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大(da)(da)鼠(shu)(shu)(shu)顆粒(li)細(xi)胞(bao) 大(da)(da)鼠(shu)(shu)(shu)晶狀體上皮(pi)細(xi)胞(bao) 大(da)(da)鼠(shu)(shu)(shu)黒質神經元 大(da)(da)鼠(shu)(shu)(shu)海馬星形膠(jiao)質細(xi)胞(bao) 大(da)(da)鼠(shu)(shu)(shu)骨髓間充(chong)質干細(xi)胞(bao) 大(da)(da)鼠(shu)(shu)(shu)肝星狀細(xi)胞(bao) 大(da)(da)鼠(shu)(shu)(shu)肝細(xi)胞(bao) 大(da)(da)鼠(shu)(shu)(shu)垂體細(xi)胞(bao) 成纖(xian)維細(xi)胞(bao) 成人(ren)心肌細(xi)胞(bao) 倉鼠(shu)(shu)(shu)卵巢細(xi)胞(bao) 鼻咽癌細(xi)胞(bao)系。
細(xi)胞(bao)(bao)(bao)培養物(wu)(wu)來源于原代外植體或分散的(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸液。通常(chang)在這樣(yang)的(de)(de)培養物(wu)(wu)中(zhong)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)增(zeng)殖形成匯合(he)地單層細(xi)胞(bao)(bao)(bao)或密(mi)集地細(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸液。根據傳統定義(yi),*次收獲和接種的(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)被(bei)稱(cheng)為原代細(xi)胞(bao)(bao)(bao)[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細(xi)胞(bao)(bao)(bao)生命周期有(you)(you)限(xian)(xian),在有(you)(you)限(xian)(xian)的(de)(de)生命周期內需掌握好細(xi)胞(bao)(bao)(bao)zui大的(de)(de)生長(chang)空間,以保持細(xi)胞(bao)(bao)(bao)群中(zhong)基(ji)因型(xing)和表型(xing)的(de)(de)*性(xing)。
細(xi)胞(bao)系是不(bu)斷(duan)生長(chang),分化的(de)細(xi)胞(bao)群,因其經過遺傳(chuan)改(gai)造,致使其具有(you)無限增長(chang)的(de)潛能(neng)。體外生長(chang)的(de)細(xi)胞(bao)系用于(yu)醫療或科研。實際上,連(lian)續(xu)細(xi)胞(bao)系可以用大量次培(pei)養基(ji)培(pei)養,隨著(zhu)代數的(de)增加細(xi)胞(bao)的(de)基(ji)因型和表(biao)型都有(you)可能(neng)發生改(gai)變。
需(xu)要指出的(de)是(shi),在(zai)不同的(de)科研(yan)小組中(zhong)這些術語的(de)定(ding)義會有所不同。許多研(yan)究(jiu)員不用細(xi)胞(bao)系(xi)這個詞表(biao)示(shi)細(xi)胞(bao)群除非(fei)細(xi)胞(bao)經過了遺傳改(gai)造。
傳代培養
懸浮細(xi)胞:
1.懸浮細(xi)(xi)(xi)胞常規傳(chuan)代(dai)(dai)操作(zuo)為半量換(huan)液,分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)(dai),即取出一半細(xi)(xi)(xi)胞懸液轉移到新的培(pei)養(yang)皿/瓶(ping)中(zhong),添(tian)加適當的*培(pei)養(yang)基,于(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang);也可(ke)根據(ju)細(xi)(xi)(xi)胞密度(du)分多瓶(ping)傳(chuan)代(dai)(dai)。
2.注意培養(yang)基PH值(zhi)變化情況(kuang),定(ding)期(qi)換液(ye),待細(xi)胞密度達到70-80%時重(zhong)復傳代操作或者凍(dong)存。
半(ban)貼壁半(ban)懸浮細胞(bao):
1.若懸浮細胞較多且折光率良好,可離心收集,繼(ji)續(xu)培養。
2.若有少量(liang)細(xi)胞懸(xuan)浮,也可不用收(shou)集,傳代操作按常規貼壁細(xi)胞操作流程處理。
3.若懸(xuan)浮細胞較多,離心收(shou)集,原瓶中貼壁(bi)細胞按照常規規貼壁(bi)細胞操作流(liu)程進(jin)行消化、終止消化、吹打(da),并(bing)與(yu)之(zhi)前收(shou)集的懸(xuan)浮細胞混懸(xuan),分瓶培養。
貼壁細(xi)胞(bao):
1.吸出(chu)原(yuan)培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 含0.25% EDTA的胰酶進行(xing)消化(注意把握消化時(shi)間,通常(chang)控(kong)制在1~2min)
2.鏡(jing)下(xia)觀察消化情(qing)況(kuang),在細胞邊緣縮小(xiao)時去掉胰(yi)酶,加6~8 ml *培養基,輕輕吹(chui)打(da)細胞層,盡量把細胞層吹(chui)落、吹(chui)散;
3.取出(chu)部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)懸液轉移到新的培養皿/瓶(ping)中(zhong),添加適當的*培養基,于培養箱(xiang)中(zhong)培養;
