FO FO細胞 細胞株(zhu)培養 簡介：

細胞名(ming)稱：FO細胞

中(zhong)文名稱：小鼠(shu)骨髓(sui)瘤(liu)細胞

生(sheng)長狀態(tai)：貼壁(bi)生(sheng)長

來源：ATCC

FO FO細胞 細胞株培養 相關熱賣骨髓瘤細胞株有：

LOX細胞，人骨髓瘤細胞

NS-1細胞(bao)，小鼠(shu)骨髓(sui)瘤細胞(bao) [ATCC: TIB-18]

IR983F細胞，大鼠骨髓瘤細胞

YB2/0[YB2-0]細(xi)胞，大鼠骨髓瘤(liu)細(xi)胞[ATCC: CRL-1581]

LOX細胞(bao)，人骨髓瘤細胞(bao)

FO細(xi)胞，小(xiao)鼠骨(gu)髓瘤細(xi)胞 [ATCC: CRL-1646]

J558細(xi)胞，小鼠骨髓瘤細(xi)胞[ATCC: TIB-6]

Y3-Ag 1.2.3，大鼠骨髓瘤細胞

1.試劑(ji)和溶液(ye)

1）轉(zhuan)印(yin)緩(huan)沖(chong)液：0.025M Tris base , 0.187 M甘氨酸 , 25%甲(jia)醇

2）氨基黑溶液：0.1% 酸(suan)性黑10B

3）1×TBST：25mM Tris-HCl ( pH 8.0 ) , 0.2 M NaCl ,0.1%Tween 20

4）封閉液(ye)：TBST配制的5%牛奶

5）抗體(ti)稀釋(shi)液(ye)：TBST配制的5%牛奶

6）顯(xian)色系統：ECL顯(xian)色

2.實驗(yan)步驟

1電泳：將(jiang)裂(lie)解液進行(xing)SDS-PAGE電泳，80v，30分鐘，120v，90分鐘；

2轉(zhuan)(zhuan)膜(mo)(mo)：PVDF膜(mo)(mo)在(zai)甲醇中浸泡約30秒左右，濾紙浸泡在(zai)轉(zhuan)(zhuan)印緩沖液預濕，半干法轉(zhuan)(zhuan)印到PVDF膜(mo)(mo)上(shang)，10v，150分(fen)鐘；

3染(ran)色(se)(se)：氨基黑染(ran)色(se)(se)5分鐘，甲醇(chun)褪去背景色(se)(se)，觀(guan)察(cha)條帶；

4膜活(huo)化(hua)：將(jiang)PVDF膜置(zhi)于甲醇活(huo)化(hua)1min，用(yong)(yong)純水洗膜2次后再(zai)用(yong)(yong)TBST洗滌3次；

5封閉：將(jiang)膜條(tiao)置(zhi)于5%牛奶或2% BSA中，室溫混搖(yao)2h；

6一抗(kang)孵育：將待檢抗(kang)體(ti)(ti)用3%牛奶或2% BSA稀(xi)釋到合適濃度（參照抗(kang)體(ti)(ti)說明書，根(gen)據客戶預(yu)實驗結果，稀(xi)釋度上下浮動一個數量級都為正常），將膜放入(ru)對應的已稀(xi)釋待檢樣品中，置4℃混搖孵育隔(ge)夜；

7洗滌：取出膜放在TBST中洗滌3×5min；

8二抗孵育(yu)：將膜(mo)取出放入稀釋(shi)好(hao)的(de)HRP標記的(de)二抗（參照二抗說明(ming)書進行稀釋(shi)）中，室溫混搖2h；

9洗滌：取出膜(mo)放在TBST中(zhong)洗滌3×5min；

10ECL顯色：將(jiang)膜取(qu)出放入混勻的(de)ECL顯色液中，孵育3min，將(jiang)膜取(qu)出貼在有熒光(guang)角標的(de)膠片上(shang)，迅速(su)用保(bao)鮮膜包(bao)好；

11曝光(guang)(guang)(guang)：把底片(pian)放在暗(an)盒中(zhong)，根據熒光(guang)(guang)(guang)強(qiang)度分別對X光(guang)(guang)(guang)膠片(pian)作不同(tong)時間(jian)段的曝光(guang)(guang)(guang)，曝光(guang)(guang)(guang)結束后(hou)，將(jiang)底片(pian)取出，1min顯影，30s清洗(xi)(xi)，1min定影，30s清洗(xi)(xi)，晾(liang)干；

12結果分析：用掃(sao)描儀將曝光后的X光膠(jiao)片掃(sao)描，做后續結果分析。

選擇適(shi)當的(de)細(xi)胞(bao)(bao)接種濃(nong)度。一般(ban)情況(kuang)下，96孔(kong)培(pei)養板的(de)一內貼(tie)壁細(xi)胞(bao)(bao)長滿(man)時(shi)約有105個細(xi)胞(bao)(bao)。但由于不同(tong)細(xi)胞(bao)(bao)貼(tie)壁后(hou)面積差(cha)異(yi)很大，因此，在(zai)進(jin)行MTT試驗前，要進(jin)行預實驗檢測(ce)其貼(tie)壁率(lv)、倍增時(shi)間以及不同(tong)接種細(xi)胞(bao)(bao)數條(tiao)件下的(de)生長曲線，確定試驗中每孔(kong)的(de)接種細(xi)胞(bao)(bao)數和培(pei)養時(shi)間，以保證培(pei)養終止(zhi)致細(xi)胞(bao)(bao)過滿(man)。這(zhe)樣，才能保證MTT結晶形成(cheng)酌量與細(xi)胞(bao)(bao)數呈的(de)線性(xing)關系。否則細(xi)胞(bao)(bao)數太(tai)多敏感性(xing)降低，太(tai)少觀察不到(dao)差(cha)異(yi)。

