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產品名(ming)稱(cheng):HL-7702
中(zhong)文名稱:人(ren)肝細胞
庫(ku)存狀態:現貨
細(xi)胞規格:株
質控標準:無支原體(ti)、無污染、符合(he)標準
運(yun)(yun)(yun)輸(shu)方(fang)式:新鮮運(yun)(yun)(yun)輸(shu)和凍(dong)存(cun)管運(yun)(yun)(yun)輸(shu)
貨(huo)期:新鮮運輸需要(yao)1-2周,凍存管運輸的(de)需要(yao)2-3天
,質粒(li)的相關知識:
一.如何閱讀質粒圖譜
*步(bu):首先看 Ori 的位置,了(le)解(jie)質(zhi)(zhi)粒的類型(原核/真核/穿梭(suo)質(zhi)(zhi)粒)。
第二步:再(zai)看篩選標記,如抗性,決定(ding)使用什么篩選標記。
--Ampr 水解β-內(nei)酰(xian)胺(an)環,解除(chu)氨(an)芐的毒性;
--tetr 可以阻止四環素(su)進入細胞(bao);
--camr 生(sheng)成氯霉素羥乙(yi)酰基衍生(sheng)物,使之(zhi)失去毒性;
--neor(kanr)氨基糖苷磷酸轉移(yi)酶 使G418(長那霉素衍生物)失活;
--hygr 使潮霉素(su)β失活。
第三步:看(kan)多克隆位點(dian)(MCS)。它具有(you)多個限制酶(mei)的(de)單一切點(dian),便于外源(yuan)基因的(de)插入。如果在這(zhe)些位點(dian)外有(you)外源(yuan)基因的(de)插入,會導致某種(zhong)標志基因的(de)失活(huo),從而便于篩選。MCS決定(ding)了能(neng)不能(neng)放置目的(de)基因以及如何放置目的(de)基因。
第四步:再(zai)看外(wai)源DNA插入片(pian)段(duan)(duan)大(da)小(xiao)。質粒(li)一(yi)般(ban)只(zhi)能容納小(xiao)于(yu)10Kb的外(wai)源DNA片(pian)段(duan)(duan)。一(yi)般(ban)來(lai)說(shuo),外(wai)源DNA片(pian)段(duan)(duan)越(yue)長,越(yue)難(nan)插入,越(yue)不穩(wen)定(ding),轉化效率越(yue)低。
第(di)五步:是(shi)否含有(you)(you)表達(da)系統元(yuan)(yuan)件,即啟動子(zi)-核糖體(ti)結合位(wei)點-克隆位(wei)點-轉錄終止信號,這(zhe)是(shi)用(yong)來區別(bie)克隆載(zai)體(ti)與(yu)表達(da)載(zai)體(ti)。在克隆載(zai)體(ti)中加入一些與(yu)表達(da)調控有(you)(you)關的(de)元(yuan)(yuan)件即成為表達(da)載(zai)體(ti)。選用(yong)哪種載(zai)體(ti),要以(yi)實驗目的(de)為依據。
二(er).如何選(xuan)擇(ze)載體
把目的基因(yin)通過基因(yin)工(gong)(gong)程手段送(song)到生(sheng)物細(xi)胞(bao)(受體細(xi)胞(bao)),需要(yao)運(yun)載工(gong)(gong)具(交通工(gong)(gong)具)攜(xie)帶(dai)外源基因(yin)進(jin)入受體細(xi)胞(bao),這(zhe)種運(yun)載工(gong)(gong)具就叫做(zuo)載體(vector)。基因(yin)工(gong)(gong)程所(suo)用(yong)(yong)的vector實際上(shang)是用(yong)(yong)來(lai)攜(xie)帶(dai)目的基因(yin)片段進(jin)入受體細(xi)胞(bao)的 DNA。
選擇載(zai)體(ti)主要(yao)(yao)依據構建的(de)目的(de),同時要(yao)(yao)考(kao)慮載(zai)體(ti)中應有(you)合(he)適的(de)限制酶切位點。如果(guo)構建的(de)目的(de)是要(yao)(yao)表(biao)達一(yi)個特定的(de)基因,則要(yao)(yao)選擇合(he)適的(de)表(biao)達載(zai)體(ti)。
載體選(xuan)擇主(zhu)要考慮下述3點:
1. 構建DNA重組(zu)體的(de)目的(de):克隆載(zai)體/表(biao)達(da)載(zai)體。
2. 載(zai)體的類型(xing):
克(ke)隆(long)(long)載(zai)體的克(ke)隆(long)(long)能力:根據克(ke)隆(long)(long)片段大(da)小(大(da)選大(da),小選小)。如<10kb選質粒(li)。
表達載體(ti):根據受體(ti)細胞類型:原(yuan)核/真(zhen)核/穿梭,E.coli/哺(bu)乳類細胞表達載體(ti)。
原核(he)表(biao)達載(zai)體要選擇合適的啟動子(zi)及相(xiang)應的受(shou)體菌;表(biao)達真核(he)蛋(dan)白時需注(zhu)意閱讀框錯位問題(ti);表(biao)達天然蛋(dan)白和融合蛋(dan)白所需載(zai)體亦有區別。
3. 選用質粒做載體的4點要求:
(1)選分子量小的(de)質粒,即小載體(1~1.5 kb):不(bu)易損壞(huai),在細菌(jun)里(li)面(mian)拷貝數也多(也有(you)大載體);
