，植(zhi)物細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)提供者。 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基 主要經(jing)營(ying)品牌有ATCC，ScienCell，DSMZ，ALLCELLS，DV Biologics，Stemgent等，其中ATCC/ScienCell細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)zui為，傳(chuan)代(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，復蘇細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，第二代(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)等，*，買的放(fang)心，做實驗也放(fang)心，歡迎訂購(gou)！

 價格\說明書\培養技術\來源

KG-1a細胞，人(ren)急性(xing)骨髓白血(xue)病細胞    25T

MV4-11細胞(bao)(bao)，人(ren)急性白(bai)血病細胞(bao)(bao)   25T

HL-60細胞(bao)(bao)，人急(ji)性早幼(you)粒(li)白血病細胞(bao)(bao)  25T

U937細胞，人急(ji)性早幼粒白血病細胞   25T

MOLM-13細(xi)胞，人(ren)急性(xing)髓系(xi)白(bai)血(xue)病細(xi)胞  25T

MOLM-14細(xi)胞(bao)(bao)，人急性(xing)髓系白血病(bing)細(xi)胞(bao)(bao)  25T

K562細(xi)胞，人慢(man)性髓(sui)系白血病細(xi)胞 25T

HL-60細胞，人急(ji)性早幼粒白血病(bing)細胞  25T

CCRF-CEM細胞(bao)，人急性淋巴細胞(bao)白血病T淋巴細胞(bao) 25T

HS 505.T細(xi)胞(bao)，慢性淋巴細(xi)胞(bao)白血病（CLL）細(xi)胞(bao)  25T

invitrogen PHC9484    LIF Recombinant Human Protein ;  10 µg

invitrogen 13256029   bFGF Recombinant Human Protein  10 µg

invitrogen PHG0311    EGF Recombinant Human Protein   100 µg

invitrogen PHG0313    EGF Recombinant Human Protein   1 mg

invitrogen PHG0314    EGF Recombinant Human Protein   10 µg

invitrogen PHG0315    EGF Recombinant Human Protein   25 µg

invitrogen 17504044   B-27® Supplement (50X), serum free 10 mL

invitrogen 12585014   Insulin, human recombinant, zinc solution 5 mL

選擇(ze)慧穎生物的理(li)由(you)：

高質量ATCC·ScienCell·DSMZ等產品(pin)對(dui)您的研究非常(chang)重要

所有細胞入庫之(zhi)前均經過嚴格的細胞質量檢測和鑒定(ding)

所有細胞在出庫(ku)之前均經(jing)過一次嚴格的質(zhi)檢認(ren)證

確保細(xi)胞到(dao)每一位用戶手里都是狀態