4.注意培養基PH值變化情況,定期換液(ye),待(dai)細胞密度達到70-80%以后重復傳代操作或者凍存(cun)。
慧穎生物作為國內幾(ji)大(da)生物試劑(ji)供應商,提供產品(pin)種類多,囊括:檢(jian)測試劑(ji) 、圖像光學 、免疫(yi)檢(jian)測 、生物器材 、原料(liao)試劑(ji)、檢(jian)驗醫技、抗原抗體、家(jia)用醫療(liao)(liao)、消耗材料(liao)、檢(jian)測治療(liao)(liao)、生物耗材等,公司(si)坐(zuo)落于上海眾(zhong)仁路399號運通星財(cai)富廣場,公司(si)交通便利,環境優(you)雅(ya),慧穎生物幾(ji)十名員(yuan)工,熱烈歡迎(ying)您的參觀指導(dao)。
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C33a細(xi)胞(bao)
MDA-MB-453細胞(bao)
SUP-B15細胞(bao)
HEPG2.2.15;表達HBV病毒的人肝(gan)細胞
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CAPAN-1;人胰腺癌細(xi)胞
nci-h446細胞
MKN-45;人胃癌細胞
QSG7701;人正(zheng)常肝細胞
RAMOS;人B淋巴(ba)細(xi)胞瘤細(xi)胞
MIN6細胞
c3a;人永生化肝細胞
SW620;人結(jie)腸癌細胞
sw1990細胞
MG-63細胞
HA-VSMC;人臍靜脈(mo)血管(guan)內皮細胞
MC3T3-E1;小鼠胚(pei)胎成骨(gu)細(xi)胞前體細(xi)胞
CTLL-2;小鼠T淋巴(ba)細(xi)胞
A549;人(ren)肺癌細胞
HACAT;人永生化表(biao)皮細胞
ES-2;人卵巢癌(ai)細胞
CHO;中(zhong)國倉鼠卵巢細胞
HPDE6C7細(xi)胞
HGC-27;人胃(wei)癌細胞(未分化)
huvec;人臍靜脈血(xue)管內皮細胞(bao)
MC-38;結腸癌細胞株(zhu)
HSF;人皮膚成纖(xian)維細(xi)胞
jeg-3細胞
PC9;人肺腺癌細胞(bao)
CAL-12T;人非小細胞(bao)肺癌
H9細胞
HeP3B;人肝(gan)癌細胞
HS578BST
HL-60;人(ren)原(yuan)髓(sui)細胞(bao)白血(xue)病(bing)細胞(bao)
AGS;人(ren)胃腺(xian)癌細胞
tpc-1細(xi)胞(bao)
MDBK;牛(niu)腎細(xi)胞
L1210;小鼠淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)白血(xue)病
BCPAP;人甲狀腺癌乳頭狀細胞
H1299;人肺腺癌細(xi)胞
A7R5;大鼠主動脈(mo)平(ping)滑肌細胞
ges-1細胞
293T;人(ren)胚腎細(xi)胞
calu-1細胞
HBZY-1;大鼠腎小球系(xi)膜細(xi)胞
HCCLM3細胞(bao)
AR42J;大(da)鼠胰腺外分泌腺腫瘤細胞
PANC-1細胞
hfob1.19;SV40轉(zhuan)染人成骨細胞
L929;小(xiao)鼠結締(di)組織(zhi)L細胞株(zhu)929克隆
HCC94;人(ren)子(zi)宮鱗(lin)癌細胞(高(gao)分(fen)化)
人乳腺癌細胞;MDA-MB-231
scc-9;人(ren)類鱗狀(zhuang)上(shang)皮舌(she)癌細胞
sk-mes-1細(xi)胞
Pfeiffer;人(ren)彌漫性大細(xi)胞淋(lin)巴瘤(liu)B淋(lin)巴細(xi)胞
LOVO;人結腸癌細胞
人胃(wei)癌細胞;SGC-7901
人(ren)結腸(chang)癌細胞(bao);HCT-116
CAL-27;人舌鱗癌細(xi)胞
Bend.3;小鼠(shu)腦微血管內皮細(xi)胞株
PC-12(未分化)
Neuro-2a;小(xiao)鼠腦神(shen)經瘤細(xi)胞
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人肝癌細胞;BEL-7404
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大(da)鼠肺泡巨噬細(xi)胞(bao);NR8383
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RAW264.7;小鼠單核巨噬細胞(bao)白血病細胞(bao)
低(di)轉移(yi)人肝癌細(xi)胞;MHCC97-L
Bcap-37;人乳腺(xian)癌細(xi)胞(bao)
LX-2;人肝星(xing)形細(xi)胞
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人腎透明(ming)細胞(bao)腺癌細胞(bao);786-O
MCF-7/ADR;人乳腺癌阿霉素耐(nai)藥細胞(bao)株
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J774A.1細(xi)胞
C6;大鼠神經膠質瘤細(xi)胞
MDA-MB-435S;人乳腺導管癌細(xi)胞
MCF7細胞
sgc-7901/ddp細胞
BT474細胞
HEPG2細(xi)胞
BJ細胞
ID8細胞
H1650細胞
BEAS-2B;人(ren)支氣(qi)管(guan)上皮細胞
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SMMC-7721細胞
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PC-3細胞
ovar3細胞
A549/DDP;人肺腺癌耐順鉑(bo)株(zhu)
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