(2)一般使用松弛型質粒在細菌里擴增不受約束,一般10個(ge)以上的拷貝,而嚴謹型質粒<10個(ge)。
(3)必需具(ju)備一個(ge)以(yi)上的酶(mei)切位點,有選(xuan)擇的余地;
(4)必(bi)需有易檢(jian)測的標記,多是抗生素的抗性基(ji)因。
無論選用(yong)哪種載體,首先都要獲得(de)載體分(fen)子(zi),然后(hou)采用(yong)適(shi)當(dang)的限制酶將載體DNA進行(xing)(xing)切割(ge),獲得(de)載體片(pian)(pian)段(duan),以便于與目的基(ji)因片(pian)(pian)段(duan)進行(xing)(xing)連(lian)接。
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血清介紹:
產品名(ming)稱 貨號 來(lai)源 規(gui)格(ge) 市(shi)場價(jia)格 備注
胎(tai)牛血清FBS S-FBS-SA-011 SOUTH AMERICA 100ML 1100 較(jiao)貴細胞,原代、腫瘤細胞均(jun)可
胎牛血清FBS S-FBS-SA-015 SOUTH AMERICA 500ML 2500 較貴細胞,原代、腫瘤細(xi)胞(bao)均可胎(tai)牛血(xue)清(qing)FBS S-FBS-US-015 USA 500ML 4800 胚胎干細胞,神(shen)經類(lei)、昆(kun)蟲、哺(bu)乳細胞等
超低(di)IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS S-FBS-SA-055 SOUTH AMERICA 500ML 5200
透析胎牛血清Dialyzed FBS S-FBS-US-065 USA 500ML 5800
活性炭(tan)/葡聚(ju)糖(tang)處理胎(tai)牛(niu)血清Charcoal Stripped FBS S-FBS-AU-045 AUSTRALIA 500ML 5800
備注:SERANA血清(qing)生產:
SERANA血清生(sheng)產原(yuan)料均符(fu)合FDA及EC標準,公司通過了ISO9001認(ren)(ren)證。絕大多(duo)數來源的FBS通過EDQM(歐(ou)洲藥品質量管(guan)理局)認(ren)(ren)證。
完整可追(zhui)溯(su)性(xing):從血清(qing)原料的(de)(de)收(shou)集直(zhi)至zui終無(wu)菌過濾(lv)的(de)(de)產品,SERANA管理(li)并記(ji)(ji)錄(lu)(lu)了(le)所有(you)相(xiang)關(guan)的(de)(de)進程。這(zhe)保證(zheng)(zheng)了(le)從動(dong)物源直(zhi)到終產品的(de)(de)完整可追(zhui)溯(su)性(xing)。SERANA為所有(you)的(de)(de)客戶提供完整全(quan)面的(de)(de)批次記(ji)(ji)錄(lu)(lu),包括原產地證(zheng)(zheng)明、健(jian)康證(zheng)(zheng)明、分析證(zheng)(zheng)書和其(qi)他(ta)批簽發記(ji)(ji)錄(lu)(lu)。
血(xue)清產(chan)品的檢測(ce)(ce)和測(ce)(ce)試(shi):胎(tai)(tai)牛(niu)(niu)采集血(xue)清前,懷(huai)孕胎(tai)(tai)牛(niu)(niu)會按(an)歐洲EU Regulation 999/2001規定進行BSE檢測(ce)(ce),只(zhi)有(you)BSE檢測(ce)(ce)陰性的才被采集;胎(tai)(tai)牛(niu)(niu)血(xue)清經3次(ci)100納(na)米過(guo)濾,經BVD、IBR、PI3等(deng)病(bing)毒檢測(ce)(ce);細菌、真菌、支原(yuan)體(ti)檢測(ce)(ce);每一(yi)批(pi)胎(tai)(tai)牛(niu)(niu)血(xue)清都經生(sheng)長測(ce)(ce)試(shi)和克隆率測(ce)(ce)試(shi),測(ce)(ce)試(shi)細胞包括:HeLa, L929, SP2/O-AG14, MRC-5,CHO and BHK。SERANA胎(tai)(tai)牛(niu)(niu)血(xue)清的內毒素含量(liang)非(fei)常(chang)低,有(you)些批(pi)次(ci)甚至(zhi)低于0.02 EU/ml。
樣品(pin)的(de)供應和(he)批號(hao)的(de)保(bao)留(liu):SERANA血(xue)清會按客(ke)戶(hu)的(de)需求提(ti)供2-3個不同批次規格(ge)為50ml的(de)免(mian)費(fei)樣品(pin)供客(ke)戶(hu)篩選(xuan),篩選(xuan)合格(ge)的(de)批次,SERANA會為客(ke)戶(hu)免(mian)費(fei)儲(chu)存12-18個月(yue)。
以(yi)上只是慧穎生物的(de)部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)產(chan)品,若沒發現您需要的(de)產(chan)品請(qing),慧穎(ying)生(sheng)物還(huan)提(ti)供各種菌(jun)株,血清,培養基,染(ran)色液,藥敏(min)試劑,藥敏(min)試紙,藥敏(min)試條,基因檢測,凝膠過濾填料等實驗室用品,詳(xiang)詢。