注意(yi):細胞(bao)株(zhu)的(de)生(sheng)物等級，由(you)于有些細胞(bao)株(zhu)及菌株(zhu)屬于管制品，所以(yi)從國外購貨比較麻(ma)煩。

形(xing)態學改變:細(xi)胞體積(ji)明(ming)顯增大(da),為成熟淋巴細(xi)胞3-4倍。核膜(mo)清晰,核染色質疏松呈網(wang)狀(zhuang)。核內(nei)見明(ming)顯核仁1-4個。胞漿(jiang)豐富(fu),嗜堿性,有(you)偽足樣突出。胞漿(jiang)內(nei)有(you)時(shi)可見小空泡。

細(xi)胞培(pei)(pei)養是一(yi)種無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)技(ji)術，要(yao)求工(gong)作(zuo)環境和(he)(he)(he)(he)條件必須(xu)保證無(wu)微生(sheng)物污(wu)染和(he)(he)(he)(he)不受其它有(you)害(hai)因素的影響(xiang)。細(xi)胞培(pei)(pei)養室和(he)(he)(he)(he)設(she)計原則是防止(zhi)微生(sheng)物污(wu)染和(he)(he)(he)(he)有(you)害(hai)因素影響(xiang)，要(yao)求工(gong)作(zuo)環境清潔、空氣清新，干燥和(he)(he)(he)(he)無(wu)煙(yan)塵。細(xi)胞培(pei)(pei)養室的設(she)計原則一(yi)般(ban)是無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)區設(she)在室內較(jiao)少走(zou)動的內側，常規(gui)操(cao)作(zuo)和(he)(he)(he)(he)封(feng)閉培(pei)(pei)養于一(yi)室，而洗刷消毒在另一(yi)室。

慧(hui)穎細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)庫 ATCC/ScienCell細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培養(yang)(yang)技(ji)術|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培養(yang)(yang)基 *的(de)ATCC細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，ATCC傳(chuan)(chuan)代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，sciencell細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，sciencell原代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培養(yang)(yang)，細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培養(yang)(yang)技(ji)術，原代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培養(yang)(yang)，動物(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培養(yang)(yang)，植物(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培養(yang)(yang)提供者。 細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培養(yang)(yang)基 主要經營品牌(pai)有ATCC，ScienCell，DSMZ，ALLCELLS，DV Biologics，Stemgent等(deng)，其中ATCC/ScienCell細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)zui為(wei)，傳(chuan)(chuan)代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，復蘇細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，第二代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)等(deng)，*，買的(de)放心，做(zuo)實驗也(ye)放心，歡迎訂購！

 價格\說明書\來源\特征特性

KG-1a細胞，人急性骨髓(sui)白血(xue)病細胞    25T

MV4-11細胞，人(ren)急性白血病細胞   25T

HL-60細(xi)胞(bao)，人急(ji)性早幼粒白血病細(xi)胞(bao)  25T

U937細(xi)(xi)胞(bao)，人(ren)急性早幼粒白血病細(xi)(xi)胞(bao)   25T

MOLM-13細胞，人急性髓(sui)系白(bai)血病細胞  25T

MOLM-14細胞(bao)，人急性(xing)髓(sui)系白(bai)血病細胞(bao)  25T

K562細胞，人慢性髓系白血病(bing)細胞 25T

HL-60細胞，人急性早幼粒白(bai)血病(bing)細胞  25T

CCRF-CEM細(xi)(xi)胞(bao)，人(ren)急性淋巴細(xi)(xi)胞(bao)白血病(bing)T淋巴細(xi)(xi)胞(bao) 25T

HS 505.T細胞(bao)，慢性淋巴細胞(bao)白(bai)血病（CLL）細胞(bao)  25T

invitrogen PHC9484    LIF Recombinant Human Protein   10 µg

invitrogen 13256029   bFGF Recombinant Human Protein  10 µg

invitrogen PHG0311    EGF Recombinant Human Protein   100 µg

invitrogen PHG0313    EGF Recombinant Human Protein   1 mg

invitrogen PHG0314    EGF Recombinant Human Protein   10 µg

invitrogen PHG0315    EGF Recombinant Human Protein   25 µg

invitrogen 17504044   B-27® Supplement (50X), serum free 10 mL

invitrogen 12585014   Insulin, human recombinant, zinc solution 5 mL

選擇慧(hui)穎(ying)生物的理由：

高質量(liang)ATCC·ScienCell·DSMZ等(deng)產品對(dui)您(nin)的研究非常重要

所(suo)有(you)細胞入庫之前均經過嚴格的細胞質(zhi)量(liang)檢測和(he)鑒定

所有細胞(bao)在(zai)出庫之(zhi)前均經過一次(ci)嚴(yan)格的質檢認證

確保細胞(bao)到每一位用戶手里都是狀態